Flair技术
Klaus Hahn et al.在Science上报道了一种新的技术,FLAIR,来达到这个目的。他们将PAK1的能结合并激活Rac-GTP的domain
PDB与荧光染料Alexa标记,微注射入表达GFP与Rac融合蛋白的细胞中。
这样,当Rac与PDB相互作用时,GFP和Alexa就会足够接近以致发生FRET(fluorescence resonance energy transfer),这个荧光基因的设计要使FRET出生。
用这种方法,作者就能实时的检测,在一个活的细胞中Rac的定位改变与Rac激活之间的关系,结果发现两者显著的没有相关性。
这种被叫做FLAIR,是'fluorescence activation indicator for Rho proteins'的缩写,而且正如名字所表示的这样如果将适宜的结合蛋白结合域代替PDB,这种新技术也能用来研究Rho家族其他的GTPase。
了解肌动蛋白多聚化的时间和区域,将有利于我们更深入的研究如细胞移动,形态变化,吞噬行为等与肌动蛋白相关的过程。
相关文章:
ORIGINAL RESEARCH PAPER
Kraynov, V. S. et al. Localized Rac activation dynamics visualized in
living cells. Science 290, 333–337 (2000), http://www.100md.com
PDB与荧光染料Alexa标记,微注射入表达GFP与Rac融合蛋白的细胞中。
这样,当Rac与PDB相互作用时,GFP和Alexa就会足够接近以致发生FRET(fluorescence resonance energy transfer),这个荧光基因的设计要使FRET出生。
用这种方法,作者就能实时的检测,在一个活的细胞中Rac的定位改变与Rac激活之间的关系,结果发现两者显著的没有相关性。
这种被叫做FLAIR,是'fluorescence activation indicator for Rho proteins'的缩写,而且正如名字所表示的这样如果将适宜的结合蛋白结合域代替PDB,这种新技术也能用来研究Rho家族其他的GTPase。
了解肌动蛋白多聚化的时间和区域,将有利于我们更深入的研究如细胞移动,形态变化,吞噬行为等与肌动蛋白相关的过程。
相关文章:
ORIGINAL RESEARCH PAPER
Kraynov, V. S. et al. Localized Rac activation dynamics visualized in
living cells. Science 290, 333–337 (2000), http://www.100md.com