高效液相色谱法测定人体地尔硫及其主要代谢物的药物动力学
作者：谈恒山 杨 洁 肖克岳 蔡明虹
单位：南京军区南京总医院 南京210002
关键词：地尔硫；代谢物；药物动力学；高效液相色谱法
中国医院药学杂志980101 摘要 用高效液相色谱法(HPLC)测定人血清中地尔硫(DZ)及去乙酰地尔硫(M1)浓度。以Spherisorb ODS,5μm为层析柱,流动相:甲醇∶乙腈∶水(60∶10∶30),检测波长237nm,以盐酸普罗帕酮为内标。检测范围:DZ为5.45～272.5ng.ml-1,M1为5.85～292.5ng.ml-1。最低检测浓度:DZ为2.87ng.ml-1,M1为1.99ng.ml-1。平均回收率DZ为101.88%,M1为101.72%,RSD均在12%以内。并对4名受试者口服90mg盐酸地尔硫片后,其药时曲线经微机用PKBP-N1程序拟合,DZ为一房室开放模型,M1为二房室开放模型,求得DZ和M1的T1/2分别为5.6±1.5h和14±7h。
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The pharmacokinetic studies of diltiazem and its major active metabolites in human by HPLC
Tan Hengshan,Yang Je,Cai Minghong,et al
(General Hospital of Nanjing Armed Forces,Nanjing 210002)
A HPLC method for simultaneous determination of diltiazem(DZ) and its major metabolite desacetyldiltiazem (M1) in human plasma was described using SPHERISORB ODS 5μm analytical column for separation.An aliquot of the aqueous acid phase was chromatographed using methanol-acetonitrite-water (60∶10∶30) containing 0.08% acetic acid and 0.04% triethylamine as mobile phase.The wavelength used for detection was 237nm.The propafenon was used as the internal standard.The detection ranges were 5.45～272.5ng.ml-1 for DZ and 5.85～292.5ng.ml-1 for M1.The methods are highly sensitive with limits of detection at 2.87ng.ml-1 for DZ and 1.99ng.ml-1 for M1 respectively.The recoveries were about 101.88% for DZ and 101.72% for M1 respectively.The RSD values of within-day and between-day were all lower than 12%.After 4 healthy volunteers received 90mg diltiazem tablets,the time curves of concentration in plasma were fitted by PKBP-N1 program.DZ was fitted to a one compartment open model.M1 was fitted to a two compartment open model.The results showed that T1/2 of DZ and M1 were 5.63±1.48h and 14.49±7.08h respectively.
, 百拇医药
Key words diltiazem,pharmacokinetics,HPLC
盐酸地尔硫是一种新的钙通道阻断剂,是治疗心绞痛、高血压等心血管疾病的首选药物之一。有关地尔硫的血药浓度测定方法,国内已有报道[1-3],但对其主要代谢产物-去乙酰地尔硫的药物动力学研究未见报道。本文建立了一种HPLC法同时测定人血清中盐酸地尔硫(DZ)和去乙酰地尔硫(M1)浓度的方法,并进行了DZ和M1的药物动力学研究,结果报道如下。
1 实验方法
1.1 仪器和试药 LC-6A高效液相色谱仪(日本株式会社岛津制作所),FCV-2AH高压流路切换阀,SPD-6AV紫外检测器,SCL-6B控制器,CR-6A数据处理机。盐酸地尔硫对照品(杭州民生药厂提供),去乙酰地尔硫对照品(上海淮海制药厂提供)。合心爽(盐酸地尔硫)片剂30mg DZ/片(日本田边制药株式会社,批号44034)。盐酸普罗帕酮注射液3.5mg.ml-1(上海信谊药厂,批号920802)。甲醇、乙腈、正己烷、异戊醇、冰醋酸和三乙胺均为分析纯试剂。
, 百拇医药
1.2 色谱条件和血样处理[4-6]
