抑制幽门螺杆菌中药的筛选
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)于1983年由Warren和Marshal首次从胃粘膜活检标本中分离并命名。越来越多的证据支持Hp是胃炎的致病菌，Hp感染与消化性溃疡的发病也密切相关。中医药治疗慢性胃炎及消化性溃疡取得了良好效果，为进一步提高疗效，探讨其机理，我们从不同性味，不同作用的200种中药中作初步筛选，发现其中38种中药对Hp有抑菌作用。现将结果报道如下。
1 材料和方法
1.1 Hp培养鉴定
患者因上消化道症状行胃镜检查226例，并诊断为慢性胃炎或消化性溃疡。其中男175例，女51例，年龄16岁～70岁，平均39.1岁，病程3月～2a。本组病例排除了肝、肾和血液系统疾病。胃镜检查前1周，患者未用抗生素，铋剂和影响胃酸分泌的药物。Olympus胃镜及活检钳均用2%戊二醛浸泡消毒15min，使用前用清水冲洗。选慢性胃炎和消化性溃疡患者，用19K活检钳在胃窦部距幽门5cm范围内取胃粘膜标本2块，以无菌手续接种在改良Skirrow培养基(含万古霉素10mg/L、多粘素B2500IU/L、TMP5mg/L)。培养基放在10%CO2、5%O2和85%N2条件下，37℃培养72h。226例均作了Hp培养。Hp菌落为半透明、灰色、湿润、稍隆起圆形。菌体革兰染色阴性，呈弯曲，“S”形或“海鸥”形。生化鉴定：尿素酶阳性，氧化酶阳性，在三糖铁培养基上不发酵。不产H2S，醋酸铅试纸法H2S(+)，对1%甘氨酸部分耐受，不还原硝酸盐，不水解马尿酸。
1.2 山药抑菌试验
中药煎液制备 将单味中药分别浸泡，于烧杯中60min，在100℃条件下煎煮30min，取1∶1(1g中药煎出1ml药液)煎液存放于无菌试管备用。
抑菌试验材料 改良Skirrow培养基，Hp悬液(108/ml)，无菌海绵块(圆形，厚2.5mm，直径6.5mm，吸液量30μl/块)，中药煎液，5%NaCl。方法：将Hp悬液均匀接种在改良Skirrow培养基上，用海绵块吸取中药液分别放置于上述培养基，5%NaCL未出现抑菌环，无抑制Hp作用。其抑菌环的大小，显示出不同中药对Hp的不同抑菌程度，结果见表1。
表1 中药对Hp抑菌结果
|
药名 |
抑菌环(mm) |
药名 |
抑菌环(mm) |
药名 |
抑菌环(mm) |
药名 |
抑菌环(mm) |
|
黄 芩 |
25 |
山 楂 |
22 |
槟 榔 |
16 |
旱莲草 |
12 |
|
黄 连 |
25 |
厚 朴 |
20 |
五味子 |
16 |
麦 冬 |
12 |
|
大 黄 |
24 |
枳 实 |
19 |
生黄芪 |
15 |
元 胡 |
12 |
|
黄 柏 |
24 |
白 芍 |
19 |
艾 叶 |
15 |
苍 术 |
11 |
|
桂 枝 |
23 |
香 附 |
17 |
没 药 |
15 |
女贞子 |
10 |
|
地 丁 |
23 |
青天葵 |
17 |
毕 菝 |
15 |
川楝子 |
10 |
|
玫瑰花 |
23 |
地 榆 |
17 |
草豆蔻 |
15 |
黄 精 |
9 |
|
土茯苓 |
23 |
连 翘 |
17 |
瓜 蒌 |
15 |
生侧柏 |
9 |
|
高良姜 |
22 |
茵 陈 |
16 |
远 志 |
14 |
5%Nacl |
0 |
|
乌 梅 |
22 |
苦 参 |
16 |
金樱子 |
14 |
|
|
4 讨论
Hp感染与慢性胃炎及消化性溃疡的关系越来越受到重视。本组226例中60.2%检出Hp，与文献报道接近。多年来国内用中医药辨证治疗胃炎和消化性溃疡取得了良好效果，为探讨Hp这一致病因素与中药治疗胃胃及消化性溃疡间的作用，我们做了常用中药对Hp的抑菌实验，中药均选自不同性味、不同作用的单味药。在200种药中筛选出38种有不同大小的抑菌环出现，说明有抑菌作用。5%NaCl作为高渗透压作用的对照表明，未见抑菌环出现，无抑菌作用，故可排除中药煎剂可能产生的高渗透压作用而出现假性抑制Hp生长作用。
经体外实验初步筛选的38种中药对Hp有抑菌作用，其中以黄芩、大黄、黄柏、桂枝、地丁、玫瑰花、土茯苓、高良姜、乌梅、山楂等抑菌作用最明显，最大抑菌环为25mm。张琳等曾用牛津杯法其实验结果见黄连抑菌作用明显，我们所作结果与之相符。但其所见黄连抑菌环达41mm,可能与实验条件、方法等不同有关。我们所见党参、枸杞子对Hp无明显抑菌作用，与之报道不符；我们所见土茯芩、玫瑰花、高良姜等抑蓖作用明显，但尚未见报道。
临床实践中，我们体会到选用对Hp有良好抑菌作用的中药综合辨证论治组方，对于患者临床症状的减轻和消除，病理组织学的改善均有良好的促进作用。梁方信等报道Hp阳性的胃病51例后，66.7%Hp仍为阳性，而94.1%患者可达到组织学康复或好转。我们在临床中亦发现有相同的一些病例，但对这部分Hp阳性，无临床症状，胃镜下所见及病理组织学查检已见有明显好转的患者继续治疗，则发现Hp仍可转为阴性。因此，我们考虑Hp感染只不过为胃炎、消化性溃疡的致病因素之一。中医药治疗疾病确有其独到之处，在注重局部病变的同时，更注重整体的调节。所以，对于慢性胃炎和消化性溃疡的治疗，Hp应受到重视，但更应切记辨证论治原则。
本结果为阳性胃炎和消化性溃疡的治疗提供了针对Hp感染的用药依据，而复方制剂与不同剂型的中药对Hp的清除作用，目前仍在进一步实验研究中。
王绪霖 缴稳玲 吕宗舜 杨恕 陈桂芳
天津医科大学附属医院(天津 300052)
2000/07/10 姬颖 校对
, 百拇医药