埃波拉出血热的若干研究进展
编者按 世界卫生组织(WHO)于近日发布公告，加蓬爆发了埃波拉出血热。目前已发现了数十例可疑病人，其中15人已死亡。我国有关部门亦于上月29日发布指令，严防埃波拉病毒闯入国门。在此，我们向广大读者简要介绍近年来国际上对埃波拉病毒的研究进展，以及诊断、治疗与预防的方法。
埃波拉出血热是由埃波拉病毒(Ebola virus)引起的急性传染病,至今为止仅在非洲少数国家发生过数起暴发流行。该病病死率很高,危害很大。该病毒有可能成为生物恐怖主义者的武器，应引起我国医务人员的注意。近两年来对该病毒感染有关的几个方面研究取得了一些进展，本文对部分进展作简要介绍。
发病机制与病理改变
目前人们对埃波拉出血热的发病机制了解得还很不全面。但有报告表明，发病后生存者和死亡者在免疫反应方面有显著不同。在生存者，早期出现滴度增高的针对病毒核心蛋白和40 kD病毒蛋白质的抗体，其后便有循环中病毒抗原的清除和细胞毒性T细胞的激活(这一点由外周血单核细胞中FasL穿孔素即perforin、CD28和γ干扰素mRNA水平的上调所证实)。与此相反，致命性感染的特征是体液免疫反应受损，有特异性IgG抗体缺如，IgM抗体也很少能被测定出。在T细胞被早期激活之后，在病人死亡前数日即有T细胞相关mRNA (包括CD3和CD8)的消失。血液白细胞中的DNA的断裂以及血浆中41/7核基质蛋白的释放都表明，病人死亡前最后5天有大量血管内的细胞凋亡。因此可以认为，在埃波拉病毒感染后早期的事件决定对病毒复制的控制, 也决定病人是否恢复病情、严重度和死亡。这些研究说明，人体感染埃波拉病毒后至少部分病例出现免疫受抑制现象。而这种免疫抑制现象的机制，与I类主要组织相容性抗原复合体(MHC-I)蛋白质表达受抑制、对α和γ干扰素的多基因诱导的抑制等相关。但对IL-1β诱导IL-6和细胞间黏附分子1(ICAM-1)却无抑制作用，这提示对干扰素信号产生与传递的抑制是特异的。这些导致干扰素信号产生与传递的阻滞在埃波拉病毒诱发的免疫抑制中起至关重要的作用。
, 百拇医药
诊断
目前在非洲疫区使用的实验室检查方法有检测特异性IgM和IgG抗体的ELISA和Western印迹试验。有人于1995年在刚果民主共和国的Kikwit地区发生埃波拉出血热暴发时，检测埃波拉病毒抗原，证实其与逆转录PCR(RT-PCR)检测病毒核酸的一致性几乎达到100%。用RT-PCR方法检测该病毒的RNA，一般认为敏感度很高。用抗原检测或RT-PCR检测病毒RNA的方法还有一种好处是：可对标本进行γ-射线照射，将病毒灭活之后，仍可检测，其结果不受显著影响。
Saijo等近期报告，应用以基因工程方法制备的埃波拉病毒核心蛋白质羧基段110和102个氨基酸的肽为抗原，开发出检测埃波拉病毒IgG抗体的ELISA方法，具有很高的特异性和敏感性，对埃波拉病毒和马尔堡病毒感染具有诊断意义。但对埃波拉出血热而言，急性期不少病人血清中特异性抗体的水平相当低，其诊断价值可能不如抗原或核酸检测高。
, 百拇医药 埃波拉出血热病人血液中特异性IgM抗体在发病后2～9天出现，持续存在到发病后30～168天。而IgG抗体在发病后6～18天出现，并且至少持续存在至出现症状后661～749天。
治疗
