东宝肝泰片药理实验研究
东宝肝泰片是中国通化东宝药业股份有限公司研制开发的一种保肝新药，由蛋氨酸、重酒石酸胆碱、维生素B12等9种药物组成，临床上主要用于治疗脂肪肝、急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化等症。该药剂型为片剂，给药途径为口服，临床用药剂量为成人0.04 g/kg/d，临床用药周期为2个月。我们在完成了急性毒性试验和长期毒性试验的基础上，对与其功能有关的药效学进行了如下实验。
一.东宝肝泰片对DL-乙硫氨基丁酸模型小鼠肝和血清甘油三酯含量的影响
我们将东宝肝泰片配制成2%和1%的混悬液。将40只昆明小鼠(体重18～22g)随机分为四组，即正常对照组、DL-乙硫氨基丁酸(DL-E)模型组、东宝肝泰片大剂量组和小剂量组，每组10只。实验前2天开始灌胃给药。东宝肝泰片大剂量组给药0.8 g/kg体重(2% 的混悬液40 ml/kg);东宝肝泰片小剂量组给药0.4 g/kg体重(1% 的混悬液40 ml/kg);模型组和正常对照组给同容积蒸馏水。
, http://www.100md.com
给药后第3天，除正常对照组外，其他三组动物均每周给予0.625%的DL-E 0.4 ml/10g(250 mg/kg)。24小时后，各组小鼠处死，取血分离血清，同时取肝脏右叶0.2g,加4ml生理盐水，制成5%的肝组织匀浆液，以3500rpm离心15分钟，取上清，通过全自动化分析仪测试血清和肝组织中甘油三酯(TG)含量，样品中TG含量以均数±标准差(x±s)表示，组间差异的显著性采用t检验。
结果表明，模型组小鼠给予DL-E 24小时后，其肝组织匀浆中TG含量显著高于正常对照组，而预先给予东宝肝泰片的两组动物，给予DL-E 24小时后，其肝脏TG含量显著低于模型组，说明东宝肝泰片对DL-E所致小鼠肝脏脂肪蓄积有一定的抑制作用，结果详见表1。
表1
东宝肝泰片对DL-E模型小鼠肝组织TG含量的影响
组别
, 百拇医药
例数
肝TG含量(mmol/Lx±s)
正常对照组
10
0.34±0.05***
DL-E模型组
10
0.76±0.17
2%肝泰片
+DL-E
10
0.49±0.12***
, 百拇医药
1%肝泰片
+DL-E
10
0.60±0.14*
注：与对照组比较*P<0.05;***P<0.001。
观察东宝肝泰片对DL-E模型小鼠血清TG含量的影响，结果表明，给予DL-E 24小时后，模型组小鼠血清中TG含量虽有升高趋势，但与对照组比较无显著性差异，东宝肝泰片对小鼠血清TG的含量无显著影响(P> 0.05)。
二.东宝肝泰片对实验性肝硬化模型大鼠肝胶原蛋白含量的影响
研究者将东宝肝泰片配制成4%和2%混悬液。将60只昆明大鼠(体重250～300 g)随机分为四组，即正常对照组、肝硬化模型组、东宝肝泰片大剂量组(1.6 g/kg)和小剂量组(0.8 g/kg),每组15只。除正常对照组常规饲养外，其他三组前2周饲以单纯玉米粉加20%猪油加0.5%胆固醇，以30%酒精为饮料；后4周单纯玉米粉加0.5%胆固醇饲养。实验第1天皮下注射CCl4原液5 ml/kg体重，以后每3天皮下注射1次40%CCl4 3 ml/kg体重。东宝肝泰片组于实验第2天开始灌胃给药，每天1次，于第6周处死动物，取肝脏制成肝粉。检测胶原蛋白含量，以胶原蛋白含量作为肝硬化程度的判定指标。结果以均数±标准差(x±s)表示，组间差别显著性用t检验。实验结果见表2。
, 百拇医药
表2 东宝肝泰片对实验性肝硬化模型大鼠肝胶原蛋白含量的影响
组别
例数
肝脏胶原蛋白含量(mgx±s)
正常对照组
15
21.2±6.1
模型组
9
39.5±9.4
高剂量组
13
, 百拇医药
29.4±7.0*
低剂量组
11
31.3±6.2*
注：与模型组比较*P<0.05
如表2所示，给药组大鼠的肝胶原蛋白含量显著低于模型组(P< 0.05)。表明东宝肝泰片2个剂量组均对CCl4所致大鼠肝硬化具有一定改善作用。
