犬动力型肺动脉高压模型的建立
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关键词: 左向右分流；肺动脉高压；动物模型，犬
【摘要】 目的 改进左向右分流血管吻合方法，建立动力型肺动脉高压模型。方法 选择本地杂种犬6条，2条利用左肺动脉上叶分支搭桥与降主动脉行端侧吻合(人工PDA)，4条犬利用左锁骨下动脉与左肺动脉行端侧吻合(Blalock法)，吻合口4～6mm,术后笼中饲养4～6个月。通过三腔漂浮导管测定平均肺动脉压(MPAP)、肺毛细血管楔嵌压(PCWP)，计算肺血管阻力(PVR)，取心脏测定右心室(RV)与左室加室间隔(RV+S)重量，肺组织病理切片观察内膜、中膜变化，测定中膜厚度百分比(MT%)和肺小血管肌性动脉百分比(MA%)。结果 MPAP和PVR明显升高，右心室肥厚，肺小血管内膜增生，中膜增厚。结论 本实验未环缩对侧肺动脉，形成了全肺PH，符合疾病的病理生理改变，而且操作比较简便，模型可靠，重复性好，适合研究选用。
, 百拇医药
An animal model of pulmonary hypertension secondary to left-to-right
shunt ZUO Shunqing, GAO Shangzhi, MAO Zhifu. Department of
Cardiothoracic Surgery, the First Affiliated Hospital of Hubei Medical
University, Wuhan, 430060.
【Abstract】 Objective To build a novel animal model of hyperkinetic
, 百拇医药
pulmonary hypertension by improving on the vascular anastomosis of left-to-right
shunt. Methods End-to-side anastomoses of the upper branch
of left pulmonary artery and descending aorta were performed in 2 canines,and between left subclavian artery and left pulmonary artery were done
in 4 canines. Mean pulmonary artery pressure (MPAP) and pulmonary capillary
, 百拇医药
wedge pressure (PCWP) were measured by Swan Ganz, Cardiac output (CO)
was valued with resistance method after 4-6 months follwing shunt, and
pulmonary vascular resistance (PVR) was caculated. Aftersacrificed, the
weight of right ventricle and left ventricle with septum was weighed.
Furthermore medial thickening of intra-acine pulmonary arteries (IAPA)
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were analysed by LABS image system and muscular arteries in numbers were
counted under light microscope. Results Compared with
pre-shunt, MPAP and PVR elevated obviously, Correlated with controls,right ventricle demonstrated hypertrophy, medial thickening of IAPA enlarged,and muscular arteries in numbers increased. Conclusions The
animal model of pulmonary hypertension developed in our study totally
, 百拇医药
imitates the status of pulmonary hypertension pathophysiology without
stenosed opposite main pulmonary artery and/or ligating some branchs of
isolateral pulmonary artery. Besides, this model succeeded in its relatively
simple, reliable and stable, can be provided for experimental study of
pulmonary hypertension.
, http://www.100md.com 【Key words】Pulmonary hypertension Left-to-right shunt Animal
model, canine 探讨动力型肺动脉高压(PH)的发病机理、预防及治疗为基础和临床所关注。我们通过改进方法，试图建立符合疾病病理生理的全肺PH动物模型，结果报道如下。
材料与方法
一、左向右分流血管吻合