体外研究表明，多种腺苷类似物抑制埃波拉病毒复制，其可能的机制是，阻滞受感染细胞的S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶, 从而间接地限制病毒mRNA的5'帽的甲基化。研究人员建立的一种小鼠埃波拉病毒感染模型，在感染该病毒后5～7天死亡。给这种小鼠(成年、免疫健全)在感染埃波拉病毒同时或感染后第1天，给予一种腺苷类似物，碳环3-去氮腺苷，当剂量≥0.7 mg/kg，每8小时给药1次时，可完全地保护，即小鼠无一死亡。在感染后第2天开始给药时，小鼠肝内病毒平均滴度为3×105蚀斑形成单位(pfu)/g, 脾脏内的滴度为2×106pfu/g, 取得的保护率为90%；在感染后第3天，肝内病毒滴度为2×107pfu/g，脾内滴度为2×108pfu/g；2.2 mg/kg剂量给药，小鼠的生存率为40%。对同一种药的另一项研究表明，以2.2～20.0 mg/kg剂量给药，可保护小鼠，不因这种致死性埃波拉病毒感染而死亡。给该物质单剂80 mg/kg, 或给另一种腺苷类似物，也可提供同样的或更好的保护作用，而不引起急性毒性。
, 百拇医药
预防
目前对本病尚无可供实际应用的主动免疫措施。但有文献报告表明，用埃波拉病毒的DNA疫苗接种给猕猴，并以表达该病毒核心蛋白的腺病毒载体强化，然后以具有强毒力的野生型埃波拉病毒攻击，可以有效地保护实验动物不发生该病毒感染。用小鼠进行的研究也表明，表达埃波拉病毒糖蛋白或核心蛋白的DNA，可以以剂量依赖的方式保护致死性埃波拉病毒的感染。也有人将埃波拉病毒的核心蛋白基因或糖蛋白基因重组到减毒委内瑞拉马脑炎病毒的RNA中，以此重组体免疫小鼠或豚鼠，并以埃波拉病毒进行攻击。其结果，该重组体可保护小鼠免受埃波拉病毒感染。该重组体经进一步研究可作为埃波拉出血热的候选疫苗。
有人为开发出高效价抗埃波拉病毒抗体，用致病性极强的活埃波拉病毒免疫了不易感的动物，山羊，然后制备免疫球蛋白。这样取得的高效价免疫球蛋白在对动物的攻击实验中，在攻击后48小时以内使用，取得了很高的保护指数。然后将这种抗体用于疑及已经发生意外感染的实验室高危工作人员，取得了保护效果。这种免疫球蛋白对于意外感染埃波拉病毒者的紧急处理方面有用。, 百拇医药(照日)
埃波拉出血热是由埃波拉病毒(Ebola virus)引起的急性传染病,至今为止仅在非洲少数国家发生过数起暴发流行。该病病死率很高,危害很大。该病毒有可能成为生物恐怖主义者的武器，应引起我国医务人员的注意。近两年来对该病毒感染有关的几个方面研究取得了一些进展，本文对部分进展作简要介绍。
发病机制与病理改变
目前人们对埃波拉出血热的发病机制了解得还很不全面。但有报告表明，发病后生存者和死亡者在免疫反应方面有显著不同。在生存者，早期出现滴度增高的针对病毒核心蛋白和40 kD病毒蛋白质的抗体，其后便有循环中病毒抗原的清除和细胞毒性T细胞的激活(这一点由外周血单核细胞中FasL穿孔素即perforin、CD28和γ干扰素mRNA水平的上调所证实)。与此相反，致命性感染的特征是体液免疫反应受损，有特异性IgG抗体缺如，IgM抗体也很少能被测定出。在T细胞被早期激活之后，在病人死亡前数日即有T细胞相关mRNA (包括CD3和CD8)的消失。血液白细胞中的DNA的断裂以及血浆中41/7核基质蛋白的释放都表明，病人死亡前最后5天有大量血管内的细胞凋亡。因此可以认为，在埃波拉病毒感染后早期的事件决定对病毒复制的控制, 也决定病人是否恢复病情、严重度和死亡。这些研究说明，人体感染埃波拉病毒后至少部分病例出现免疫受抑制现象。而这种免疫抑制现象的机制，与I类主要组织相容性抗原复合体(MHC-I)蛋白质表达受抑制、对α和γ干扰素的多基因诱导的抑制等相关。但对IL-1β诱导IL-6和细胞间黏附分子1(ICAM-1)却无抑制作用，这提示对干扰素信号产生与传递的抑制是特异的。这些导致干扰素信号产生与传递的阻滞在埃波拉病毒诱发的免疫抑制中起至关重要的作用。
