野外调查方法
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《中药资源学》
1.线路调查:即在调查范围内按不同方向选择几条具有代表性的线路,沿着线路调查,记载药用植物种类、采集标本、观察生境、目测多度等。这种方法虽然比较粗糙,但可以窥其全貌,适宜于大面积的,特别是药用植(动)物产量较少,分布又不均匀的地区。
2.样地调查: 在调查范围选择不同地段,按不同的植物群落设置样地,在样地内作细致的调查研究。样地的设置是按不同的环境(包播各种地形、海拔、坡度、坡向等)拉上工作线,在工作线上每隔一定距离设置样地(样地的大小根据调查的目的、对象而定,一般草本植物为1~4m2,灌木为4~50m2,乔木为100~10000m2,样地可以是方形、圆形,也可以是长方形)。在样地内对药用植物的,株数、多度、盖度(郁闭度)及每株湿重、风干后重量等分别作测量统计。
3.蕴藏量的调查: 药用植物蕴藏量的调查目前还没有比较精确和切实易行的方法,一般采用的有估量法和实测法。
(1)估量法: 就是邀请有经验的药农、收购员等座谈讨论,并参照历年资料和调查所得的印象作估计。这种方法虽然不精确,但是值得参考。
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(2)实测法: 就是在同一个地区,分别调查各种植物群落的种类组成,并设置若干样地,在样地内调查统计药用植物的株数、药用部分湿重,重复调查若干样地,求出样地面积的平均株数及重量,再换算成每公顷单位面积产量,作为计算该植物群落蕴藏量的基本数据。从植被图、林相图、草场调查等计算出该植物群落的占有面积,这样就可以求得该植物群落的蕴藏量。把各个植物群落的蕴藏量加起来,就得出该地区的各种药用植物蕴藏量。
如当地没有植被图或林相图,也可以按各种植物群落的分布位置,分布规律用推测的方法绘出植被图,或利用有关资料转绘成植被图,不过这样方法误差可能大些。
例如在黑龙江小兴安岭某地对柞树--兴安杜鹃群落中兴安杜鹃(Rhododendron dahuricum
L.)的蕴藏量作调查。共设置20个样地,每个样地10m2。经样地实测每10m2中平均有49丛兴安杜鹃,、每丛可采湿叶0.19公斤,则每10m2约可产湿叶49X0.19=9.31公斤。根据林相图,借用透明方格片计算出该地区柞树--兴安杜鹃群落的总面积为4.5公顷,则兴安杜鹃总蕴藏量(湿重)。
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4.野外化学成分检验:为了寻找新的药物资源,提供室内研究的线索,在野外调查中可以进行化学成分的初步检验,检验项目及内容是根据调查目的和任务决定。
野外化学成分的检验要求简便、快速。通常可将感官法、纸片法和试管法互相配合使用。
(1)感官法:
如检查挥发油的存在,可凭嗅觉,把采到的植物原料揉碎后,嗅其有无芳香气味。检查油脂类可将果实和种子放在滤纸上,用力压碎,稍干后看纸上有无透明的油迹,根据油迹的大小还可以估计含油的多少。检查鞣质类化合物,可用一把无锈的铁刀切开检验材料,如含鞣质,小刀及材料断面很快会变成兰黑色。又如味苦的多含生物碱、甙类;味涩的多含鞣质,味酸的含有机酸,色黄的多含黄酮类等。可以根据这些感官提供的线索,再用其他方法进一步确证。
(2)纸片法
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检样的制备:
①水浸液: 取样品原料10g,加入蒸馏水75~100
ML,在50~60℃保温1小时,过滤,滤液供检查氨基酸、蛋白质、有机酸、水溶性生物碱、皂甙、酚类、鞣质等。
②醇浸液:取样品原料10g,加入95%乙醇75~100ml在水浴上回流10分钟,过滤,滤液浓缩至1/2体积,供检查黄酮类、强心甙、生物碱、内酯等用。
方法:取检样滴在滤纸上,待展开,干后喷洒试液,检查以下成分。①生物碱:水浸液和醇浸液,喷碘化铋钾试液,若斑点颜色显著加深,为阳性反应。②酚性成分:醇浸液,喷三氯化铁试液,若斑点显兰绿(黑)色,为阳性反应。③有机酸:取水浸液,喷洒溴酚兰后,背景兰色,斑点浅黄色,为阳性反应。④黄酮类:醇浸液,喷三氯化铭醇试液,黄色及荧光均加深,为阳性反应。⑤蒽醌类:醇浸液,喷氢氧化钾试液,斑点显红色或暗红色,为阳性反应。⑥强心甙:醇浸液,加Kedde试液,斑点显紫色或浅紫色,为阳性反应。⑦内酯及香豆精类:醇浸液,加3%Na2CO3,烤15分钟,滴加安替匹林及铁氰化钾,显紫红色,为阳性反应。检查山道年(Santonin)可将原料直接加甲醇钠,显紫红色为阳性反应。⑧还原物质:水及醇浸液,分别喷高锰酸钾试液,背景紫红色,斑点色浅或退色,为阳性反应。
