新生物制品审批办法5-2
http://www.100md.com
医业网
3.1.3.3动物体和鸡胚试验
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
动物 要求 数量 接种 接种量* 观察
组别 途径 (ml/只) 天数 结 果
────────────────────────────────
乳鼠 24小时内 2窝≥ 脑内 0.01 21 应健存10只
腹腔 0.1
成鼠 12～24g 10 脑内 0.03 21 应健存
腹腔 0.5
豚鼠 350～500g 5 腹腔 5.0 42 应健存，解剖
无结核病变
家兔 1.5～2.5kg 5 皮内 0.1×10 21 无异常
皮下 9.0 健存
鸡胚 9～11日龄 10 尿囊腔 0.2 3～4 尿液血凝试验**
阴性
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
*每只动物腹腔至少接种107细胞；脑内至少接种106细胞；鸡胚103细胞
**用豚鼠和鸡血球
如80%以上动物和鸡胚健存，此试验为通过。
如果细胞系来源为啮齿类动物，应用10只敏感的成年小白鼠，每只脑内接种106活细 胞用以检测是否有淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒污染。
3.1.3.4特殊外源病毒检测
(1)小白鼠、大白鼠及地鼠抗体产生试验检测啮齿类动物细胞系中存在的种特异性病毒， 也可用杂交法、PCR法、单抗检测及电镜检测；
(2)人源的细胞系可用体外诊断试验检测病毒性病原，如EB病毒、巨细胞病毒(CMV)、乙型及丙型肝炎病毒(HBV、HCV)、艾滋病病毒(HIV)。常用方法有杂交法、PCR法、单抗检 测及电镜检测；
(3)逆转录病毒检测可用电镜检查和逆转录酶(RT)测定。
3.2细胞鉴别试验 可采用生化方法如同功酶分析、免疫学(如HLA分析)、细胞遗传学(如染色体标记试
验)和遗传标记物(如DNA指纹图谱)等任何方法进行鉴别，证明无其他种细胞污染。
3.4致肿瘤性检测 用于生产的传代细胞系应有致瘤性的文献，对于已经证实有致瘤性的啮齿类动物来源的
传代细胞如BHK-21、CHO、C-127不要求做致瘤性试验，除非研究文献能够证明某一新的细 胞系不具有致瘤性，否则应把此细胞看作有致瘤性。如果要鉴定某个细胞系是否有致瘤性，可以单用体内法或者单用体外法，也可以体内、体外两种方法联合使用。
3.4.1体内检测
3.4.1.1动物
(1)裸鼠；
(2)抗胸腺细胞(ATS)血清或球蛋白(ATG)抑制免疫的新生地鼠、小白鼠或大白鼠；
(3)用健康小白鼠骨髓再建的胸腺切除并照射过的小白鼠。, 百拇医药
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
动物 要求 数量 接种 接种量* 观察
组别 途径 (ml/只) 天数 结 果
────────────────────────────────
乳鼠 24小时内 2窝≥ 脑内 0.01 21 应健存10只
腹腔 0.1
成鼠 12～24g 10 脑内 0.03 21 应健存
腹腔 0.5
豚鼠 350～500g 5 腹腔 5.0 42 应健存，解剖
无结核病变
家兔 1.5～2.5kg 5 皮内 0.1×10 21 无异常
皮下 9.0 健存
鸡胚 9～11日龄 10 尿囊腔 0.2 3～4 尿液血凝试验**
阴性
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
*每只动物腹腔至少接种107细胞；脑内至少接种106细胞；鸡胚103细胞
**用豚鼠和鸡血球
如80%以上动物和鸡胚健存，此试验为通过。
如果细胞系来源为啮齿类动物，应用10只敏感的成年小白鼠，每只脑内接种106活细 胞用以检测是否有淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒污染。
3.1.3.4特殊外源病毒检测
(1)小白鼠、大白鼠及地鼠抗体产生试验检测啮齿类动物细胞系中存在的种特异性病毒， 也可用杂交法、PCR法、单抗检测及电镜检测；
(2)人源的细胞系可用体外诊断试验检测病毒性病原，如EB病毒、巨细胞病毒(CMV)、乙型及丙型肝炎病毒(HBV、HCV)、艾滋病病毒(HIV)。常用方法有杂交法、PCR法、单抗检 测及电镜检测；
(3)逆转录病毒检测可用电镜检查和逆转录酶(RT)测定。
3.2细胞鉴别试验 可采用生化方法如同功酶分析、免疫学(如HLA分析)、细胞遗传学(如染色体标记试
验)和遗传标记物(如DNA指纹图谱)等任何方法进行鉴别，证明无其他种细胞污染。
3.4致肿瘤性检测 用于生产的传代细胞系应有致瘤性的文献，对于已经证实有致瘤性的啮齿类动物来源的
传代细胞如BHK-21、CHO、C-127不要求做致瘤性试验，除非研究文献能够证明某一新的细 胞系不具有致瘤性，否则应把此细胞看作有致瘤性。如果要鉴定某个细胞系是否有致瘤性，可以单用体内法或者单用体外法，也可以体内、体外两种方法联合使用。
3.4.1体内检测
3.4.1.1动物
(1)裸鼠；
(2)抗胸腺细胞(ATS)血清或球蛋白(ATG)抑制免疫的新生地鼠、小白鼠或大白鼠；
(3)用健康小白鼠骨髓再建的胸腺切除并照射过的小白鼠。, 百拇医药
参见：首页 > 药学版 > 药品研究