选择健康杂种犬6条(由湖北医科大学实验动物中心提供)，10～20kg，雌雄不限。动物在全麻插管下经左侧第4肋间开胸。血管吻合方法：2条犬利用左肺动脉上叶分支近端与降主动脉行端侧吻合，4条犬利用左锁骨下动脉与左肺动脉行端侧吻合，吻合口4～6mm，吻合完毕肺动脉侧向近心、远心端均有明显震颤。吻合前测定肺动脉、体动脉平均压(MPAP、MSAP)作正常对照(GY-682D多道生理记录仪，河南)。术后常规笼中饲养4～6个月。
, http://www.100md.com
二、观察及检测指标
1. 一般观察 包括动物精神状况、活动、吠叫及心脏体征。
2. 肺动脉压与体动脉压测定 犬腹腔注射3%戊巴比妥钠50mg/kg体重,保持呼吸道通畅，面罩给氧。置股动脉测压管，股静脉穿刺三腔漂浮导管，接多道生理记录仪(BSM830-J/K,日本nihon
kohden)，根据波形变化确定进入右房后充气1ml，缓慢送入肺动脉，记录肺动脉平均压，并测定肺毛细血管楔嵌压(PCWP)，阻抗法测定心输出量(CO)，计算肺血管阻力(PVR)。
3. 心脏称重 按文献［3］方法，分别称量右室游离壁(RV)和左室加室间隔(LV+S)重量，计算RV/(LV+S)百分比反映右室肥厚情况。选择急性实验处死的犬4条，取心脏及肺组织作正常对照。
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4. 肺血管的病理改变 随机分别取正常及分流术后4～6个月左或右肺下叶边缘组织，中性福尔马林固定72小时，石蜡切片，HE、胶原纤维(VG)及弹力纤维(Weigert)染色，光镜观察。①肺动脉中膜厚度百分比(MT%)：随机选取正常犬2条及分流4～6个月后犬4条肺组织病理切片，每片测定40支血管。将切片置于REICHERT-JUNG万能显微镜25×视野下选择肺小动脉，通过IBAS图像分析仪测定血管内、外径，血管壁厚度及血管壁厚度与外半径的比值(MT%)，反映肺小血管增厚程度。②肺小血管肌性动脉百分比(MA%)：Weigert染色，光镜下(400×)数Φ≤50μm的双层弹力血管占Φ≤50μm总血管的百分比(MA%)，反映肺小血管肌化程度。
三、统计学方法
本组资料采用配对或成组设计的t检验。 结 果
1.血流动力学检测结果 分流4～6个月后MPAP、PVR、MSAP与正常比较，肺动脉压力升高，肺血管阻力增加，差异有显著意义(P＜0.01)，体动脉压无明显变化(表1)。
, 百拇医药
表1 分流术后4～6个月血流动力学变化(
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tppabs="http://www.chinainfo.gov.cn/periodical/zhsywk/zhsywkzz99/zhsywkzz9902/Image12.gif">±S
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注：与正常对照P＜0.01 ΔP＞0.05
size=3> 2.病理学观察结果 光镜下，正常肺组织肺小血管多为直径100μm以下的非肌性动脉，内膜完整，内皮细胞扁平，排列有序，管壁薄。分流4～6个月可观察到，非肌性动脉内皮细胞有不同程度的变性、肿胀、增生，中膜出现平滑肌组织，厚度增加。增厚的中膜VG染色为均一的红染，说明为平滑肌组织。Weigert
染色见内外弹力板间中膜厚度明显增加，内外弹力板增生明显，并有断裂，排列紊乱，与平滑肌相互交错。①RV/(LV+S)：分流4～6个月较正常对照右心室增厚(P＜0.02)。②MT%：分流4～6个月肺小血管中膜厚度(31.10±7.40)%较正常［(13.83±2.72)%］明显增加(P＜0.05)。③肺小血管肌性动脉百分比(MA%)：每高倍视野动脉数目减少，而肌化血管数目增加。
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讨 论
过去，动力型PH模型采用体、肺动脉分流及对侧肺动脉环缩，使一侧肺或部分肺叶形成PH［1，4］。但由于所选吻合血管间有一定张力，操作难度大，加之仅形成一侧肺或部分肺叶PH，故限制了此种模型的应用。本实验初，一例直接采用此法，行降主动脉与左肺动脉侧侧吻合，因吻合口张力大而撕裂，动物术中死亡。随后对此方法进行改进，在降主动脉与左肺动脉间搭桥(人工PDA)，而对于左肺动脉分支走向不能搭桥者采用左锁骨下动脉与左肺动脉吻合(Blalock法)。术后常规饲养4～6个月，无动物死亡，MPAP均明显升高(最高达6.67kPa)，右心室肥厚，肺小血管内膜增生，中膜增厚。本实验未环缩对侧肺血管，形成了全肺PH，近似疾病的病理生理改变。且操作比较简便，模型可靠，重复性好，适合研究选用。
参考文献
1 Geer JC,Glass BA,Albert HM.The morphogensis and reversibility of experimental
, 百拇医药
hyperkinetic pulmonary vascular leisions in the dog. Exper Mole Path,1965,3:152-158.
2 王治平，孙培吾，童萃文，等.实验性肺动脉高压与血浆内皮素和肺小动脉改变.中国循环杂志，1995，10：8，488-500.
3 Fulton RM, Hutchinson EC, Jones AM. Ventricular weight in cardiac hypertrophy.Br
Heart J,1952,14:413-420.
4 Hallman GL, Cooley DA. Surgical treatment of ventricular septal defect
associated with pulmonary hypertension. J Thorac and Cardiovas Surg,1964,48:4,588-600.
