猪脾转移因子口服液的工艺改进
作者：邓夕军 黄显泰 李俊山 程远瑞 徐 苓
单位：邓夕军 黄显泰 李俊山 程远瑞 徐 苓(北京 100091 解放军309医院)
关键词：
980333 转移因子(TF)是一种细胞免疫调节剂和增强剂。本院自制的“309扶正口服液”[制剂文号(1994)军制FM39001]，即猪脾转移因子口服液，治疗面部扁平疣128例，4周为一疗程，总有效率89%[1]；作为癌症化疗辅助剂观察150例，患者免疫指标有所增加，化疗后白细胞回升快，在其它各科也有报告。本文仅对近年来的工艺改进作一报道。
1 处方、试剂及主要设备、仪器
处方：转移因子(按多肽计)3.5g,甜菊甙6.5g,生理盐水加至10000ml。
, http://www.100md.com
试剂：注射用枸橼酸(广州第三制药厂)。
设备：DS-1高速组织捣碎机(上海标本模型厂)，TJ12-A型绞肉机(广东番禺市恒联食品机械厂),GL-20B高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂),中空纤维超滤器(北京宣武超滤设备厂)。
仪器：HP8452A紫外分光光度计。
2 工艺改进
取新鲜健康猪脾约10kg,洗净、去除非脾组织，剪成小段、绞碎，低温冰箱(-20℃±)冻融后绞碎，称重后加入适量灭菌生理盐水(1∶2),置组织捣碎机中15000r/min,3～5min,捣碎,匀浆液冻融后分别以下列方法处理:A法:装透析袋,4℃透析24h以上,透析液以G3玻璃垂熔漏斗抽滤得滤液。B法：装瓶,-5℃,10000r/15min,乳浊液,50KD超滤约6h,10KD超滤得滤液。C法：0.1%枸橼酸混匀,如B法离心8min，澄清液,50KD超滤约3h,10KD超滤得滤液。取以上3种方法处理的滤液，依法[2]测定多肽含量后按处方配制，灌装，冷冻 保存备用。
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以上C法为改进工艺。
3 小 结
3.1 文献报道，TF的活性成份主要是分子量在1万以下,非蛋白的多肽或多核苷酸类物质[3]。A法即透析法，所取为透析外液，含多肽类物质，但工艺较繁琐，每批量需装透析袋数十根，耗工、耗时、费材料，而且按此工艺达不到除菌目的，卫生学检查往往超标。超滤(Ultrafiltration,UF)是指分子水平的过滤,随着新材料的出现,该项技术发展很快,应用较广,有代替传统分离技术之势。本院自1994年开始采用超滤法制备TF,终端所用10KD超滤柱,即能截留1万以上的大分子物质,正常操作所得超滤液,完全符合质量要求。
3.2 现用超滤柱为聚砜中空纤维柱(50×500mm),适用于实验室及小批量生产,一般都要求对原液进行预处理。由于匀浆液十分粘稠(比重在1.4左右),常规过滤难以奏效,直接进超滤柱也会引起阻塞;采用高速离心,所得乳浊液进柱,为本文中B法,是离心与超滤的综合应用。
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3.3 枸橼酸在药剂上常用作为矫味剂,其钠盐-枸橼酸钠常作为絮凝剂及反絮凝剂,本法所加枸橼酸起澄清剂作用[4];加入实验量(1∶1000),离心时间缩短一半,可得到澄清液,有利于超滤。用紫外分光光度法检测，枸橼酸单样、缺样与加样试验对比，250nm处对被测成份无干扰,不影响成品的含量测定，C法与B法相比，多肽得率无显著差异。本文中C法为澄清剂-离心法-超滤法在药剂分离、精制中的综合应用，可明显提高工效。
3.4 文献报道，口服牛转移因子(OTF),治疗高IgE综合症[5]；羊脾转移因子含片，口服治疗小儿反复呼吸道感染[6]，本院用猪脾转移因子口服液治疗扁平疣有效[1]；研究者认为，服用动物的转移因子可能更安全，并为大量制备转移因子增加了材料来源[7]。本品系非特异性转移因子，未经进一步分离纯化，对其化学结构特性及其“转移”作用机理，有待进一步探讨。
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参考文献
1 邓夕军，杨晔.猪脾转移因子口服液治疗扁平疣.医药导报，1996，15(3)∶119.
2 郭代红，林少霞，王显泰.紫外分光光度法测定转移因子透析液中多肽含量.中国药学杂志，1994，29(7)∶424.
3 霍保来主编.转移因子与临床应用.北京:学术期刊出版社，1988∶32.
4 南京药学院药剂学教研组编著.药剂学(第2版).北京：人民卫生出版社，1985∶195.
5 霍保来主编.转移因子与临床应用.北京:学术期刊出版社，1988∶151.
6 张瑞凤，冯天佐，张燕.转移因子含片治疗小儿反复呼吸道感染52例疗效观察.临床儿科杂志，1996，14(5)∶330.
7 马尔瞻.转移因子的作用机理及用药途径.中国免疫学杂志，1987，3(3)∶73.
