TLR4基因沉默如何延缓动脉粥样硬化?
大会设立了“动脉粥样硬化发病机制的关键信号转导途径(Critical Signaling Pathways in the Pathogenesis of Atherosclerosis)”专题,中国工程院院士、山东大学齐鲁医院张运教授代表课题组发言,介绍了TLR4基因沉默对动脉硬化的影响。
Toll样受体4( TLR4)与动脉粥样硬化的发生发展密切相关。活化的TLR4可激活丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)和核因子(NF)-κB通路,并诱导促炎因子白细胞介素-6(IL-6)基因大量表达。IL-6不仅参与了粥样硬化的形成,而且是斑块不稳定性的触发因素。我们的研究表明,TLR4基因沉默能通过抑制PI3k/Akt/ NF-κB 信号通路,延缓动脉粥样硬化进程。
用封闭TLR4基因的小分子干扰RNA(RNAi)载体转染THP-1细胞系,检测发现其TLR4 信使RNA(mRNA)及蛋白表达水平显著降低。用脂多糖(LPS)作用30分钟时,THP-1细胞NF-κB活性增加达高峰,TLR4 RNAi则可显著抑制其活性(P<0.05)。同样的,该RNAi也显著抑制LPS对PI3K/Akt/P65/IL-6信号通路蛋白的表达诱导作用 (P<0.05)。
采用动物实验进一步验证TLR4的作用。对54只高脂喂养的雄性apoE-/-鼠行左颈总动脉套环术,4周后腹腔注射LPS,再过4周将小鼠随机分为RNAi组和阴性对照组,去除套管并分别将RNAi腺病毒及阴性对照腺病毒于左颈总动脉套管处孵育15分钟。10周末检测发现,与对照组相比,RNAi组病变血管斑块胶原含量、纤维帽厚度显著增加,而TLR4和IL-6表达及易损指数显著降低(P<0.05)。, 百拇医药
Toll样受体4( TLR4)与动脉粥样硬化的发生发展密切相关。活化的TLR4可激活丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)和核因子(NF)-κB通路,并诱导促炎因子白细胞介素-6(IL-6)基因大量表达。IL-6不仅参与了粥样硬化的形成,而且是斑块不稳定性的触发因素。我们的研究表明,TLR4基因沉默能通过抑制PI3k/Akt/ NF-κB 信号通路,延缓动脉粥样硬化进程。
用封闭TLR4基因的小分子干扰RNA(RNAi)载体转染THP-1细胞系,检测发现其TLR4 信使RNA(mRNA)及蛋白表达水平显著降低。用脂多糖(LPS)作用30分钟时,THP-1细胞NF-κB活性增加达高峰,TLR4 RNAi则可显著抑制其活性(P<0.05)。同样的,该RNAi也显著抑制LPS对PI3K/Akt/P65/IL-6信号通路蛋白的表达诱导作用 (P<0.05)。
采用动物实验进一步验证TLR4的作用。对54只高脂喂养的雄性apoE-/-鼠行左颈总动脉套环术,4周后腹腔注射LPS,再过4周将小鼠随机分为RNAi组和阴性对照组,去除套管并分别将RNAi腺病毒及阴性对照腺病毒于左颈总动脉套管处孵育15分钟。10周末检测发现,与对照组相比,RNAi组病变血管斑块胶原含量、纤维帽厚度显著增加,而TLR4和IL-6表达及易损指数显著降低(P<0.05)。, 百拇医药