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组织培养在中草药GAP生产中的应用
http://www.100md.com 2002年3月16日 《中国中医药报》 第1719期
     中草药的组织培养,就是把分离出来的一种中草药材组织(如根、茎、叶的段、片、块等)放入含有一种合成培养基的瓶中,于无菌操作条件下使之生长或发育,它利用植物体细胞的再生能力,可培育出保持原品种的固有性状和特性的植株,是现代最先进的中草药繁殖技术。在中草药GAP种植中,常用组织培养的方法进行植株育种和生产无公害中草药。

    一、组织培养育种

    (一)组织培养育种的优点

    某些常用中草药的种子,由于收种困难或种子发芽率低,也有的由于栽种时栽种量大,繁殖系数小等原因,造成种子供不应求。利用组织培养育种不仅可有效解决这一问题。而且还具有一些其他的优点:

    1.组织培养可使育种周期大为缩短。有的野生药用植物变家种,应用组织培养繁殖时其驯化过程也可大为缩短。
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    2.用组织培养方法可以获得无病毒植株。

    3.这种近于工厂化生产的方式大大地节省了土地,一间30m2的培养室,就可繁殖十几万株苗。

    4.组织培养不受季节和环境条件的影响和限制,从而为实现大规模工厂化育苗奠定了良好的基础。同时,对长期进行无性繁殖并开始退化的花类中草药品种,通过组织培养,可以进行复壮,使个体发育向年轻阶段转化。

    5.组织培养能解决无性繁殖困难的中草药品种的苗木繁育问题。

    (二)如何进行组织培养育种

    1.组织培养材料的选择。中草药组织培养的材料十分广泛,根据植物细胞全能性理论,植物体的任何部分,都可作为组织培养的外植体,但以快速繁殖为主要目标的组织培养来说,则以茎尖、叶、茎、根等营养器官为宜,对某些具有明显季节性出现休眠的栽培品系,其休眠的气候条件,在组织培养之前必须予以满足。例如某些鳞茎类品种,用来作接种材料的鳞茎在接种前要经过适当的冷处理。另外,要从感染的原种重新获得无病毒植株,切取的茎尖要尽可能小一些。
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    2.获得芽体。将组织培养材料接种于培养基后,经过一段时间的培养,一般可从接种体上分化出芽体。也有的是接种体在培养基上培养后先脱分化,形成愈伤组织,再将愈伤组织切割或粉碎后接种到分化培养基上,培养后出芽。但是,一般直接从接种体上分化出的芽体成活率高。

    要使接种材料多出芽,关键在于选择培养基中的激素种类和浓度,如果培养基中同时有一定比例的生长素和细胞分裂素,而且细胞分裂素的相对量大于生长素时,有利于芽的分化和生长。

    3.长成植株。从培养外植体得到的芽体通常是没有根的,要把芽体剪下后转移到生根培养基使其发根,如此才是一棵完整的植株。或者将剪下的芽体浸泡在含有一定浓度的生长素无菌溶液中,几个小时后再接种到无激素的培养基上,一般一周左右可分化出根原茎,2~3周后即可移栽。组织培养的苗在移栽前,要先接受阳光照射1~2天,使植株能自养发育和能适应温度、光照强度的变化,并且有一定抗微生物感染的能力。移栽后要浇透水,薄膜覆盖,勿使阳光直射。
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    目前通过组织培养成功地繁殖长成中草药植株的品种有西洋参、半夏、枸杞、百合、桔梗、当归等。

    二、组织培养生产无公害中草药

    (一)贵重中药材的组织培养

    众所周知,冬虫草、人参等贵重中草药生长条件要求严格、生长缓慢、产量小,人工野外栽培受到极大的限制,故产品长期供不应求,价格居高不下。近年来,我国用组织培养等生物工程技术工厂化驯培冬虫草获得全面成功,而且驯培品种的主要功效成分——虫草素、虫草酸、虫草多糖等,特别是虫草素这一重要生物活性物质的含量明显高于野生冬虫草。究其原因,一是野生冬虫草以自然的方式生成,对菌种和培养基都无从筛选,而驯培冬虫草是经过多次纯化后获得的优质冬虫草菌种。其次在生长环境上,野生冬虫草受自然条件的限制,环境条件和营养条件都不能选取,驯培则可以创造出最适于冬虫草生长的培养基,选择并调节适宜的温度、湿度、光照和通风,营造优于野生环境的营养条件和环境条件,使得冬虫草的生长过程不受自然界不利因素的影响,有效成分不受任何损失。以组织培养技术驯化冬虫草的成功,标志着组织培养生产无公害中草药具有广阔的前景。

    (二)利用毛状根培养生产无公害中草药

    最近10年来,用毛状根培养生产无公害中草药的研究已取得了初步成果。毛状根是由发根农杆菌感染双子叶植物形成的毛状根,它具有生长迅速、遗传性稳定和生化性质不易改变的特点,这一培养系统对中草药来说非常重要,因为1/3的中草药材是植物的根部。目前已建立了人参、丹参、黄芪、甘草、青蒿等多种中草药的毛状根培养系统,并开展了许多大规模的培养实验,期望能通过大规模组织培养开辟中草药生产的新途径。目前,有关的实验研究还在不断的探索中。, 百拇医药(辛夷)


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