通心络对AMI再灌注后 心肌无再流的防治及其机制(二)
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(续11月1日A11版)
结果显示,对照组急性心肌梗死(AMI)再灌注后无再流心肌面积(ANR)大,且结扎区心肌几乎全部坏死。各治疗组心肌声学造影MCE检查与病理染色测定的结扎区心肌面积(LA)相当,并均与对照组相当(P均>0.05),具有可比性。
通心络显著减小AMI再灌注后ANR
活体MCE检查与病理染色检测结果显示,猪AMI 3小时再灌注1小时后出现了明显的心肌无再流,其面积高达80%左右,重要的是,通心络中剂量能使ANR分别降至(41.1±1.3)%和(42.2±3.1)%,比对照组降低了约49%(P<0.01);通心络大剂量使ANR降至(24.1±1.9)%和(25.0±4.2)%,比对照组降低了约68%(P<0.01),又比中剂量组降低了约40%(P<0.05)。这提示,通心络确实能够显著减小ANR,且呈显著的量效关系。
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MCE检测ANR 我们采用MCE体外检测结果显示(图2),无心肌显影的结扎区灌注缺损心肌面积(呈黑色)和再灌注后ANR(呈黑色)在对照组均较大,而减小再灌注后ANR的作用在通心络干预组中,小剂量无效,中剂量有效,大剂量疗效更好,且与西药的疗效相似。
病理染色检测ANR 我们对实验猪行病理检查和心梗面积测定结果显示(图3),AMI结扎区灌注缺损心肌面积(箭头间红色区)和再灌注后无再流心肌面积(箭头间黑色区)在对照组均较大,而减小再灌注后无再流心肌面积的作用在通心络干预组中,小剂量无效,中剂量有效,大剂量疗效更好,且与西药腺苷和尼可地尔的疗效相似。
通心络显著减小AMI再灌注后梗死心肌面积(NA)
NA在通心络中剂量和大剂量组显著减小[分别为(90.2±4.4)%和(81.2.2±8.8)%,P<0.05],并显著小于对照组和小剂量组[(99.2±0.8)%,P<0.05],且大剂量组显著小于中剂量组(P<0.05,P<0.05)。这提示,通心络确实可剂量依赖性地减小AMI再灌注后ANR和NA。
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大剂量通心络减小AMI再灌注后ANR和NA的作用与西药相当
该研究显示,无论是MCE检查还是病理染色测定的ANR以及NA的减小,通心络大剂量组均与腺苷、地尔硫■和尼可地尔组相当(P>0.05)且显著优于地尔硫■组,而中剂量和小剂量组却不如西药(P<0.05、P<0.01)。这提示,大剂量通心络减少AMI再灌注后ANR和NA的疗效与西药相当。
我们的动物实验研究还表明,在AMI再灌注以后静脉给予腺苷可减小猪AMI再灌注后ANR和NA,而冠脉内推注地尔硫■仅可减小ANR,却不能影响NA。但在AMI再灌注前开始静脉给予腺苷及再灌注前冠脉内推注地尔硫■,却均可减小猪AMI再灌注后ANR和坏死面积,这说明给药时机是关键。一般认为,再灌注前给予血管扩张剂均有效,而再灌注后给予血管扩张剂疗效显著降低。因此,我们认为,微血管痉挛可能是再灌注后即刻产生无再流的机制之一。
我们的研究提示,无论是通过心肌声学造影检测,还是采用病理染色检测,对于通心络减小再灌注后无再流心肌面积的作用均得出相同结果,即通心络中剂量有效,大剂量疗效更好,与西药腺苷、地尔硫■和尼可地尔的疗效相似。
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3.通心络减少AMI再灌注后ANR和NA的作用机制与相关检测指标
在以上研究的基础上,为进一步探讨通心络减少AMI再灌注后心肌无再流面积和梗死面积的作用机制,我们对AMI再灌注无再流动物模型的心肌正常区、再灌注区和无再流区组织中的各项相关指标进行了检测。
通心络减轻自由基介导的脂质过氧化反应和心肌灌注损伤
