流腮特异性免疫球蛋白M1Gm如何检测?
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解放军三0二医院冱研究室主要采用抗体抗体捕捉酶联免疫吸附测定法检测流腮特异性免疫球蛋白流腮免疫球蛋白M M(1gM)。该法既可检测血清抗流腮免役球蛋白M，又可检测患者脑脊液中抗流腮免疫M，是近年能特异性确诊腮腺炎、脑膜脑炎、睾丸炎的快速诊断方法，具体方法如下。
以pH9.6碳酸盐缓冲液稀释的羊抗人υ链血清(8微克/毫升)包被聚苯乙烯塑料板，每孔l00微升，置湿盒4℃过夜：用PBS—T(含0.05%Tween 20的0.01M、pH7.4磷酸盐缓冲液洗3次，加入含10%小牛血清PBS—T倍比稀释的血清脑脊液标本，每孔l00微升，37℃水箱2小时。洗3次，每孔加入1：10稀释的流腮病毒抗原(鸡胚尿囊液)100微升，4℃过夜。洗3次，加1：200稀释的HRP—鸡抗流腮免疫球蛋G，每孔l00微升，置37℃水箱2小时。洗3次，加入底物(邻苯二胺4毫克溶于pH 5.0磷酸盐—柠檬酸缓冲液10毫升，临用前加30%双氧水20微升)每孔100微升，置37℃水箱20分钟。每孔加4NH2SO4 50微升终止反应。采用四川分析仪器生产的GXM—20型酶标光度计测OD492nm。1：200稀释血清和脑脊液原液的P/N值≥2.1，同时OD值≥0.1时判为性。最终滴度为P/N≥2.1且OD值≥0.1时的血清或脑脊液最高稀释倍数。
只要买到流腮特异性免疫球蛋白M的测试药盒，按上述方法，基层县医院和一般实验室都可进行检测。
流行性腮腺炎, http://www.100md.com
以pH9.6碳酸盐缓冲液稀释的羊抗人υ链血清(8微克/毫升)包被聚苯乙烯塑料板，每孔l00微升，置湿盒4℃过夜：用PBS—T(含0.05%Tween 20的0.01M、pH7.4磷酸盐缓冲液洗3次，加入含10%小牛血清PBS—T倍比稀释的血清脑脊液标本，每孔l00微升，37℃水箱2小时。洗3次，每孔加入1：10稀释的流腮病毒抗原(鸡胚尿囊液)100微升，4℃过夜。洗3次，加1：200稀释的HRP—鸡抗流腮免疫球蛋G，每孔l00微升，置37℃水箱2小时。洗3次，加入底物(邻苯二胺4毫克溶于pH 5.0磷酸盐—柠檬酸缓冲液10毫升，临用前加30%双氧水20微升)每孔100微升，置37℃水箱20分钟。每孔加4NH2SO4 50微升终止反应。采用四川分析仪器生产的GXM—20型酶标光度计测OD492nm。1：200稀释血清和脑脊液原液的P/N值≥2.1，同时OD值≥0.1时判为性。最终滴度为P/N≥2.1且OD值≥0.1时的血清或脑脊液最高稀释倍数。
只要买到流腮特异性免疫球蛋白M的测试药盒，按上述方法，基层县医院和一般实验室都可进行检测。
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