(3)试管法:①皂甙:水浸液置试管中,用力振摇,有持久性泡沫,为阳性反应。②蛋白质:水浸液,加入NaOH,CuSO4,显淡紫红色,为阳性反应。③甙类、糖类:样品加水用稀酸酸化,煮沸15分钟过滤,滤液浓缩后,滴在纸片上,喷邻苯二甲酸苯胺试液,烘烤,斑点显棕红色,为阳性反应。, http://www.100md.com
2.样地调查: 在调查范围选择不同地段,按不同的植物群落设置样地,在样地内作细致的调查研究。样地的设置是按不同的环境(包播各种地形、海拔、坡度、坡向等)拉上工作线,在工作线上每隔一定距离设置样地(样地的大小根据调查的目的、对象而定,一般草本植物为1~4m2,灌木为4~50m2,乔木为100~10000m2,样地可以是方形、圆形,也可以是长方形)。在样地内对药用植物的,株数、多度、盖度(郁闭度)及每株湿重、风干后重量等分别作测量统计。
3.蕴藏量的调查: 药用植物蕴藏量的调查目前还没有比较精确和切实易行的方法,一般采用的有估量法和实测法。
(1)估量法: 就是邀请有经验的药农、收购员等座谈讨论,并参照历年资料和调查所得的印象作估计。这种方法虽然不精确,但是值得参考。
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(2)实测法: 就是在同一个地区,分别调查各种植物群落的种类组成,并设置若干样地,在样地内调查统计药用植物的株数、药用部分湿重,重复调查若干样地,求出样地面积的平均株数及重量,再换算成每公顷单位面积产量,作为计算该植物群落蕴藏量的基本数据。从植被图、林相图、草场调查等计算出该植物群落的占有面积,这样就可以求得该植物群落的蕴藏量。把各个植物群落的蕴藏量加起来,就得出该地区的各种药用植物蕴藏量。
如当地没有植被图或林相图,也可以按各种植物群落的分布位置,分布规律用推测的方法绘出植被图,或利用有关资料转绘成植被图,不过这样方法误差可能大些。
例如在黑龙江小兴安岭某地对柞树--兴安杜鹃群落中兴安杜鹃(Rhododendron dahuricum
L.)的蕴藏量作调查。共设置20个样地,每个样地10m2。经样地实测每10m2中平均有49丛兴安杜鹃,、每丛可采湿叶0.19公斤,则每10m2约可产湿叶49X0.19=9.31公斤。根据林相图,借用透明方格片计算出该地区柞树--兴安杜鹃群落的总面积为4.5公顷,则兴安杜鹃总蕴藏量(湿重)。
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4.野外化学成分检验:为了寻找新的药物资源,提供室内研究的线索,在野外调查中可以进行化学成分的初步检验,检验项目及内容是根据调查目的和任务决定。
野外化学成分的检验要求简便、快速。通常可将感官法、纸片法和试管法互相配合使用。
(1)感官法:
如检查挥发油的存在,可凭嗅觉,把采到的植物原料揉碎后,嗅其有无芳香气味。检查油脂类可将果实和种子放在滤纸上,用力压碎,稍干后看纸上有无透明的油迹,根据油迹的大小还可以估计含油的多少。检查鞣质类化合物,可用一把无锈的铁刀切开检验材料,如含鞣质,小刀及材料断面很快会变成兰黑色。又如味苦的多含生物碱、甙类;味涩的多含鞣质,味酸的含有机酸,色黄的多含黄酮类等。可以根据这些感官提供的线索,再用其他方法进一步确证。
(2)纸片法
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检样的制备:
①水浸液: 取样品原料10g,加入蒸馏水75~100
ML,在50~60℃保温1小时,过滤,滤液供检查氨基酸、蛋白质、有机酸、水溶性生物碱、皂甙、酚类、鞣质等。
②醇浸液:取样品原料10g,加入95%乙醇75~100ml在水浴上回流10分钟,过滤,滤液浓缩至1/2体积,供检查黄酮类、强心甙、生物碱、内酯等用。
方法:取检样滴在滤纸上,待展开,干后喷洒试液,检查以下成分。①生物碱:水浸液和醇浸液,喷碘化铋钾试液,若斑点颜色显著加深,为阳性反应。②酚性成分:醇浸液,喷三氯化铁试液,若斑点显兰绿(黑)色,为阳性反应。③有机酸:取水浸液,喷洒溴酚兰后,背景兰色,斑点浅黄色,为阳性反应。④黄酮类:醇浸液,喷三氯化铭醇试液,黄色及荧光均加深,为阳性反应。⑤蒽醌类:醇浸液,喷氢氧化钾试液,斑点显红色或暗红色,为阳性反应。⑥强心甙:醇浸液,加Kedde试液,斑点显紫色或浅紫色,为阳性反应。⑦内酯及香豆精类:醇浸液,加3%Na2CO3,烤15分钟,滴加安替匹林及铁氰化钾,显紫红色,为阳性反应。检查山道年(Santonin)可将原料直接加甲醇钠,显紫红色为阳性反应。⑧还原物质:水及醇浸液,分别喷高锰酸钾试液,背景紫红色,斑点色浅或退色,为阳性反应。
(3)试管法:①皂甙:水浸液置试管中,用力振摇,有持久性泡沫,为阳性反应。②蛋白质:水浸液,加入NaOH,CuSO4,显淡紫红色,为阳性反应。③甙类、糖类:样品加水用稀酸酸化,煮沸15分钟过滤,滤液浓缩后,滴在纸片上,喷邻苯二甲酸苯胺试液,烘烤,斑点显棕红色,为阳性反应。, http://www.100md.com