(动物模型 1999年 第2期 第16卷 左顺庆 高尚志 毛志福), 百拇医药
【摘要】 目的 改进左向右分流血管吻合方法，建立动力型肺动脉高压模型。方法 选择本地杂种犬6条，2条利用左肺动脉上叶分支搭桥与降主动脉行端侧吻合(人工PDA)，4条犬利用左锁骨下动脉与左肺动脉行端侧吻合(Blalock法)，吻合口4～6mm,术后笼中饲养4～6个月。通过三腔漂浮导管测定平均肺动脉压(MPAP)、肺毛细血管楔嵌压(PCWP)，计算肺血管阻力(PVR)，取心脏测定右心室(RV)与左室加室间隔(RV+S)重量，肺组织病理切片观察内膜、中膜变化，测定中膜厚度百分比(MT%)和肺小血管肌性动脉百分比(MA%)。结果 MPAP和PVR明显升高，右心室肥厚，肺小血管内膜增生，中膜增厚。结论 本实验未环缩对侧肺动脉，形成了全肺PH，符合疾病的病理生理改变，而且操作比较简便，模型可靠，重复性好，适合研究选用。
, 百拇医药
An animal model of pulmonary hypertension secondary to left-to-right
shunt ZUO Shunqing, GAO Shangzhi, MAO Zhifu. Department of
Cardiothoracic Surgery, the First Affiliated Hospital of Hubei Medical
University, Wuhan, 430060.
【Abstract】 Objective To build a novel animal model of hyperkinetic
, 百拇医药
pulmonary hypertension by improving on the vascular anastomosis of left-to-right
shunt. Methods End-to-side anastomoses of the upper branch
of left pulmonary artery and descending aorta were performed in 2 canines,and between left subclavian artery and left pulmonary artery were done
in 4 canines. Mean pulmonary artery pressure (MPAP) and pulmonary capillary
, 百拇医药
wedge pressure (PCWP) were measured by Swan Ganz, Cardiac output (CO)
was valued with resistance method after 4-6 months follwing shunt, and
pulmonary vascular resistance (PVR) was caculated. Aftersacrificed, the
weight of right ventricle and left ventricle with septum was weighed.
Furthermore medial thickening of intra-acine pulmonary arteries (IAPA)
, http://www.100md.com
were analysed by LABS image system and muscular arteries in numbers were
counted under light microscope. Results Compared with
pre-shunt, MPAP and PVR elevated obviously, Correlated with controls,right ventricle demonstrated hypertrophy, medial thickening of IAPA enlarged,and muscular arteries in numbers increased. Conclusions The
animal model of pulmonary hypertension developed in our study totally
, 百拇医药
imitates the status of pulmonary hypertension pathophysiology without
stenosed opposite main pulmonary artery and/or ligating some branchs of
isolateral pulmonary artery. Besides, this model succeeded in its relatively
simple, reliable and stable, can be provided for experimental study of
pulmonary hypertension.
, http://www.100md.com 【Key words】Pulmonary hypertension Left-to-right shunt Animal
model, canine 探讨动力型肺动脉高压(PH)的发病机理、预防及治疗为基础和临床所关注。我们通过改进方法，试图建立符合疾病病理生理的全肺PH动物模型，结果报道如下。
材料与方法
一、左向右分流血管吻合