药效学实验表明，东宝肝泰片对动物实验性脂肪肝模型和肝硬化模型都有明显的改善使用。
DL-E脂肪肝模型是目前脂肪肝药理实验研究中常用的动物模型，DL-E可导致肝脏脂肪代谢障碍，以致肝细胞内脂肪蓄积继而引起肝脏脂肪病变。DL-E的化学结构与甲硫氨酸相似，后者为体内物质代谢中甲基转移的供体，乙硫氨基丁酸可与之竞争，取代甲硫氨酸供应的甲基。由于肝脏甲基供给不足，蛋白质合成障碍，生成的RNA和蛋白质中含有一定量的乙基基团，使蛋白质的功能异常。其中包括肝内载脂蛋白复合物功能障碍，以致肝内TG转运障碍，造成TG蓄积，继而发展成脂肪肝。东宝肝泰片主要由蛋氨酸、重酒石酸胆碱、维生素B12等多种成分组成，一方面可以提供更多的甲基，另一方面有些成分具有亲脂作用和趋脂作用，因此，实验中观察到，动物给予DL-E后，模型组小鼠肝脏TG的含量明显高于正常对照组，表明DL-E可明显增加肝脏TG的含量，而预先给予东宝肝泰片，可使DL-E模型小鼠肝脏TG含量下降，表明东宝肝泰片对DL-E所致的肝脂肪蓄积具有一定的改善作用。
, 百拇医药
实验研究表明，长期营养不良、慢性肝细胞损伤等多种因素均可以导致肝细胞变性，纤维组织增生，并可以发展成肝硬化。大鼠实验性肝硬化模型正是根据这一原理进行复制的。实验中，动物饲以单纯玉米粉(蛋白质含量低、缺乏色氨酸和蛋氨酸)辅以胆固醇和猪油，并以乙醇为饮料(增加体内胆碱的需求量)，再利用CCl4损伤肝细胞，共同导致肝细胞变性、坏死，纤维组织增生等病理变化，继而发展成肝硬化。因此，这一模型常用于肝硬化预防和治疗药物的筛选。本实验研究利用这一模型观察了东宝肝泰片对大鼠实验性肝硬化时肝羟脯氨酸的含量变化，间接反映了肝硬化时肝内胶原蛋白的增加情况及纤维化程度。结果表明，东宝肝泰片对肝硬化模型大鼠肝脏胶原蛋白的增生有一定的改善作用，其作用机制可能与该药提供蛋氨酸、甲基及其它趋脂物质有关。
综上所述，东宝肝泰片对于减轻肝脏脂肪蓄积，减缓肝纤维组织增生具有一定的治疗和预防作用，是一种治疗和预防脂肪肝、肝硬化等肝脏疾病的理想药物。, http://www.100md.com(张永和周鸣陈声武等)
一.东宝肝泰片对DL-乙硫氨基丁酸模型小鼠肝和血清甘油三酯含量的影响
我们将东宝肝泰片配制成2%和1%的混悬液。将40只昆明小鼠(体重18～22g)随机分为四组，即正常对照组、DL-乙硫氨基丁酸(DL-E)模型组、东宝肝泰片大剂量组和小剂量组，每组10只。实验前2天开始灌胃给药。东宝肝泰片大剂量组给药0.8 g/kg体重(2% 的混悬液40 ml/kg);东宝肝泰片小剂量组给药0.4 g/kg体重(1% 的混悬液40 ml/kg);模型组和正常对照组给同容积蒸馏水。
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给药后第3天，除正常对照组外，其他三组动物均每周给予0.625%的DL-E 0.4 ml/10g(250 mg/kg)。24小时后，各组小鼠处死，取血分离血清，同时取肝脏右叶0.2g,加4ml生理盐水，制成5%的肝组织匀浆液，以3500rpm离心15分钟，取上清，通过全自动化分析仪测试血清和肝组织中甘油三酯(TG)含量，样品中TG含量以均数±标准差(x±s)表示，组间差异的显著性采用t检验。
结果表明，模型组小鼠给予DL-E 24小时后，其肝组织匀浆中TG含量显著高于正常对照组，而预先给予东宝肝泰片的两组动物，给予DL-E 24小时后，其肝脏TG含量显著低于模型组，说明东宝肝泰片对DL-E所致小鼠肝脏脂肪蓄积有一定的抑制作用，结果详见表1。
表1
东宝肝泰片对DL-E模型小鼠肝组织TG含量的影响
组别
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例数
肝TG含量(mmol/Lx±s)
正常对照组
10
0.34±0.05***
DL-E模型组
10
0.76±0.17
2%肝泰片
+DL-E
10
0.49±0.12***
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1%肝泰片