1.2.1 色谱条件 采用日本岛津LC-6A高效液相色谱仪,色谱柱:Spherisorb ODS,5μm,4.6×250mm(大连化物所提供);流动相:甲醇∶乙腈∶水(60∶10∶30),内含0.08%冰醋酸,0.04%三乙胺,使用前过滤,超声脱泡。检测波长237nm,流量1.0ml.min-1,检测灵敏度0.001,纸速1mm.min-1,进样体积20μl。
1.2.2 血样预处理 取1.0ml血清,加内标10μl(盐酸普罗帕酮28μg.ml-1),再加正己烷∶异戊醇(98∶2)混合溶剂每次4ml,提取两次。每次振荡3min,离心(3000r.min-1)5min,合并有机层。取7ml提取液,加0.01mol.L-1盐酸100μl,充分振摇30次,离心(3000r.min-1)5min,弃去有机层,水层取20μl进样。
, 百拇医药
1.2.3 DZ和M1的血清标准曲线配制 于空白血清1.0ml中加入内标10μl,再加入DZ和M1标准液,使其浓度分别为:DZ 5.45,10.9,27.25,54.5,109.0,163.5,272.5ng.ml-1;M1 5.85,11.7,29.25,58.5,117.0,175.5,292.5ng.ml-1。按血清预处理方法处理后进样。分别以DZ和M1的浓度对色谱峰高比Y(HDZ/H内)和Y＇(HM1/H内)进行回归计算,得到血清标准曲线方程。
1.2.4 回收率 取4种不同浓度(DZ:10.9,54.5,109.0,163.5ng.ml-1;M1:11.7,58.5,117.0,175.5ng.ml-1)的血清样品,按血清预处理操作,每个浓度做8次,用实测值与理论值之比计算回收率。
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1.2.5 精密度试验 用4种不同浓度的DZ和M1血样,按血样预处理测定峰高比,每种浓度连续进样5次,得日内差;4种浓度在2周内测定7次,得日间差。
1.2.6 干扰实验 因临床上往往合并用药,所以我们预试了30多种有关的心血管药物干扰试验,考察本法的专属性。
1.3 人体试验
1.3.1 受试者 4名年轻健康男性,具有标准体重,血尿常规和肝肾功能以及心电图均属正常。2周前未用其它药品,服药前空腹12h以上,服药后4h进统一餐,试验期间可饮水,禁酒、茶和吸烟。
1.3.2 血样采集 口服合心爽90mg,分别于0.5,1,1.5,2,3,4,5,6,8,10,12,24h静脉采血3ml,离心,取血清1ml,按血样预处理操作,测得DZ和M1的峰高。
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1.3.3 数据处理 4名受试者的药时曲线用PKBP-N1程序在386微机上进行拟合,得到DZ和M1的药物动力学参数。
2 结果
2.1 色谱行为和标准曲线 用不同浓度的DZ和M1对峰高比进行线性回归,得血清标准曲线方程分别为:
DZ:Y=0.02194C-0.01303,r=0.9996(5.45～272.5ng.ml-1)
M1:Y=0.02492C-0.00753,r=0.9998(5.85～292.5ng.ml-1)
, 百拇医药 DZ的最低检测浓度为2.87ng.ml-1,M1的最低检测浓度为1.99ng.ml-1。层析结果为单一色谱峰,出峰保留时间为:DZ 10.3min,M1 8.4min和内标(盐酸普罗帕酮)12.9min。色谱图见图1。
图 1 色谱图
A 标准品中地尔硫及去乙酰地尔硫色谱图;B 空白血清中内标的色谱图;C 样品血清中地尔硫去乙酰地尔硫及内标色谱图;1 地尔硫;2 去乙酰地尔硫;3 内标(盐酸普罗帕酮)
2.2 回收率 用4种不同的DZ和M1血清标准品进行回收试验,其结果见表1。
表 1 地尔硫和去乙酰地尔硫回收试验结果 (±s%,n=8)
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DZ
C(ng.ml-1)
回收率
(%)
M1
C(ng.ml-1)
回收率
(%)
10.9
106±13
11.7
, 百拇医药
107±12
54.5
101±8
58.5
101±9
109.0
101±7
117.0
100±5
163.5
99.7±2.3
175.5
99±4
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±s
102±8
102±7
2.3 精密度试验结果 4种不同浓度的DZ和M1血样,分别做批内、批间试验,其结果见表2。表 2 地尔硫和去乙酰地尔硫精密度试验结果 药
品
理论值C
(ng.ml-1)
批内实测值(n=5)
批间实测值(n=7)
±s
, 百拇医药
(ng.ml-1)
RSD
(%)
±s
(ng.ml-1)
RSD
(%)
DZ
10.9
11.0±0.9
8.6
, 百拇医药
11.3±1.1
10.1
54.5
57.1±3.0
5.3
55.6±4.3
7.7
109.0
108.7±3.0
2.8
110.0±5.4
4.9
163.5
, 百拇医药
168.8±3.0
1.8
161.7±3.0
1.9
M1
11.7
12.4±0.7
5.4
12.5±1.4
11.2
58.5
60.2±3.2
, 百拇医药
5.4
