卵巢癌自杀基因治疗中的旁观者效应
中科技大学附属同济医院妇产科张阿丽等,为探讨间隙连接蛋白(Cx)43在卵巢癌单纯疱疹病毒-胸苷激酶更昔洛韦(HSV-TK/GCV)治疗的旁观者效应中的作用,观察全反式维甲酸对两者关系的影响,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,比较经HSV-TK/GCV治疗及全反式维酸作用前后卵巢癌细胞株OVCAR3、CAOV3细胞旁观者效应的强弱。他们采用流式细胞术、Western Blot、间接免疫荧光染色法检测两卵巢癌细胞株全反式维甲酸作用前后Cx43的表达。Cx43的表达以平均荧光强度表示。
结果显示:⑴HSV-TK/GCV对OVCAR3细胞产生较明显的旁观者效应,而对CAOV3细胞旁观者效应弱,两者比较,差异有显著性(P<0.05)。⑵全反式维甲酸对OVCAR3细胞的旁观者效应有增强作用(P<0.05),但不影响CAOV3细胞的旁观者效应(P<0.05)。⑶流式细胞术提示,OVCAR3细胞中Cx43的表达为4.45,而CAOV3细胞的Cx43表达为0.89,两者比较,差异有显著性(P<0.05);Western Blot、间接免疫荧光染色检测亦表明,OVCAR3细胞有Cx43的表达,且定位于细胞膜,而CAOV3细胞中无Cx43的表达。⑷全反式维甲酸作用后,Western Blot、间接免疫荧光染色检测均表明,两卵巢癌细胞株的Cx43表达增加;流式细胞术显示,细胞中Cx43表达均明显增加,OVCAR3细胞由4.45增至9.83,CAOV3细胞由0.89增至3.15(P均<0.05),Cx43仍定位于OVCAR3的细胞膜和CAOV3的细胞浆。作者认为,卵巢癌HSV-TK/GCV治疗的旁观者效应与Cx43表达及其定位有关,增强细胞膜Cx43表达将增加卵巢癌HSV-TK/GCV的旁观者效应,提高其疗效。
(侯存明)
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