新生物制品审批办法9-4
http://www.100md.com
医业网
(4)若最终制品为腺病毒，须补充以下文献：a.腺病毒颗粒数及感染单位的测定：目前公认的腺病毒的定量，是腺病毒颗粒测定，以 腺病毒基因组DNA定量为依据，以1个OD260单位作为1.1×1012颗粒；同时要测定感染滴度。
b.复制型腺病毒的检测 参考美国FDA1996的建议，在一个病人用的腺病毒的总量中，复制病毒不超过1个PFU。
在整个制备过程中，从种子细胞库、工作细胞库的建立以及以后制备用于临床的病毒制剂， 均需检测复制性腺病毒。检测必须有阳性对照，感染分子比率(MOI)在10～100之间(过高MOI可抑制复制性病毒的生长)。
2.非病毒型导入系统作为最终制剂： 这包括表达质粒DNA的直接导入或制备成脂质体、多肽/DNA复合物或金属粒子通过基因枪导入人体等。凡属此类者须提供以下文献：(1)制备工艺流程应包括几个部分：a.目的基因表达质粒DNA的制备工艺：包括大量扩增、DNA分离、纯化成半成品。
b.脂质体多肽或其它介导物质的制备工艺。
c.加工为最终制剂(如脂质体、多肽/DNA复合物或其它)的制备工艺。
(2)DNA半成品的质控：须包括DNA的纯度、超螺旋体的比例；细菌RNA、基因组DNA及蛋白残留量。DNA制备不得应用氯化铯类化合物。
(3)脂质体、多肽类的质控。由于脂质体的形成及多肽类合成过程的随机性，不可能 达到一般化学合成物的均一性及纯度，为此应提供不同批号间保证安全有效的可以达到的最大均一性的程度。
(4)最终制剂的质控：①须提供最终制剂的均一性的文献，不同批号存在的最大均一性的程度，并通过有效性 与安全性试验证明在该均一性的范围内有效与安全的证据。
②提供以下检测文献：●无菌试验●热原质试验●过敏试验●异常毒性试验●介导目的基因的活性检测 ●有害物质残余量的测定3.以基因工程化的细胞为最终制剂： 这是指应用病毒型或非病毒型基因导入系统，将目的基因导入细胞(自体或非自体细胞)，然后扩增成制品而用于病人。这包括ex vivo及其它形式的基因治疗。该类制品应参 照《人体细胞治疗申报临床试验指导原则》进行申报，同时须提供以下文献：(1)细胞扩增的全部制备工艺，包括生产流程、所用培养液及其配制方法、细胞收集、 洗涤最终制品中所用的保存液配方。
(2)半成品(分装前)的质控：a.细胞形态、表面标志、染色体组型及其同一性。
b.活细胞比例。
c.目的基因存在状态、表达及其稳定性。尤其要说明对基因及其载体导入后是否出现基 因"插入性突变"及其观察方法及结果。
d.上清液中的细菌、热原质及其它外源因子等。
e.上清液中小牛血清蛋白残留量。
f.若为释放病毒的细胞，须补充提供：①病毒滴度。
②病毒转导基因的活性。
③复制型病毒的检测。, 百拇医药
b.复制型腺病毒的检测 参考美国FDA1996的建议，在一个病人用的腺病毒的总量中，复制病毒不超过1个PFU。
在整个制备过程中，从种子细胞库、工作细胞库的建立以及以后制备用于临床的病毒制剂， 均需检测复制性腺病毒。检测必须有阳性对照，感染分子比率(MOI)在10～100之间(过高MOI可抑制复制性病毒的生长)。
2.非病毒型导入系统作为最终制剂： 这包括表达质粒DNA的直接导入或制备成脂质体、多肽/DNA复合物或金属粒子通过基因枪导入人体等。凡属此类者须提供以下文献：(1)制备工艺流程应包括几个部分：a.目的基因表达质粒DNA的制备工艺：包括大量扩增、DNA分离、纯化成半成品。
b.脂质体多肽或其它介导物质的制备工艺。
c.加工为最终制剂(如脂质体、多肽/DNA复合物或其它)的制备工艺。
(2)DNA半成品的质控：须包括DNA的纯度、超螺旋体的比例；细菌RNA、基因组DNA及蛋白残留量。DNA制备不得应用氯化铯类化合物。
(3)脂质体、多肽类的质控。由于脂质体的形成及多肽类合成过程的随机性，不可能 达到一般化学合成物的均一性及纯度，为此应提供不同批号间保证安全有效的可以达到的最大均一性的程度。
(4)最终制剂的质控：①须提供最终制剂的均一性的文献，不同批号存在的最大均一性的程度，并通过有效性 与安全性试验证明在该均一性的范围内有效与安全的证据。
②提供以下检测文献：●无菌试验●热原质试验●过敏试验●异常毒性试验●介导目的基因的活性检测 ●有害物质残余量的测定3.以基因工程化的细胞为最终制剂： 这是指应用病毒型或非病毒型基因导入系统，将目的基因导入细胞(自体或非自体细胞)，然后扩增成制品而用于病人。这包括ex vivo及其它形式的基因治疗。该类制品应参 照《人体细胞治疗申报临床试验指导原则》进行申报，同时须提供以下文献：(1)细胞扩增的全部制备工艺，包括生产流程、所用培养液及其配制方法、细胞收集、 洗涤最终制品中所用的保存液配方。
(2)半成品(分装前)的质控：a.细胞形态、表面标志、染色体组型及其同一性。
b.活细胞比例。
c.目的基因存在状态、表达及其稳定性。尤其要说明对基因及其载体导入后是否出现基 因"插入性突变"及其观察方法及结果。
d.上清液中的细菌、热原质及其它外源因子等。
e.上清液中小牛血清蛋白残留量。
f.若为释放病毒的细胞，须补充提供：①病毒滴度。
②病毒转导基因的活性。
③复制型病毒的检测。, 百拇医药
参见：首页 > 药学版 > 药品研究