, 百拇医药
诊断
目前在非洲疫区使用的实验室检查方法有检测特异性IgM和IgG抗体的ELISA和Western印迹试验。有人于1995年在刚果民主共和国的Kikwit地区发生埃波拉出血热暴发时，检测埃波拉病毒抗原，证实其与逆转录PCR(RT-PCR)检测病毒核酸的一致性几乎达到100%。用RT-PCR方法检测该病毒的RNA，一般认为敏感度很高。用抗原检测或RT-PCR检测病毒RNA的方法还有一种好处是：可对标本进行γ-射线照射，将病毒灭活之后，仍可检测，其结果不受显著影响。
Saijo等近期报告，应用以基因工程方法制备的埃波拉病毒核心蛋白质羧基段110和102个氨基酸的肽为抗原，开发出检测埃波拉病毒IgG抗体的ELISA方法，具有很高的特异性和敏感性，对埃波拉病毒和马尔堡病毒感染具有诊断意义。但对埃波拉出血热而言，急性期不少病人血清中特异性抗体的水平相当低，其诊断价值可能不如抗原或核酸检测高。
, 百拇医药 埃波拉出血热病人血液中特异性IgM抗体在发病后2～9天出现，持续存在到发病后30～168天。而IgG抗体在发病后6～18天出现，并且至少持续存在至出现症状后661～749天。
治疗
体外研究表明，多种腺苷类似物抑制埃波拉病毒复制，其可能的机制是，阻滞受感染细胞的S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶, 从而间接地限制病毒mRNA的5'帽的甲基化。研究人员建立的一种小鼠埃波拉病毒感染模型，在感染该病毒后5～7天死亡。给这种小鼠(成年、免疫健全)在感染埃波拉病毒同时或感染后第1天，给予一种腺苷类似物，碳环3-去氮腺苷，当剂量≥0.7 mg/kg，每8小时给药1次时，可完全地保护，即小鼠无一死亡。在感染后第2天开始给药时，小鼠肝内病毒平均滴度为3×105蚀斑形成单位(pfu)/g, 脾脏内的滴度为2×106pfu/g, 取得的保护率为90%；在感染后第3天，肝内病毒滴度为2×107pfu/g，脾内滴度为2×108pfu/g；2.2 mg/kg剂量给药，小鼠的生存率为40%。对同一种药的另一项研究表明，以2.2～20.0 mg/kg剂量给药，可保护小鼠，不因这种致死性埃波拉病毒感染而死亡。给该物质单剂80 mg/kg, 或给另一种腺苷类似物，也可提供同样的或更好的保护作用，而不引起急性毒性。
, 百拇医药
预防
目前对本病尚无可供实际应用的主动免疫措施。但有文献报告表明，用埃波拉病毒的DNA疫苗接种给猕猴，并以表达该病毒核心蛋白的腺病毒载体强化，然后以具有强毒力的野生型埃波拉病毒攻击，可以有效地保护实验动物不发生该病毒感染。用小鼠进行的研究也表明，表达埃波拉病毒糖蛋白或核心蛋白的DNA，可以以剂量依赖的方式保护致死性埃波拉病毒的感染。也有人将埃波拉病毒的核心蛋白基因或糖蛋白基因重组到减毒委内瑞拉马脑炎病毒的RNA中，以此重组体免疫小鼠或豚鼠，并以埃波拉病毒进行攻击。其结果，该重组体可保护小鼠免受埃波拉病毒感染。该重组体经进一步研究可作为埃波拉出血热的候选疫苗。
有人为开发出高效价抗埃波拉病毒抗体，用致病性极强的活埃波拉病毒免疫了不易感的动物，山羊，然后制备免疫球蛋白。这样取得的高效价免疫球蛋白在对动物的攻击实验中，在攻击后48小时以内使用，取得了很高的保护指数。然后将这种抗体用于疑及已经发生意外感染的实验室高危工作人员，取得了保护效果。这种免疫球蛋白对于意外感染埃波拉病毒者的紧急处理方面有用。, 百拇医药(照日)