59.2±5.1
8.6
117.0
119.3±4.4
3.7
116.9±5.3
4.6
175.5
173.7±3.5
2.0
174.2±4.2
, 百拇医药 2.4
2.4 干扰试验结果 在本色谱条件下,将一些常用的药物保留时间列表如下,详见表3。表 3 常用药物的干扰试验结果 药 品
T
(min)
药 品
T
(min)
药 品
T
(min)
对乙酰氨基酚
2.20
, 百拇医药
盐酸麻黄素
4.12
苯海拉明
7.97
双氢克尿塞
2.42
硝苯地平
5.0
吲哚美辛
8.11
乙酰水杨酸
2.56
双异丙吡胺
, 百拇医药
5.36
维拉帕米
9.17
茶碱
2.57
美西津
6.52
布洛芬
10.85
咖啡因
2.80
普萘洛尔
7.47
, 百拇医药
普罗帕酮
12.4
卡托普利
3.80
2.5 地尔硫及去乙酰地尔硫的药物动力学参数 4名男性健康受试者口服合心爽90mg后,测定其药时曲线(见图2)。经微型计算机用PKBP-N1程序拟合,求得DZ和M1的药物动力学参数,其结果见表4。
图 2 地尔硫及去乙酰地尔硫血药浓度-时间曲线
——地尔硫 ……去乙酰地尔硫
表4 地尔硫及去乙酰地尔硫的人体内药动学参数
Ka
, 百拇医药
(h-1)
T1/2
(h)
Tmax
(h)
Cmax
(ng.ml-1)
V.C/F
(L)
MRT
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(h)
AUC
(ng.h.ml-1)
DZ
1
0.72
3.97
2.69
88.57
0.65
5.92
, 百拇医药
854.21
2
1.16
4.83
2.35
108.82
0.62
8.21
783.86
3
1.49
6.52
2.21
, 百拇医药
39.79
1.85
11.94
375.95
4
2.00
7.18
1.89
64.25
1.20
11.25
881.84
1.3
, 百拇医药
5.6
2.29
75.4
1.1
9.3
723.9
±s
0.5
1.5
0.33
29.9
0.6
2.8
, 百拇医药
235.6
M1
1
0.52
7.75
4.00
14.36
4.35
12.56
229.34
2
0.55
11.49
, 百拇医药
4.60
16.77
4.09
15.09
565.16
3
0.77
24.28
3.00
13.91
4.28
33.76
253.86
, 百拇医药
4
0.88
14.45
2.00
25.61
2.45
22.64
371.64
0.68
14.5
3.4
17.7
3.8
, 百拇医药
21.0
355.0
±s
0.17
7.08
1.1
5.4
0.9
9.5
153.3
3 讨论
3.1 采用本法能同时测定人血清中地尔硫及其主要代谢产物去乙酰地尔硫的浓度,操作简便,分析时间短,方法灵敏度高,DZ和M1的峰形较佳。精密度试验表明,本法的RSD值小于12%,具有良好的重现性,为临床用药研究提供一种可靠实用的方法。
, 百拇医药
3.2 4名健康志愿者口服合心爽后,其药时曲线用PKBP-N1程序拟合,DZ为一室开放模型,而M1为二室开放模型。从实验中可知,地尔硫在人体内的血药浓度24h之内远远大于去乙酰地尔硫血药浓度,且地尔硫的T1/2平均为5.6±1.5h,而M1的T1/2则较长,平均为14.5±7.1h,这与国外文献报道基本一致[7]。从表4中T1/2来看,DZ有一定个体差异,而其主要代谢物M1的个体差异较大。从平均AUC来看,M1为DZ的49%,也就是DZ的主要代谢物为M1,并具活性[8]。从色谱图中可见,DZ的极性比M1大,所以色谱层析中先出M1峰,后出DZ峰(在非极性层析系统中)。有资料报道,DZ的消除方式除了肾小球滤过外,还存在着肾小管分泌的缘故[8]。因此,本文为临床研究DZ和M1的药效关系提供了一定的参考价值,也为进一步研究药动和药效的结合模型奠定了基础。
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参考文献
1 顾天华,陈绍行,朱金屏等.地尔硫漂浮片的药物动力学及药效学.中国药理学报,1992,13(6):527
2 李 克,袁倚盛,王宏刚等.反相高效液相色谱法测定血浆中地尔硫及药代动力学研究.药物分析杂志,1992,12(1):12
3 肖大伟,侯艳宁,谢晓禅等.地尔硫在人体的生物利用度.中国医药工业杂志,1991,22(4):159
4 Abernethy RA,Schwartz JB,Todd EL.Diltiazem and desacetyldiltiazem analysis in human plasma using HPLC:improved sensitivity without derivatization J Chromatogr 1985,342:216
, 百拇医药
5 Montamat SC,Abernethy DR,Mitchell JR.HPLC determination of diltiazem and its major metabolites N-mo-nodemethyldiltiazem and desacetyldiltiazem in plasma. J Chromatodr 1987,415:203
