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编号:6733
组织标记新方法
http://www.100md.com 2001年3月1日 中国生物信息
     对组织进行选择性标记对研究神经系统的结构和功能是非常重要的。尽管这几年对于GFP(green fluorescent protein)等可对转基因动物细胞进行标记的研究进展非常迅速,但对于这些方法,都有一些局限。例如用编码GFP基因的质粒转化细胞时,GFP基因的表达在转染后大约6个小时后才会出现。而这个延迟过程对某些研究过程中就成为了障碍。还有基因枪技术,将DNA包裹在小珠上打入组织,这种转化虽然密度可以很高,但却以组织的损伤为代价。 Neuron 8月号上Gan and colleagues开创了一种新的方法,他们用基因枪把亲脂性的染料(DiOlistic)打入细胞进行标记。这个方法除了基因枪转化本身的高密度优点之外,由于在基因枪和组织之间放置了一张膜,减少了对组织的损伤及粒子的聚集。

    在对活体组织转化实验中显示,树突和胶质细胞在粒子打入后5分钟就完成了完全标记,而且这种方法的优点还有对不同神经元用不同的亲脂性染料标记,还能够观察神经元之间的相互作用。

    尽管这个方法在某些条件下的使用还有限制,但用DiOlistic进行多颜色标记的技术,对研究神经生理学还是十分有价值的。

    相关文章:

    ORIGINAL RESEARCH PAPER

    Gan , W.-B. et al. Multicolor"DiOlistic" labeling of the nervous system using lipophilic

    dye combinations. Neuron 27, 219—225 ( 2000). PubMed REVIEWS

    Tsien, R. Y. The green fluorescent protein. Annu. Rev. Biochem. 67, 509—544 ( 1998). PubMed

    FURTHER READING

    Chalfie, M. et al. Green fluorescent protein as a marker for gene expression. Science 263,802— 805 (1994). PubMed, 百拇医药