11.3 维生素A缺乏病的诊断
维生素A缺乏后，虽然会影响工作能力(如夜盲)，发生症状，甚至变盲或死亡。但只要诊断治疗得早，预后还是良好的。所以诊断在预防与治疗维生素A缺乏病中非常重要。
11.3.1 生化诊断
(1)血浆中维生素A含量测定 体内维生素A主要储存在肝中，肝内维生素A约占体内总量的90～95%。因此肝是一个储藏、调节，维持血内维生素A达到正常水平的重要器官。若服用大量的维生素A，由于其很快的运入肝中储藏，因此血浆中维生素A含量也不会大量升高。在肝内维生素A储藏量丰富，虽几个月不摄取维生素A，肝脏也能不断地源源输出补充维生素A，使血液中维生素A不致减少。但在长期维生素A缺乏，肝内维生素A含量减少时，血浆内维生素A含量也会减少。根据陈仁惇等对正常成人维生素A需要量的研究说明在其他诊断指标已表明有维生素A缺乏时，血浆中含量在50IU%左右(相当于15μg%)。在营养调查中，若无维生素A缺乏，则血浆中含量为100～120IU%。根据Sauberlich等1973年整理的评价成年人营养状况的数据，认为维生素A醇<10μg%，表明维生素A高度缺乏；10～19μg%表明含量较低；>20μg%，虽然还不足，但不致发生缺乏症状。
(2)维生素A耐量曲线的测定 既然维生素A有95%储藏于肝内，是否有无办法可间接测定肝内维生素A的含量。自从1934年Chesney与Mccord用维生素A的耐量曲线诊断小儿乳糜泻以后，陈仁惇等曾对家兔在维生素A缺乏与恢复的不同时期，作血浆中维生素A耐量曲线与肝中含量相对照的试验。结果证明，维生素A愈缺乏，高峰出现的愈晚，高峰的维生素A水平愈低。缺乏严重时，甚至无高峰出现。补充维生素A以后，则高峰出现较早与较高。在陈仁惇所作正常成年人维生素A需要量研究中，每日补充不同剂量的维生素 A其高峰也随剂量的高低而有不同水平。这些研究说明维生素A耐量曲线确能反映肝内维生素A的储藏情况。
也可用聚集强度进行比较，其公式为：
聚集强度=[耐量曲线中维生素A的最高值-空腹血中维生素A含量]/耐量曲线中最高值的时间
这公式表明耐量曲线中的最高值与最高值出现的时间对维生素A的营养状况有一定的关系。
此外，王喜生等曾应用视黄醇体库反应法(retinol body pool response,RBPR)间接测定维生素A的储藏情况。即先测定空腹血中维生素A含量，然后补充维生素A(剂量远较耐量曲线所用的量为低，仅为正常需要量的两倍，)在3.5小时后，再测定血中含量，用下列公式计算：
RBPR(%)=[补充维生素A后血中含量-补充前含量]/补充后血中含量×100
此百分比随肝内维生素A储藏量的增加而减少。因此服的剂量比做耐量曲线时低好几 倍。因此，不会产生维生素A过量中毒，但仅限于动物实验阶段，未应用于人体。
(3)血浆中胡萝卜素的测定 血浆中除含有维生素A生理功能的β-胡萝卜素以外，尚有无生理功能或生理功能不完全的黄色色素。所以，此项测定对维生素A的营养状况没有太大的诊断意义。
11.3.2 生理或功能评价诊断方法
(1)暗适应 暗适应是测定在暗淡光线下的视力功能。在维生素A亚临床状态如夜盲发生前或轻度夜盲，则暗适应的功能会降低。经典的暗适应测定方法是用Goldman-Weekers暗适应计，在双眼经强光漂白后，观察不同强度的闪光。闪光的持续时间为1秒，间隔1秒。然后用时间(分)为横坐标，光强度微一微朗伯micromicro lamberts的对数为纵坐标，绘成暗适应曲线如图11-1。
图11-1 标准暗适应曲线
标准暗适应曲线必须有代表锥状细胞、锥状柱状转换点、柱状细胞与最终能见阈四部分的曲线。此种仪器昂贵，操作复杂，检查一名病人需40分钟左右，所以不适应大规模营养调查与现场使用。但此仪器比较精确，用其它仪器不能测定，因此可用来作为测定暗适应的标准。
由于此仪器国内尚无制造。因此，国内多测定暗适应恢复时间。方法是双目经强光漂白后，于暗中观察极微弱的光源，观察到光源的时间即为暗适应恢复时间。如用Feldman暗适应计。陈学存等根据Pett的方法加以改进，利用距离光源越远，光线越微弱的原理，观察一排7～9个孔的测定光源来测定恢复时间。陈仁惇等再在此基础上改用自动记录装置，在大规模营养调查中也获得良好的效果。
Thorton等利用在强光转变成弱光后，眼底对光的灵敏度由红色转换到蓝色即Purkinjie转换的原理，设计了一种暗适应的快速测定方法。即在双眼经X光读片灯的强光漂白以后，在弱光照明黑色的工作台上挑选混在一起的不同波长的三种圆片。5个白色的、6个蓝色的(λ=475μm)、7个红色的(λ=605μm)，用秒表计算拣出时间。所得结果与Goldman的暗适应曲线比较，相关系数为r=0.72，显著相关。王育才等设计制造了YA-2型暗适应计，强光漂白时间自动控制，发现弱光由受检者自动记录时间，在营养调查中使用，效果也较好。
(2)生理盲点的测定 文献中有关中心视野检查，生理盲点与维生素A的关系报告极少。郑建中等在维生素A需要量研究中观察到生理盲点是反映维生素A缺乏的一个较灵敏的指标。在维生素A需要量供给不足，血浆中维生素A含量一直在50IU%一组，盲点扩大一倍。每日摄取2000IU维生素A，盲点虽有缩小，但未至正常。每日摄取3000IU以上则能恢复正常，且摄取愈多，恢复愈快。生理盲点扩大的一组，若给予大剂量维生素A以后，24小时即缩小至正常范围。因此，生理盲点是判断人体维生素A营养状况的一个较灵敏的指标。同时有几例视力不良者服大量维生素A以后，视力也能恢复正常。
(3)其他 当光线照射于视网膜上时，有电位差变化，将这些变化记录于图上，称为视网膜电流图。Dowling与Wold发现当大鼠缺乏维生素A时，视网膜电流的阈值改变而且b波变小。Dhanda用视网膜电流图观察了缺乏维生素A的病人。他们发生的视网膜电流变化要比暗适应的变化为晚。
根据抗美援朝部队5770名夜盲患者的调查报告，曾发现夜盲患者的瞳孔对光反应较正常人迟缓，收缩也不如正常者小。陈仁惇等在家兔造成维生素A缺乏及补充以后，也观察到瞳孔对光反应有类似现象。Reichel等也曾观察到瞳孔在维生素A缺乏的病人，于暗中测量时较大。
综上所述，维生素A缺乏病的诊断是综合性的。即首先采用生理或功能性评价方法，观察其夜视力(即暗适应能力)有无减退或生理盲点有无扩大，这在缺乏中最早发生。其次是进行维生素A耐量曲线，观察其肝中维生素A的储藏情况。待血中维生素A的水平下降，则表明体内储藏已经相当缺乏，至于发生临床症状如眼的毕多氏斑与角膜软化已到缺乏晚期，必须立即进行治疗。
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