我们对兔模型的研究显示,通心络可剂量依赖性地提高AMI再灌注后血清和心肌总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)浓度,降低血浆和心肌丙二醛(MDA)浓度。这表明,AMI再灌注后心肌和微血管内皮损伤程度加重,而通心络有保护AMI再灌注心肌和血管内皮损伤的作用,这与其具有较强的氧自由基清除能力,减轻自由基所介导的脂质过氧化反应和抗氧化及抗氧化损伤的作用有关,从而减轻了心肌的灌注损伤。
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通心络通过对内皮功能指标的调控改善血管内皮功能预防无再流
血清一氧化氮(NO)水平 我们的研究结果显示,控制血清NO水平降低的作用地尔硫■和小剂量通心络无效,中剂量,尤其是大剂量通心络控制血清NO水平降低的作用显著,且与腺苷和尼可地尔相当,并优于钙拮抗剂。
一氧化氮合酶(NOS)和内皮素(ET)-1及其基因表达 我们采用放射免疫方法(RIA)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对中华小型猪AMI模型的研究结果显示,对于升高cNOS活性和cNOS mRNA 表达水平,降低iNOS活性和iNOS mRNA,ET-1含量和ET-1 mRNA 表达水平的作用,钙拮抗剂地尔硫■和通心络小剂量组无效,通心络中剂量有效,大剂量疗效更显著(P<0.05),并与腺苷和尼可地尔疗效相当。这说明,大、中剂量通心络干预可使心肌再灌注损伤减轻,微血管内皮细胞损伤较轻,其疗效可与西药腺苷和尼可地尔相媲美,并具有剂量依赖性特点。同时也说明,内皮细胞受损可能是无再流发生的重要机制之一,通心络可能通过保护内皮细胞起到了减少无再流的作用。
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通心络通过抗炎症反应保护血管内皮细胞
通心络降低P-选择素(P-S)及其mRNA表达 我们对AMI再灌注无再流猪模型的研究显示,血清P-S浓度,通心络中剂量和大剂量组上升幅度显著小于对照组(P<0.05,P<0.01);心肌组织P-S浓度及其mRNA表达水平,通心络大剂量组显著小于对照组(P<0.05,P<0.01)。这提示通心络可降低AMI再灌注后无再流动物血浆和心肌P-S浓度及其mRNA表达水平。
通心络降低可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)、可溶性细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及其 mRNA表达 我们的研究还显示,血清sVCAM-1和sICAM-1浓度,只有通心络大剂量组的上升幅度显著小于对照组(P<0.01,P<0.05);心肌组织,在灌注区和无再流区,通心络大剂量组和中剂量组ICAM-1的升高幅度显著小于对照组(P<0.01,P<0.05);在灌注区,通心络大剂量组ICAM-1 mRNA表达水平的升高幅度显著小于对照组(P<0.05)。这提示,通心络可降低AMI再灌注后无再流动物血浆sVCAM-1浓度和心肌组织ICAM-1、ICAM-1 mRNA和VCAM-1、VCAM-1 mRNA水平。(未完待续)
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图2 声学造影所示各组ANR
对照组(a、b),通心络小剂量(c、d)、中剂量(e、f)、大剂量组(g、h),腺苷组(i、j)、地尔硫■组(k、l)和尼可地尔组(m、n)经声学造影所测的AMI结扎区心肌面积:图a、c、e、g、i、k ,灌注缺损区呈黑色;再灌注后无再流心肌面积:b、d、f、h、j、l,无再流区呈黑色。
图3 病理染色所示各组ANR
对照组(a、b),通心络小剂量(c、d)、中剂量(e、f)、大剂量组(g、h),腺苷组(i、j)、地尔硫■组(k、l)和尼可地尔组(m、n)经病理染色(4%硫磺素、Evan’s蓝、1% 四氮唑红)所测的AMI结扎区心肌面积:图a、c、e、g、i、k 箭头间的红色区;再灌注后无再流心肌面积:图b、d、f、h、j、l荧光下箭头间的黑色区。, 百拇医药