收稿日期：1997-08-03, 百拇医药
单位：邓夕军 黄显泰 李俊山 程远瑞 徐 苓(北京 100091 解放军309医院)
关键词：
980333 转移因子(TF)是一种细胞免疫调节剂和增强剂。本院自制的“309扶正口服液”[制剂文号(1994)军制FM39001]，即猪脾转移因子口服液，治疗面部扁平疣128例，4周为一疗程，总有效率89%[1]；作为癌症化疗辅助剂观察150例，患者免疫指标有所增加，化疗后白细胞回升快，在其它各科也有报告。本文仅对近年来的工艺改进作一报道。
1 处方、试剂及主要设备、仪器
处方：转移因子(按多肽计)3.5g,甜菊甙6.5g,生理盐水加至10000ml。
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试剂：注射用枸橼酸(广州第三制药厂)。
设备：DS-1高速组织捣碎机(上海标本模型厂)，TJ12-A型绞肉机(广东番禺市恒联食品机械厂),GL-20B高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂),中空纤维超滤器(北京宣武超滤设备厂)。
仪器：HP8452A紫外分光光度计。
2 工艺改进
取新鲜健康猪脾约10kg,洗净、去除非脾组织，剪成小段、绞碎，低温冰箱(-20℃±)冻融后绞碎，称重后加入适量灭菌生理盐水(1∶2),置组织捣碎机中15000r/min,3～5min,捣碎,匀浆液冻融后分别以下列方法处理:A法:装透析袋,4℃透析24h以上,透析液以G3玻璃垂熔漏斗抽滤得滤液。B法：装瓶,-5℃,10000r/15min,乳浊液,50KD超滤约6h,10KD超滤得滤液。C法：0.1%枸橼酸混匀,如B法离心8min，澄清液,50KD超滤约3h,10KD超滤得滤液。取以上3种方法处理的滤液，依法[2]测定多肽含量后按处方配制，灌装，冷冻 保存备用。
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以上C法为改进工艺。
3 小 结
3.1 文献报道，TF的活性成份主要是分子量在1万以下,非蛋白的多肽或多核苷酸类物质[3]。A法即透析法，所取为透析外液，含多肽类物质，但工艺较繁琐，每批量需装透析袋数十根，耗工、耗时、费材料，而且按此工艺达不到除菌目的，卫生学检查往往超标。超滤(Ultrafiltration,UF)是指分子水平的过滤,随着新材料的出现,该项技术发展很快,应用较广,有代替传统分离技术之势。本院自1994年开始采用超滤法制备TF,终端所用10KD超滤柱,即能截留1万以上的大分子物质,正常操作所得超滤液,完全符合质量要求。
3.2 现用超滤柱为聚砜中空纤维柱(50×500mm),适用于实验室及小批量生产,一般都要求对原液进行预处理。由于匀浆液十分粘稠(比重在1.4左右),常规过滤难以奏效,直接进超滤柱也会引起阻塞;采用高速离心,所得乳浊液进柱,为本文中B法,是离心与超滤的综合应用。
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3.3 枸橼酸在药剂上常用作为矫味剂,其钠盐-枸橼酸钠常作为絮凝剂及反絮凝剂,本法所加枸橼酸起澄清剂作用[4];加入实验量(1∶1000),离心时间缩短一半,可得到澄清液,有利于超滤。用紫外分光光度法检测，枸橼酸单样、缺样与加样试验对比，250nm处对被测成份无干扰,不影响成品的含量测定，C法与B法相比，多肽得率无显著差异。本文中C法为澄清剂-离心法-超滤法在药剂分离、精制中的综合应用，可明显提高工效。
3.4 文献报道，口服牛转移因子(OTF),治疗高IgE综合症[5]；羊脾转移因子含片，口服治疗小儿反复呼吸道感染[6]，本院用猪脾转移因子口服液治疗扁平疣有效[1]；研究者认为，服用动物的转移因子可能更安全，并为大量制备转移因子增加了材料来源[7]。本品系非特异性转移因子，未经进一步分离纯化，对其化学结构特性及其“转移”作用机理，有待进一步探讨。
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参考文献
1 邓夕军，杨晔.猪脾转移因子口服液治疗扁平疣.医药导报，1996，15(3)∶119.
2 郭代红，林少霞，王显泰.紫外分光光度法测定转移因子透析液中多肽含量.中国药学杂志，1994，29(7)∶424.
3 霍保来主编.转移因子与临床应用.北京:学术期刊出版社，1988∶32.
4 南京药学院药剂学教研组编著.药剂学(第2版).北京：人民卫生出版社，1985∶195.
5 霍保来主编.转移因子与临床应用.北京:学术期刊出版社，1988∶151.
6 张瑞凤，冯天佐，张燕.转移因子含片治疗小儿反复呼吸道感染52例疗效观察.临床儿科杂志，1996，14(5)∶330.
7 马尔瞻.转移因子的作用机理及用药途径.中国免疫学杂志，1987，3(3)∶73.
收稿日期：1997-08-03, 百拇医药