维拉帕米逆转胰腺癌化疗药耐药的研究
Biedler和Riehm于1970年首先提出肿瘤的多药耐药这一概念，即肿瘤细胞对多种结构和功能不相关的化疗药物的交叉耐药现象。近30年的基础和临床研究表明，大多数肿瘤的耐药与多药耐药基因MDR1的表达有关，其蛋白产物为P-170，是一种细胞膜糖蛋白，具有能量依赖性药泵的功能，能将多种抗癌药物和其它疏水性化合物主动转运出细胞外，使细胞内药物浓度降低，最终导致细胞耐药。1981年Tsuruo首次报告，P-170拮抗剂维拉帕米可逆转MDR1引起的肿瘤耐药现象。然而，目前国内尚无有关胰腺癌耐药机制的相关报道，国外这方面的研究亦较少。
胰腺癌是一种恶性程度很高的消化道肿瘤，手术切除率只有5%～25%，多数患者只能采用化疗、放疗等姑息治疗手段。然而，肿瘤细胞对化疗药物的耐药现象，已成为目前影响肿瘤化疗效果的重要因素之一。我们的研究旨在探索胰腺癌耐药机制，希望通过逆转P-170的功能，找到一条提高胰腺癌化疗疗效的有效途径。
方 法
将人胰腺癌细胞株SW1990、CAPAN-1于10%FCS-1640培养液，37℃、5%CO2、饱和湿度的孵箱中培养。采用罗丹明外排试验检测P-170的功能，分两组进行：单纯罗丹明组，加入终浓度为0.15 μg/ml的罗丹明；罗丹明+维拉帕米组，先加入终浓度为4.5 μmol/L的维拉帕米，1小时后再加入终浓度为0.15 μg/ml的罗丹明。
结 果
MDR1 mRNA表达的半定量分析结果显示，在SW1990中MDR1 mRNA的表达丰度为0.3605±0.0026，在CAPAN-1中的表达丰度为0.0858±0.0014(P< 0.01)，说明SW1990中MDR1 mRNA表达显著高于CAPAN-1。罗丹明外排试验表明，维拉帕米阻断前，SW1990、CAPAN-1阳性细胞的百分数分别为58.3%和79.0%，说明CAPAN-1中几乎没有P-170的功能；维拉帕米阻断后，可将SW1990阳性细胞比例增加至83.3%，而对于CAPAN-1则无影响。四甲基偶氮唑盐(MTT)法结果显示，SW1990较CAPAN-1对多柔比星(ADM)和丝裂霉素(MMC)耐药，且两者IC50有显著差异(P< 0.01)。
讨 论
本研究提示，维拉帕米能够逆转SW1990对ADM和MMC耐药。但MDR1并不能完全解释胰腺癌的耐药机制，如胰腺癌对5氟尿嘧啶(5FU)和吉西他滨(GEM)的耐药就与MDR1无关，故关于胰腺癌的耐药机制尚需深入研究。1987年，Ozols等人首次将维拉帕米联合ADM用于治疗难治性卵巢癌患者，但心脏毒性限制了其临床应用。近年来，右旋维拉帕米毒性明显降低，临床效果良好，在晚期乳腺癌的治疗中与化疗药物配伍，缓解率达14%～32%。我们的研究表明，中等剂量的维拉帕米可明显增加罗丹明外排试验中SW1990阳性细胞的比例，可以逆转胰腺癌细胞株SW1990对MMC和ADM的耐药作用。这一剂量在临床上是可以耐受的。
本研究不仅可以解释胰腺癌患者化疗疗效的个体差异，而且更重要的是，为提高临床胰腺癌化疗疗效提供了有力的理论依据。, 百拇医药(张立阳郭俊超廖泉刘子文赵玉沛)
胰腺癌是一种恶性程度很高的消化道肿瘤，手术切除率只有5%～25%，多数患者只能采用化疗、放疗等姑息治疗手段。然而，肿瘤细胞对化疗药物的耐药现象，已成为目前影响肿瘤化疗效果的重要因素之一。我们的研究旨在探索胰腺癌耐药机制，希望通过逆转P-170的功能，找到一条提高胰腺癌化疗疗效的有效途径。
方 法
将人胰腺癌细胞株SW1990、CAPAN-1于10%FCS-1640培养液，37℃、5%CO2、饱和湿度的孵箱中培养。采用罗丹明外排试验检测P-170的功能，分两组进行：单纯罗丹明组，加入终浓度为0.15 μg/ml的罗丹明；罗丹明+维拉帕米组，先加入终浓度为4.5 μmol/L的维拉帕米，1小时后再加入终浓度为0.15 μg/ml的罗丹明。
结 果
MDR1 mRNA表达的半定量分析结果显示，在SW1990中MDR1 mRNA的表达丰度为0.3605±0.0026，在CAPAN-1中的表达丰度为0.0858±0.0014(P< 0.01)，说明SW1990中MDR1 mRNA表达显著高于CAPAN-1。罗丹明外排试验表明，维拉帕米阻断前，SW1990、CAPAN-1阳性细胞的百分数分别为58.3%和79.0%，说明CAPAN-1中几乎没有P-170的功能；维拉帕米阻断后，可将SW1990阳性细胞比例增加至83.3%，而对于CAPAN-1则无影响。四甲基偶氮唑盐(MTT)法结果显示，SW1990较CAPAN-1对多柔比星(ADM)和丝裂霉素(MMC)耐药，且两者IC50有显著差异(P< 0.01)。
讨 论
本研究提示，维拉帕米能够逆转SW1990对ADM和MMC耐药。但MDR1并不能完全解释胰腺癌的耐药机制，如胰腺癌对5氟尿嘧啶(5FU)和吉西他滨(GEM)的耐药就与MDR1无关，故关于胰腺癌的耐药机制尚需深入研究。1987年，Ozols等人首次将维拉帕米联合ADM用于治疗难治性卵巢癌患者，但心脏毒性限制了其临床应用。近年来，右旋维拉帕米毒性明显降低，临床效果良好，在晚期乳腺癌的治疗中与化疗药物配伍，缓解率达14%～32%。我们的研究表明，中等剂量的维拉帕米可明显增加罗丹明外排试验中SW1990阳性细胞的比例，可以逆转胰腺癌细胞株SW1990对MMC和ADM的耐药作用。这一剂量在临床上是可以耐受的。
本研究不仅可以解释胰腺癌患者化疗疗效的个体差异，而且更重要的是，为提高临床胰腺癌化疗疗效提供了有力的理论依据。, 百拇医药(张立阳郭俊超廖泉刘子文赵玉沛)