血管紧张素转换酶基因多态性与慢性阻塞性肺病关系探讨
http://www.100md.com
2001年10月4日
北京同仁医院呼吸内科
顾海彤
[摘要]许多研究揭示，人类血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme，
ACE)基因第16内含子中有一段287碱基对(base pair,bp)的插入(insertion，I)和缺失(dele-tion，D)多态性，此多态性与某些肺部疾病的发病机制和肺部某些功能之间存在一定关系。目的因为ACE是肾素血管紧张素系统(RAS)酶/底物级链反应体系中的一个关键酶，在心血管生理和病理学上起重要作用，ACE基因多态性在一定程度上决定血浆ACE的浓度，故探讨ACE基因I/D多态性对在分子水平阐明某些肺部疾病的发病机制很有意义。方法PCR检测ACE基因多态性：用标准酚/氯仿法由周围血白细胞内提取基因组DNA，以PCR扩增对象基因组DNA中ACE基因第16内含子插入缺失多态性。PCR反引物为正向
5’CTGGA GACCACTCCCATCCTTTCT3’及反向5’GATGTGGCCATCACACATTCGTCAGAT3’。
在25uL的反应体系中包括各10pmol的引物，2.5uL的10buffer，1mmol/1dNTP，
1U Taq酶，模板DNA 0.1ug，在PCR自动循环仪上按以下条件进行循环反应；94℃
预变性60s后进入循环，反应条件是94℃变性60s；58℃退火70s，72℃延伸80s；完成35个
循环后在72℃再延伸5min，取扩增产物5ul，加栽样缓冲液1ul后在2%琼脂凝胶中进行电
泳分析。血清ACE水平测定：采用紫外分光光度法检测，单位U/L。结论COPD患者中
DD基因型分布较非DD基因型有差异性，且DD型血清ACE水平较非DD型ACE水平高c
故推认ACE基因I/D多态性是COPD发病的危险因素之一，有可能成为解释COPD肺心
病发病机制的重要依据，有可能成为CODP诊断治疗和预后观察的临床或亚临床标识物。, http://www.100md.com
顾海彤
[摘要]许多研究揭示，人类血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme，
ACE)基因第16内含子中有一段287碱基对(base pair,bp)的插入(insertion，I)和缺失(dele-tion，D)多态性，此多态性与某些肺部疾病的发病机制和肺部某些功能之间存在一定关系。目的因为ACE是肾素血管紧张素系统(RAS)酶/底物级链反应体系中的一个关键酶，在心血管生理和病理学上起重要作用，ACE基因多态性在一定程度上决定血浆ACE的浓度，故探讨ACE基因I/D多态性对在分子水平阐明某些肺部疾病的发病机制很有意义。方法PCR检测ACE基因多态性：用标准酚/氯仿法由周围血白细胞内提取基因组DNA，以PCR扩增对象基因组DNA中ACE基因第16内含子插入缺失多态性。PCR反引物为正向
5’CTGGA GACCACTCCCATCCTTTCT3’及反向5’GATGTGGCCATCACACATTCGTCAGAT3’。
在25uL的反应体系中包括各10pmol的引物，2.5uL的10buffer，1mmol/1dNTP，
1U Taq酶，模板DNA 0.1ug，在PCR自动循环仪上按以下条件进行循环反应；94℃
预变性60s后进入循环，反应条件是94℃变性60s；58℃退火70s，72℃延伸80s；完成35个
循环后在72℃再延伸5min，取扩增产物5ul，加栽样缓冲液1ul后在2%琼脂凝胶中进行电
泳分析。血清ACE水平测定：采用紫外分光光度法检测，单位U/L。结论COPD患者中
DD基因型分布较非DD基因型有差异性，且DD型血清ACE水平较非DD型ACE水平高c
故推认ACE基因I/D多态性是COPD发病的危险因素之一，有可能成为解释COPD肺心
病发病机制的重要依据，有可能成为CODP诊断治疗和预后观察的临床或亚临床标识物。, http://www.100md.com