猫是幽门螺杆菌的动物宿主
我们应用常规微生物、病理技术及分子生物学方法在猫胃粘膜检出了幽门螺杆菌(Hp)。18只家养猫均自市场购得,运回实验室的当天宰杀,以排除实验室污染的可能性。杀死动物后立即剖腹,取新鲜胃粘膜组织作快速尿素酶试验(UAT)、涂片染色、常规石蜡包埋组织切片Warthin-Starry银染、细菌培养、寡核苷酸探针尼龙膜杂交及聚合酶链反应(PCR)检测。
18只猫中有15只UAT阳性,用Skirrow选择性培养基在37°C、5%的微氧环境下培养出3株Hp样细菌,培养基中加猫血或羊血比用人血生长好。有11只猫的胃粘膜及1株培养出的细菌的DNA被提取出来作杂交和扩增。寡核苷酸探针长27bp,系螺杆菌属细菌特异探针,经3’-OH端加尾标记半抗原地戈辛素后作膜杂交,11只猫胃粘膜有8只为阳性,猫胃培养菌也为阳性。PCR引物系幽站螺杆菌特异的16srRNA基因片段,扩增片段长500bp,该引物不扩增包括猫胃螺杆菌(H.felis) 和空肠弯曲菌在内的近缘菌株DNA,在11只猫的胃组织中发现7只阳性者,一株培养菌也为阳性。病理切片银染则发现猫胃粘膜至少存在三种弯曲样菌(既往称之为幽门螺杆菌相关菌),一种为Hp样菌,形态与Hp相近,一种为Gh(人胃螺旋菌)样菌,菌体比Hp粗大且长,螺旋数多,与Gh及H.felis相近,另一种呈弯曲样菌,菌体较Hp长,形态与Hp相似,但螺旋不明显。双盲法观察,发现有大量Hp样菌的标本,其对应的DNA标本PCR均为阳性,而有Hp样或Gh样细菌定殖的标本,UAT及探针杂交均为阳性。
据此,我们认为,猫胃粘膜有Hp定殖,猫应该是Hp的动物宿主和传染源之一。由于猫是最常邮的宠物之一,因此明确其为Hp的动物宿主对该菌的防治有重要的理论和实用价值,且为Hp的动物传播理论提供了直接证据。
王继德 周殿元 张万岱 徐智民 杨海涛
第一军医大学南方医院消化科(广州 510515)
2000/06/07 刘晓琴 校对
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