6 Dube LM,Mousseau N,Mcgilveray IJ.HPLC determination of diltiazem and four of its metabolites in plasma:evaluation of their stability.J Chromatogr 1988,430:103
7 Hutt V,Janik F,Kappler,et al.Evaluation of pharmacokinetics bioavailability and dose linearity of diltiazem in heathy volunteers.Arzneim Fotsch/Drug Res.1993,43(11):737
8 Boyd RA,Chin SK,Don-Pedro O,et al.The pharmacokinetics and pharmacodynamics of diltiazem and its metabolites in healthy adults after a single oral dose.Clin pharmaco Ther,1989,46:408
(1997年1月14日收稿), 百拇医药
单位：南京军区南京总医院 南京210002
关键词：地尔硫；代谢物；药物动力学；高效液相色谱法
中国医院药学杂志980101 摘要 用高效液相色谱法(HPLC)测定人血清中地尔硫(DZ)及去乙酰地尔硫(M1)浓度。以Spherisorb ODS,5μm为层析柱,流动相:甲醇∶乙腈∶水(60∶10∶30),检测波长237nm,以盐酸普罗帕酮为内标。检测范围:DZ为5.45～272.5ng.ml-1,M1为5.85～292.5ng.ml-1。最低检测浓度:DZ为2.87ng.ml-1,M1为1.99ng.ml-1。平均回收率DZ为101.88%,M1为101.72%,RSD均在12%以内。并对4名受试者口服90mg盐酸地尔硫片后,其药时曲线经微机用PKBP-N1程序拟合,DZ为一房室开放模型,M1为二房室开放模型,求得DZ和M1的T1/2分别为5.6±1.5h和14±7h。
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The pharmacokinetic studies of diltiazem and its major active metabolites in human by HPLC
Tan Hengshan,Yang Je,Cai Minghong,et al
(General Hospital of Nanjing Armed Forces,Nanjing 210002)
A HPLC method for simultaneous determination of diltiazem(DZ) and its major metabolite desacetyldiltiazem (M1) in human plasma was described using SPHERISORB ODS 5μm analytical column for separation.An aliquot of the aqueous acid phase was chromatographed using methanol-acetonitrite-water (60∶10∶30) containing 0.08% acetic acid and 0.04% triethylamine as mobile phase.The wavelength used for detection was 237nm.The propafenon was used as the internal standard.The detection ranges were 5.45～272.5ng.ml-1 for DZ and 5.85～292.5ng.ml-1 for M1.The methods are highly sensitive with limits of detection at 2.87ng.ml-1 for DZ and 1.99ng.ml-1 for M1 respectively.The recoveries were about 101.88% for DZ and 101.72% for M1 respectively.The RSD values of within-day and between-day were all lower than 12%.After 4 healthy volunteers received 90mg diltiazem tablets,the time curves of concentration in plasma were fitted by PKBP-N1 program.DZ was fitted to a one compartment open model.M1 was fitted to a two compartment open model.The results showed that T1/2 of DZ and M1 were 5.63±1.48h and 14.49±7.08h respectively.
