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编号:12389252
药用植物掌叶半夏快繁研究
http://www.100md.com 2012年8月5日 王芳
    参见附件。

     【摘要】掌叶半夏块茎含有B-谷甾醇-D-葡萄糖甙、3,4-二羟基乙酸及葡萄糖甙,还含有多种氨基酸及生物碱等。味辛,性温,有毒。归脾、胃、肺经。具有祛湿化痰,降逆止吐,消痞散结作用。主治咳嗽痰多,胸闷胀满,晕眩痞闷,恶心呕吐。生用外治痈肿等症。

    【关键词】掌叶半夏植物组织培养无菌操作技术生长调节剂出苗率

    一、掌叶半夏简介。掌叶半夏为多年生草本植物。块茎球形或扁球形,径约4cm。叶柄纤细柔弱,淡绿色,长45~65cm;叶片掌状分裂,小叶9~11片。肉穗花序顶生,花序柄与叶柄等长或稍长;佛焰苞淡绿色,披针形,下部筒状,长圆形,先端锐尖,长8~14cm;花单性,无花被,雌雄同株。浆果卵圆形,绿色,长4~5mm,径2~3mm,内含种子1粒。幼苗常为单叶,卵状心形;老株叶为3片小叶复叶。浆果成熟时为红色。花期为5月~7月,果期为6月~9月。

    二、植物组织培养的研究意义。1.用于器官分化、形态建成、物

    质代谢以及细胞遗传、病毒学等方面的研究。2.用于快速繁殖无性系,即从一个器官、组织或细胞经过多代培养而得到的后代。3.用于培养无病毒植株。植物的幼嫩部分一般尚未感染病毒。4.用于改良植物品种。5.用于植物性药物生产。

    三、实验方法

    1.实验材料。掌叶半夏块茎

    2.研究方案。(1)比较不同激素及激素配比对愈伤组织诱导及植株再生的影响。(2)比较不同生长条件对愈伤组织诱导及植株再生的影响,选择适宜的生长发育条件。(3)建立掌叶半夏组织培养的再生系统,为工厂化生产提供技术体系。

    3.药品器皿及仪器设备。试剂和药品: MS培养基,2,4-D,KT,琼脂,酒精,蒸馏水等。器皿:三角瓶,烧杯,容量瓶,量筒,移液器,滴管,试管,培养皿等。仪器设备:超净工作台,高压灭菌锅,烘箱,TD-调温万用炉,酒精灯等。其他用品:塑料筐,脱脂棉,移液枪,纱布,火柴,棉绳,牛皮纸,记号笔,标签纸,镊子等。

    4.实验步骤。步骤一:培养基的配置。母液为MS培养基,蔗糖3%,琼脂1.5%,pH 5.8。分别加入:(1):KT 1.0 mg/L + 2,4-D(0.1,0.2,0.5,1.0,2.0)mg/L;(2):2,4-D0.2mg/L+KT(0.1,0.2, 0.5,1.0,2.0) mg/L。步骤二:实验材料的消毒灭菌。先将掌叶半夏块茎用流水冲洗干净,再用75%酒精漂洗15s,无菌水冲洗2~3次,最后用0.1%升汞消毒10~12min,无菌水冲洗4次。将实验器皿及相关用品用牛皮纸或报纸包好,灭菌。培养基用灭菌锅在0.1kPa的压力下维持121℃湿热灭菌25~30min。步骤三:接种培养。将块茎切成0.3×0.3×0.3cm3的小块,接种在固体培养基上,培养温度25±2℃,光强1500lx,每天光照12h。步骤四:炼苗与移栽。当试管苗高4~6cm时,便可在室内打开瓶口炼苗2~3天,然后取出,洗净根系上的培养基,转移到装有土和沙子(1∶1)的塑料网筛,再放置于温室中,温室湿度80%以上,温度15~20℃,经过10天左右在转移到大田栽培[3]。观察幼苗的生长情况,记录各种激素处理下的苗数。

    四、实验结果与分析

    1.愈伤组织的诱导与培养。任何植物细胞或组织培养体系的建立,都必须选择适宜的外植体。经研究,掌叶半夏即可用其块茎,也可采用其叶片、叶柄、珠芽、种子等作为外植体 ......

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