聚合酶链反应实验室核酸检测手足口病
□王勇鸣
手足口病是由肠道病毒引起的急性传染病，主要症状为手、足、口腔等部位的斑丘疹、疱疹，少数重症病例可出现脑膜炎、脑炎、脑脊髓炎、肺水肿等。此病主要通过消化道、呼吸道和密切接触等途径传播。病人和隐性感染者均为传染源。多发生于学龄前儿童，3岁以下最易发病。
手足口病的诊断依据包括流行病学资料、临床表现和实验室诊断三部分。现结合我院在临床实践中及实验诊断方面累积的丰富的经验，将聚合酶链反应实验室核酸检测手足口病进行简单的介绍。
【标本采集】
咽拭子：发病3天内的咽拭子标本，用专用棉签，适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位，避免触及舌部，放入装有2~3毫升保存液的采集管中，折断棉签，旋紧管盖，4摄氏度暂存。
疱疹液：可采集多个疱疹作为一份标本，先用75%乙醇对皮肤消毒，然后用消毒针挑破疱疹，用棉签蘸取，放入2~3毫升的保存液管中，4摄氏度暂存。
大便：发病7天内的大便5~8克/份，放入无菌采便管内，4摄氏度暂存。
注：标本的采集，可以做核酸检查的标本有咽拭子、疱疹液、脑脊液、粪便、血清等。
【保存】
4摄氏度暂存，零下20摄氏度以下保存一个月，长期保存于零下70摄氏度。
【安全防护】
实验室工作人员按照三级防护原则执行：注意手卫生，执行七步洗手法；严格执行标准预防；实验过程在生物安全柜中操作。
【临床意义】
可在5~6个小时内，快速检测到肠道病毒核酸，对手足口病早期诊断提供实验室依据，利于早期诊断、早期治疗。
检查中，以疱疹液阳性检出率为最高，占59.7%，咽拭子阳性检出率占39.3%，粪便阳性检出率占23.2%，血清阳性检出率极低，占2.0%，脑脊液阳性检出率为零。
疱疹液阳性率高，但标本不易采集，咽拭子阳性率较高，标本易采集，固以咽拭子采集为易，可广泛开展，是较为理想的检测标本。
王勇鸣 河南省传染病医院(郑州市第六人民医院)检验科主任、副主任检验师，毕业于开封医学高等专科学校检验专业，曾在河南医科大学生物系进修；长期从事临床检验工作，有丰富的工作经验和管理经验；发表国家级、省级论文17篇、专著2部，获得国家专利1项、地市级科研成果2项。
联系电话：0371-61222001
河南省传染病医院(郑州市第六人民医院)检验科现有职工30人，其中副主任检验师1名、主管技师6名、检验师8名、检验士4名，设有输血科、病理科、参比室和12个实验室，配备有美国罗氏480聚合酶链反应仪、美国贝迪流式细胞仪、美国贝迪全自动细菌培养鉴定分析系统、全自动五分类血液分析仪、贝克曼全自动生化分析仪、病毒载量仪等先进设备，开设了省会第一家通过卫生部认证的聚合酶链反应实验室。科室开展检验项目317项，其中新项目9项(人类疱疹病毒，巨细胞病毒，高、低密度脂蛋白，凝血酶原时间，血浆纤维蛋白原，前白蛋白，Rh血型，不规则抗体)，传染病特性检查多项；创新了传染病检测工作的模式和方法，传染病抗体检测技术处于全省领先水平。, 百拇医药
手足口病是由肠道病毒引起的急性传染病，主要症状为手、足、口腔等部位的斑丘疹、疱疹，少数重症病例可出现脑膜炎、脑炎、脑脊髓炎、肺水肿等。此病主要通过消化道、呼吸道和密切接触等途径传播。病人和隐性感染者均为传染源。多发生于学龄前儿童，3岁以下最易发病。
手足口病的诊断依据包括流行病学资料、临床表现和实验室诊断三部分。现结合我院在临床实践中及实验诊断方面累积的丰富的经验，将聚合酶链反应实验室核酸检测手足口病进行简单的介绍。
【标本采集】
咽拭子：发病3天内的咽拭子标本，用专用棉签，适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位，避免触及舌部，放入装有2~3毫升保存液的采集管中，折断棉签，旋紧管盖，4摄氏度暂存。
疱疹液：可采集多个疱疹作为一份标本，先用75%乙醇对皮肤消毒，然后用消毒针挑破疱疹，用棉签蘸取，放入2~3毫升的保存液管中，4摄氏度暂存。
大便：发病7天内的大便5~8克/份，放入无菌采便管内，4摄氏度暂存。
注：标本的采集，可以做核酸检查的标本有咽拭子、疱疹液、脑脊液、粪便、血清等。
【保存】
4摄氏度暂存，零下20摄氏度以下保存一个月，长期保存于零下70摄氏度。
【安全防护】
实验室工作人员按照三级防护原则执行：注意手卫生，执行七步洗手法；严格执行标准预防；实验过程在生物安全柜中操作。
【临床意义】
可在5~6个小时内，快速检测到肠道病毒核酸，对手足口病早期诊断提供实验室依据，利于早期诊断、早期治疗。
检查中，以疱疹液阳性检出率为最高，占59.7%，咽拭子阳性检出率占39.3%，粪便阳性检出率占23.2%，血清阳性检出率极低，占2.0%，脑脊液阳性检出率为零。
疱疹液阳性率高，但标本不易采集，咽拭子阳性率较高，标本易采集，固以咽拭子采集为易，可广泛开展，是较为理想的检测标本。
王勇鸣 河南省传染病医院(郑州市第六人民医院)检验科主任、副主任检验师，毕业于开封医学高等专科学校检验专业，曾在河南医科大学生物系进修；长期从事临床检验工作，有丰富的工作经验和管理经验；发表国家级、省级论文17篇、专著2部，获得国家专利1项、地市级科研成果2项。
联系电话：0371-61222001
河南省传染病医院(郑州市第六人民医院)检验科现有职工30人，其中副主任检验师1名、主管技师6名、检验师8名、检验士4名，设有输血科、病理科、参比室和12个实验室，配备有美国罗氏480聚合酶链反应仪、美国贝迪流式细胞仪、美国贝迪全自动细菌培养鉴定分析系统、全自动五分类血液分析仪、贝克曼全自动生化分析仪、病毒载量仪等先进设备，开设了省会第一家通过卫生部认证的聚合酶链反应实验室。科室开展检验项目317项，其中新项目9项(人类疱疹病毒，巨细胞病毒，高、低密度脂蛋白，凝血酶原时间，血浆纤维蛋白原，前白蛋白，Rh血型，不规则抗体)，传染病特性检查多项；创新了传染病检测工作的模式和方法，传染病抗体检测技术处于全省领先水平。, 百拇医药