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Key words diltiazem,pharmacokinetics,HPLC
盐酸地尔硫是一种新的钙通道阻断剂,是治疗心绞痛、高血压等心血管疾病的首选药物之一。有关地尔硫的血药浓度测定方法,国内已有报道[1-3],但对其主要代谢产物-去乙酰地尔硫的药物动力学研究未见报道。本文建立了一种HPLC法同时测定人血清中盐酸地尔硫(DZ)和去乙酰地尔硫(M1)浓度的方法,并进行了DZ和M1的药物动力学研究,结果报道如下。
1 实验方法
1.1 仪器和试药 LC-6A高效液相色谱仪(日本株式会社岛津制作所),FCV-2AH高压流路切换阀,SPD-6AV紫外检测器,SCL-6B控制器,CR-6A数据处理机。盐酸地尔硫对照品(杭州民生药厂提供),去乙酰地尔硫对照品(上海淮海制药厂提供)。合心爽(盐酸地尔硫)片剂30mg DZ/片(日本田边制药株式会社,批号44034)。盐酸普罗帕酮注射液3.5mg.ml-1(上海信谊药厂,批号920802)。甲醇、乙腈、正己烷、异戊醇、冰醋酸和三乙胺均为分析纯试剂。
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1.2 色谱条件和血样处理[4-6]
1.2.1 色谱条件 采用日本岛津LC-6A高效液相色谱仪,色谱柱:Spherisorb ODS,5μm,4.6×250mm(大连化物所提供);流动相:甲醇∶乙腈∶水(60∶10∶30),内含0.08%冰醋酸,0.04%三乙胺,使用前过滤,超声脱泡。检测波长237nm,流量1.0ml.min-1,检测灵敏度0.001,纸速1mm.min-1,进样体积20μl。
1.2.2 血样预处理 取1.0ml血清,加内标10μl(盐酸普罗帕酮28μg.ml-1),再加正己烷∶异戊醇(98∶2)混合溶剂每次4ml,提取两次。每次振荡3min,离心(3000r.min-1)5min,合并有机层。取7ml提取液,加0.01mol.L-1盐酸100μl,充分振摇30次,离心(3000r.min-1)5min,弃去有机层,水层取20μl进样。
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1.2.3 DZ和M1的血清标准曲线配制 于空白血清1.0ml中加入内标10μl,再加入DZ和M1标准液,使其浓度分别为:DZ 5.45,10.9,27.25,54.5,109.0,163.5,272.5ng.ml-1;M1 5.85,11.7,29.25,58.5,117.0,175.5,292.5ng.ml-1。按血清预处理方法处理后进样。分别以DZ和M1的浓度对色谱峰高比Y(HDZ/H内)和Y＇(HM1/H内)进行回归计算,得到血清标准曲线方程。
1.2.4 回收率 取4种不同浓度(DZ:10.9,54.5,109.0,163.5ng.ml-1;M1:11.7,58.5,117.0,175.5ng.ml-1)的血清样品,按血清预处理操作,每个浓度做8次,用实测值与理论值之比计算回收率。
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1.2.5 精密度试验 用4种不同浓度的DZ和M1血样,按血样预处理测定峰高比,每种浓度连续进样5次,得日内差;4种浓度在2周内测定7次,得日间差。
1.2.6 干扰实验 因临床上往往合并用药,所以我们预试了30多种有关的心血管药物干扰试验,考察本法的专属性。
1.3 人体试验
1.3.1 受试者 4名年轻健康男性,具有标准体重,血尿常规和肝肾功能以及心电图均属正常。2周前未用其它药品,服药前空腹12h以上,服药后4h进统一餐,试验期间可饮水,禁酒、茶和吸烟。
1.3.2 血样采集 口服合心爽90mg,分别于0.5,1,1.5,2,3,4,5,6,8,10,12,24h静脉采血3ml,离心,取血清1ml,按血样预处理操作,测得DZ和M1的峰高。
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1.3.3 数据处理 4名受试者的药时曲线用PKBP-N1程序在386微机上进行拟合,得到DZ和M1的药物动力学参数。
