中国人血浆DNA定量检测技术初试“牛刀”
本报讯 驻地记者张群近日在江苏省人民医院获悉,由该院检验中心主任潘世扬教授牵头的中国人血浆DNA定量多中心检测研究协作组,研发成功人血浆循环DNA双重实时荧光定量检测技术,并初步确定人血浆DNA水平正常参考值区间为0~99 ng/ml。
研究人员于2006年初建立了人血浆循环DNA的双重实时荧光定量检测技术(已经申请了国家技术发明专利)。该技术通过巧妙的设计,构建了人工质粒作为内参照物,将已知量的重组质粒投入血浆,采用磁珠法对血浆DNA进行提取,再进行双重实时PCR扩增,扩增过程中重组质粒和靶基因反应共用一条下游引物,从而达到扩增效率一致,通过内参照物的量就可以计算出血浆中循环DNA的量。该技术通过内参照物的设立,缩小了检测方法的批内、批间误差,同时也克服了提取过程中DNA丢失对结果的影响,能真实地反应提取前血浆DNA水平。
研究人员收集了江苏地区100名健康人血浆,采用该专利技术对其血浆DNA水平进行定量检测,确定其中值水平为37 ng/ml,正常参考值区间为0~99 ng/ml。
据潘世扬介绍,在未来1~2年,研究人员将采用这一专利技术进行中国人血浆DNA水平定量检测大样本研究,同时,该技术将被应用于各分中心相关临床疾病的研究,最终建立中国人血浆循环DNA的正常参考值。
潘世扬介绍说,近年来的研究表明,人外周血液中的血浆循环DNA量和质的改变与多种疾病关系密切,它对肿瘤、复合性严重外伤、器官移植、妊娠相关疾病、感染性疾病、器官衰竭等疾病的早期诊断、病程监测以及疗效和预后评估等方面均具有重要的临床价值。, 百拇医药
研究人员于2006年初建立了人血浆循环DNA的双重实时荧光定量检测技术(已经申请了国家技术发明专利)。该技术通过巧妙的设计,构建了人工质粒作为内参照物,将已知量的重组质粒投入血浆,采用磁珠法对血浆DNA进行提取,再进行双重实时PCR扩增,扩增过程中重组质粒和靶基因反应共用一条下游引物,从而达到扩增效率一致,通过内参照物的量就可以计算出血浆中循环DNA的量。该技术通过内参照物的设立,缩小了检测方法的批内、批间误差,同时也克服了提取过程中DNA丢失对结果的影响,能真实地反应提取前血浆DNA水平。
研究人员收集了江苏地区100名健康人血浆,采用该专利技术对其血浆DNA水平进行定量检测,确定其中值水平为37 ng/ml,正常参考值区间为0~99 ng/ml。
据潘世扬介绍,在未来1~2年,研究人员将采用这一专利技术进行中国人血浆DNA水平定量检测大样本研究,同时,该技术将被应用于各分中心相关临床疾病的研究,最终建立中国人血浆循环DNA的正常参考值。
潘世扬介绍说,近年来的研究表明,人外周血液中的血浆循环DNA量和质的改变与多种疾病关系密切,它对肿瘤、复合性严重外伤、器官移植、妊娠相关疾病、感染性疾病、器官衰竭等疾病的早期诊断、病程监测以及疗效和预后评估等方面均具有重要的临床价值。, 百拇医药