选择健康杂种犬6条(由湖北医科大学实验动物中心提供)，10～20kg，雌雄不限。动物在全麻插管下经左侧第4肋间开胸。血管吻合方法：2条犬利用左肺动脉上叶分支近端与降主动脉行端侧吻合，4条犬利用左锁骨下动脉与左肺动脉行端侧吻合，吻合口4～6mm，吻合完毕肺动脉侧向近心、远心端均有明显震颤。吻合前测定肺动脉、体动脉平均压(MPAP、MSAP)作正常对照(GY-682D多道生理记录仪，河南)。术后常规笼中饲养4～6个月。
, http://www.100md.com
二、观察及检测指标
1. 一般观察 包括动物精神状况、活动、吠叫及心脏体征。
2. 肺动脉压与体动脉压测定 犬腹腔注射3%戊巴比妥钠50mg/kg体重,保持呼吸道通畅，面罩给氧。置股动脉测压管，股静脉穿刺三腔漂浮导管，接多道生理记录仪(BSM830-J/K,日本nihon
kohden)，根据波形变化确定进入右房后充气1ml，缓慢送入肺动脉，记录肺动脉平均压，并测定肺毛细血管楔嵌压(PCWP)，阻抗法测定心输出量(CO)，计算肺血管阻力(PVR)。
3. 心脏称重 按文献［3］方法，分别称量右室游离壁(RV)和左室加室间隔(LV+S)重量，计算RV/(LV+S)百分比反映右室肥厚情况。选择急性实验处死的犬4条，取心脏及肺组织作正常对照。
, http://www.100md.com
4. 肺血管的病理改变 随机分别取正常及分流术后4～6个月左或右肺下叶边缘组织，中性福尔马林固定72小时，石蜡切片，HE、胶原纤维(VG)及弹力纤维(Weigert)染色，光镜观察。①肺动脉中膜厚度百分比(MT%)：随机选取正常犬2条及分流4～6个月后犬4条肺组织病理切片，每片测定40支血管。将切片置于REICHERT-JUNG万能显微镜25×视野下选择肺小动脉，通过IBAS图像分析仪测定血管内、外径，血管壁厚度及血管壁厚度与外半径的比值(MT%)，反映肺小血管增厚程度。②肺小血管肌性动脉百分比(MA%)：Weigert染色，光镜下(400×)数Φ≤50μm的双层弹力血管占Φ≤50μm总血管的百分比(MA%)，反映肺小血管肌化程度。
三、统计学方法
本组资料采用配对或成组设计的t检验。 结 果
1.血流动力学检测结果 分流4～6个月后MPAP、PVR、MSAP与正常比较，肺动脉压力升高，肺血管阻力增加，差异有显著意义(P＜0.01)，体动脉压无明显变化(表1)。
, 百拇医药
表1 分流术后4～6个月血流动力学变化(
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| 组别 | 犬数 | MPAP(kPa) | PVR(wood) | MSAP(kPa) |
| 正常 | 6 | 1.99±0.16 | 0.15±0.01 | 14.11±0.45 |
| 分流4～6月 | 6 | 4.2±1.37 | 0.37±0.15** |
注：与正常对照P＜0.01 ΔP＞0.05
size=3> 2.病理学观察结果 光镜下，正常肺组织肺小血管多为直径100μm以下的非肌性动脉，内膜完整，内皮细胞扁平，排列有序，管壁薄。分流4～6个月可观察到，非肌性动脉内皮细胞有不同程度的变性、肿胀、增生，中膜出现平滑肌组织，厚度增加。增厚的中膜VG染色为均一的红染，说明为平滑肌组织。Weigert
染色见内外弹力板间中膜厚度明显增加，内外弹力板增生明显，并有断裂，排列紊乱，与平滑肌相互交错。①RV/(LV+S)：分流4～6个月较正常对照右心室增厚(P＜0.02)。②MT%：分流4～6个月肺小血管中膜厚度(31.10±7.40)%较正常［(13.83±2.72)%］明显增加(P＜0.05)。③肺小血管肌性动脉百分比(MA%)：每高倍视野动脉数目减少，而肌化血管数目增加。
, http://www.100md.com
讨 论
过去，动力型PH模型采用体、肺动脉分流及对侧肺动脉环缩，使一侧肺或部分肺叶形成PH［1，4］。但由于所选吻合血管间有一定张力，操作难度大，加之仅形成一侧肺或部分肺叶PH，故限制了此种模型的应用。本实验初，一例直接采用此法，行降主动脉与左肺动脉侧侧吻合，因吻合口张力大而撕裂，动物术中死亡。随后对此方法进行改进，在降主动脉与左肺动脉间搭桥(人工PDA)，而对于左肺动脉分支走向不能搭桥者采用左锁骨下动脉与左肺动脉吻合(Blalock法)。术后常规饲养4～6个月，无动物死亡，MPAP均明显升高(最高达6.67kPa)，右心室肥厚，肺小血管内膜增生，中膜增厚。本实验未环缩对侧肺血管，形成了全肺PH，近似疾病的病理生理改变。且操作比较简便，模型可靠，重复性好，适合研究选用。
参考文献
1 Geer JC,Glass BA,Albert HM.The morphogensis and reversibility of experimental
, 百拇医药
hyperkinetic pulmonary vascular leisions in the dog. Exper Mole Path,1965,3:152-158.
2 王治平，孙培吾，童萃文，等.实验性肺动脉高压与血浆内皮素和肺小动脉改变.中国循环杂志，1995，10：8，488-500.
3 Fulton RM, Hutchinson EC, Jones AM. Ventricular weight in cardiac hypertrophy.Br
Heart J,1952,14:413-420.
4 Hallman GL, Cooley DA. Surgical treatment of ventricular septal defect
associated with pulmonary hypertension. J Thorac and Cardiovas Surg,1964,48:4,588-600.
(动物模型 1999年 第2期 第16卷 左顺庆 高尚志 毛志福), 百拇医药