2 结果
2.1 色谱行为和标准曲线 用不同浓度的DZ和M1对峰高比进行线性回归,得血清标准曲线方程分别为:
DZ:Y=0.02194C-0.01303,r=0.9996(5.45～272.5ng.ml-1)
M1:Y=0.02492C-0.00753,r=0.9998(5.85～292.5ng.ml-1)
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图 1 色谱图
A 标准品中地尔硫及去乙酰地尔硫色谱图;B 空白血清中内标的色谱图;C 样品血清中地尔硫去乙酰地尔硫及内标色谱图;1 地尔硫;2 去乙酰地尔硫;3 内标(盐酸普罗帕酮)
2.2 回收率 用4种不同的DZ和M1血清标准品进行回收试验,其结果见表1。
表 1 地尔硫和去乙酰地尔硫回收试验结果 (±s%,n=8)
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DZ
C(ng.ml-1)
回收率
(%)
M1
C(ng.ml-1)
回收率
(%)
10.9
106±13
11.7
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107±12
54.5
101±8
58.5
101±9
109.0
101±7
117.0
100±5
163.5
99.7±2.3
175.5
99±4
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±s
102±8
102±7
2.3 精密度试验结果 4种不同浓度的DZ和M1血样,分别做批内、批间试验,其结果见表2。表 2 地尔硫和去乙酰地尔硫精密度试验结果 药
品
理论值C
(ng.ml-1)
批内实测值(n=5)
批间实测值(n=7)
±s
, 百拇医药
(ng.ml-1)
RSD
(%)
±s
(ng.ml-1)
RSD
(%)
DZ
10.9
11.0±0.9
8.6
, 百拇医药
11.3±1.1
10.1
54.5
57.1±3.0
5.3
55.6±4.3
7.7
109.0
108.7±3.0
2.8
110.0±5.4
4.9
163.5
, 百拇医药
168.8±3.0
1.8
161.7±3.0
1.9
M1
11.7
12.4±0.7
5.4
12.5±1.4
11.2
58.5
60.2±3.2
, 百拇医药
5.4
59.2±5.1
8.6
117.0
119.3±4.4
3.7
116.9±5.3
4.6
175.5
173.7±3.5
2.0
174.2±4.2
, 百拇医药 2.4
2.4 干扰试验结果 在本色谱条件下,将一些常用的药物保留时间列表如下,详见表3。表 3 常用药物的干扰试验结果 药 品
T
(min)
药 品
T
(min)
药 品
T
(min)
对乙酰氨基酚
2.20
, 百拇医药
盐酸麻黄素
4.12
苯海拉明
7.97
双氢克尿塞
2.42
硝苯地平
5.0
吲哚美辛
8.11
乙酰水杨酸
2.56
双异丙吡胺
, 百拇医药
5.36
维拉帕米
9.17
茶碱
2.57
美西津
6.52
布洛芬
10.85
咖啡因
2.80
普萘洛尔
7.47
, 百拇医药
普罗帕酮
12.4
卡托普利
3.80
2.5 地尔硫及去乙酰地尔硫的药物动力学参数 4名男性健康受试者口服合心爽90mg后,测定其药时曲线(见图2)。经微型计算机用PKBP-N1程序拟合,求得DZ和M1的药物动力学参数,其结果见表4。
图 2 地尔硫及去乙酰地尔硫血药浓度-时间曲线
——地尔硫 ……去乙酰地尔硫
表4 地尔硫及去乙酰地尔硫的人体内药动学参数
Ka
, 百拇医药
(h-1)
T1/2
(h)
Tmax
(h)
Cmax
(ng.ml-1)
V.C/F
(L)
MRT
, http://www.100md.com
(h)
AUC
(ng.h.ml-1)
DZ
1
0.72
3.97
2.69
88.57
0.65
5.92
, 百拇医药
854.21
2
1.16
4.83
2.35
108.82
0.62
8.21
783.86
3
1.49
6.52
2.21
, 百拇医药
39.79
1.85
11.94
375.95