+DL-E
10
0.60±0.14*
注：与对照组比较*P<0.05;***P<0.001。
观察东宝肝泰片对DL-E模型小鼠血清TG含量的影响，结果表明，给予DL-E 24小时后，模型组小鼠血清中TG含量虽有升高趋势，但与对照组比较无显著性差异，东宝肝泰片对小鼠血清TG的含量无显著影响(P> 0.05)。
二.东宝肝泰片对实验性肝硬化模型大鼠肝胶原蛋白含量的影响
研究者将东宝肝泰片配制成4%和2%混悬液。将60只昆明大鼠(体重250～300 g)随机分为四组，即正常对照组、肝硬化模型组、东宝肝泰片大剂量组(1.6 g/kg)和小剂量组(0.8 g/kg),每组15只。除正常对照组常规饲养外，其他三组前2周饲以单纯玉米粉加20%猪油加0.5%胆固醇，以30%酒精为饮料；后4周单纯玉米粉加0.5%胆固醇饲养。实验第1天皮下注射CCl4原液5 ml/kg体重，以后每3天皮下注射1次40%CCl4 3 ml/kg体重。东宝肝泰片组于实验第2天开始灌胃给药，每天1次，于第6周处死动物，取肝脏制成肝粉。检测胶原蛋白含量，以胶原蛋白含量作为肝硬化程度的判定指标。结果以均数±标准差(x±s)表示，组间差别显著性用t检验。实验结果见表2。
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表2 东宝肝泰片对实验性肝硬化模型大鼠肝胶原蛋白含量的影响
组别
例数
肝脏胶原蛋白含量(mgx±s)
正常对照组
15
21.2±6.1
模型组
9
39.5±9.4
高剂量组
13
, 百拇医药
29.4±7.0*
低剂量组
11
31.3±6.2*
注：与模型组比较*P<0.05
如表2所示，给药组大鼠的肝胶原蛋白含量显著低于模型组(P< 0.05)。表明东宝肝泰片2个剂量组均对CCl4所致大鼠肝硬化具有一定改善作用。
药效学实验表明，东宝肝泰片对动物实验性脂肪肝模型和肝硬化模型都有明显的改善使用。
DL-E脂肪肝模型是目前脂肪肝药理实验研究中常用的动物模型，DL-E可导致肝脏脂肪代谢障碍，以致肝细胞内脂肪蓄积继而引起肝脏脂肪病变。DL-E的化学结构与甲硫氨酸相似，后者为体内物质代谢中甲基转移的供体，乙硫氨基丁酸可与之竞争，取代甲硫氨酸供应的甲基。由于肝脏甲基供给不足，蛋白质合成障碍，生成的RNA和蛋白质中含有一定量的乙基基团，使蛋白质的功能异常。其中包括肝内载脂蛋白复合物功能障碍，以致肝内TG转运障碍，造成TG蓄积，继而发展成脂肪肝。东宝肝泰片主要由蛋氨酸、重酒石酸胆碱、维生素B12等多种成分组成，一方面可以提供更多的甲基，另一方面有些成分具有亲脂作用和趋脂作用，因此，实验中观察到，动物给予DL-E后，模型组小鼠肝脏TG的含量明显高于正常对照组，表明DL-E可明显增加肝脏TG的含量，而预先给予东宝肝泰片，可使DL-E模型小鼠肝脏TG含量下降，表明东宝肝泰片对DL-E所致的肝脂肪蓄积具有一定的改善作用。
, 百拇医药
实验研究表明，长期营养不良、慢性肝细胞损伤等多种因素均可以导致肝细胞变性，纤维组织增生，并可以发展成肝硬化。大鼠实验性肝硬化模型正是根据这一原理进行复制的。实验中，动物饲以单纯玉米粉(蛋白质含量低、缺乏色氨酸和蛋氨酸)辅以胆固醇和猪油，并以乙醇为饮料(增加体内胆碱的需求量)，再利用CCl4损伤肝细胞，共同导致肝细胞变性、坏死，纤维组织增生等病理变化，继而发展成肝硬化。因此，这一模型常用于肝硬化预防和治疗药物的筛选。本实验研究利用这一模型观察了东宝肝泰片对大鼠实验性肝硬化时肝羟脯氨酸的含量变化，间接反映了肝硬化时肝内胶原蛋白的增加情况及纤维化程度。结果表明，东宝肝泰片对肝硬化模型大鼠肝脏胶原蛋白的增生有一定的改善作用，其作用机制可能与该药提供蛋氨酸、甲基及其它趋脂物质有关。
综上所述，东宝肝泰片对于减轻肝脏脂肪蓄积，减缓肝纤维组织增生具有一定的治疗和预防作用，是一种治疗和预防脂肪肝、肝硬化等肝脏疾病的理想药物。, http://www.100md.com(张永和周鸣陈声武等)