4
2.00
7.18
1.89
64.25
1.20
11.25
881.84
1.3
, 百拇医药
5.6
2.29
75.4
1.1
9.3
723.9
±s
0.5
1.5
0.33
29.9
0.6
2.8
, 百拇医药
235.6
M1
1
0.52
7.75
4.00
14.36
4.35
12.56
229.34
2
0.55
11.49
, 百拇医药
4.60
16.77
4.09
15.09
565.16
3
0.77
24.28
3.00
13.91
4.28
33.76
253.86
, 百拇医药
4
0.88
14.45
2.00
25.61
2.45
22.64
371.64
0.68
14.5
3.4
17.7
3.8
, 百拇医药
21.0
355.0
±s
0.17
7.08
1.1
5.4
0.9
9.5
153.3
3 讨论
3.1 采用本法能同时测定人血清中地尔硫及其主要代谢产物去乙酰地尔硫的浓度,操作简便,分析时间短,方法灵敏度高,DZ和M1的峰形较佳。精密度试验表明,本法的RSD值小于12%,具有良好的重现性,为临床用药研究提供一种可靠实用的方法。
, 百拇医药
3.2 4名健康志愿者口服合心爽后,其药时曲线用PKBP-N1程序拟合,DZ为一室开放模型,而M1为二室开放模型。从实验中可知,地尔硫在人体内的血药浓度24h之内远远大于去乙酰地尔硫血药浓度,且地尔硫的T1/2平均为5.6±1.5h,而M1的T1/2则较长,平均为14.5±7.1h,这与国外文献报道基本一致[7]。从表4中T1/2来看,DZ有一定个体差异,而其主要代谢物M1的个体差异较大。从平均AUC来看,M1为DZ的49%,也就是DZ的主要代谢物为M1,并具活性[8]。从色谱图中可见,DZ的极性比M1大,所以色谱层析中先出M1峰,后出DZ峰(在非极性层析系统中)。有资料报道,DZ的消除方式除了肾小球滤过外,还存在着肾小管分泌的缘故[8]。因此,本文为临床研究DZ和M1的药效关系提供了一定的参考价值,也为进一步研究药动和药效的结合模型奠定了基础。
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参考文献
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3 肖大伟,侯艳宁,谢晓禅等.地尔硫在人体的生物利用度.中国医药工业杂志,1991,22(4):159
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5 Montamat SC,Abernethy DR,Mitchell JR.HPLC determination of diltiazem and its major metabolites N-mo-nodemethyldiltiazem and desacetyldiltiazem in plasma. J Chromatodr 1987,415:203
6 Dube LM,Mousseau N,Mcgilveray IJ.HPLC determination of diltiazem and four of its metabolites in plasma:evaluation of their stability.J Chromatogr 1988,430:103
7 Hutt V,Janik F,Kappler,et al.Evaluation of pharmacokinetics bioavailability and dose linearity of diltiazem in heathy volunteers.Arzneim Fotsch/Drug Res.1993,43(11):737
8 Boyd RA,Chin SK,Don-Pedro O,et al.The pharmacokinetics and pharmacodynamics of diltiazem and its metabolites in healthy adults after a single oral dose.Clin pharmaco Ther,1989,46:408
(1997年1月14日收稿), 百拇医药