木贼提取物对小鼠脑心肺过氧化脂质产生的影响
作者：徐朝峰 孙丽云
单位：徐朝峰 (锦州 121001 锦州医学院药理教研室；孙丽云 锦州 121001 锦州医学院附属第一医院儿科)
关键词：木贼；脂质过氧化；心；肺；脑
980303摘要 木贼水醇提取物对小鼠过氧化脂质的产生有明显抑制作用。该提取物能减少体外与体内实验小鼠脑、心、肺匀浆中MDA含量，并随剂量的增加作用增强。提示木贼水醇提取物可能具有抗衰老作用。
The effect of extract form Equisetum Hyemale on
forming of Mouse' brain heart and lung lipid peroxide
Xu Chaofeng
, http://www.100md.com
(Xu CF),Sun Liyun(Sun LY)
(Dep of Pharmacology,Jinzhou Medical College,Jinzhou 121001)
ABSTRACT The results of the present study indicate that the extract from Equisetum Hyemale by water and alcohol has obvious inhibiting effects on Forming of lipid peroxides in mice.In vitro and in vivo,Equisetum Hyemale extract can reduce the malondialdehyde contents of brain,heart and lung homogenate,and the effect increases with its dosage.The experimental results suggest that the extract may have an antiaging effect,which may provide this drug with new clue to its application.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Equisetum Hyemale ,lipid peroxide,brain,heart,lung
木贼系木贼属植物木贼(Equisetum Hyemale L)的干燥全草，有解肌、发汗、退翳、益肝胆、消积块、治目疾、迎风流泪、喉痹等。含问荆碱、二甲矾、阿魏酸、胸腺嘧啶、香荚兰醛等[1，2]。我们曾观察到其有阻止实验性高脂血症大白鼠TC、TG增高的作用[3]，本文报道木贼对小鼠脑心、肺过氧化脂质产生的影响。
1 材 料
试剂：四乙氧基丙烷(Sigma产品)；冰乙酸分析纯(大连无机化工厂)；三氯醋酸分析纯(天津市化学试剂批发部监制)；硫代巴比妥酸(上海试剂二厂)。
药品：木贼(锦州市医药批发站，经锦州市品检验所任绍俭鉴定)。制成水醇提取液，过滤，高压灭菌置冰箱备用。复方丹参注射液(含丹参、降香，江苏东台制药厂)。
, http://www.100md.com
动物：体外抗氧化实验昆明种小白鼠10只，25～27g;体内抗氧化实验昆明种小白鼠24只，34～36g,♀♂兼用(本院实验动物中心)。
2 方法与结果
2.1 木贼提取物对小鼠脑心肺匀浆(体外实验)脂质过氧化物(LPO)生成的影响
方法：参照文献[4]，将小鼠脱颈椎处死，迅速剖取其脑、心、肺，用4℃生理盐水冲洗干净，用滤纸吸去多余的水分，准确称重，用生理盐水制成4%肺匀浆、3%脑匀浆、1.5%心匀浆。每组11支试管，每管加组织匀浆1.5ml，分别加入各浓度被测药物0.1ml,对照组每管加0.1ml生理盐水。每组取1支试管先加入20%三氯醋酸1.5ml(为调零管)。震荡温育(37±0.5℃)1.5h,使其充分氧化。恒温后每管加入20%三氯醋酸1.5ml(每组已加入的一管不再加)，以中止氧化。2000r/min离心10min,取出上清液1.5ml加入0.69%的硫代巴比妥酸0.5ml，沸水浴10min,取出迅速冷却(过氧化的脂质分解所产生的丙二醛MDA在酸性条件下能与2分子硫代巴比妥酸TBA缩合成红色物质，此物质在535nm吸收峰最高，用分光光度计比色测定之)，在721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)535nm波长比色测定，以四乙氧基丙烷为标准物，计算每克湿组织过氧化脂质生成量，即LPO的二级分解产物丙二醛(MDA)的含量。
, 百拇医药
2.2 结果
2.2.1 木贼提取物对小鼠脑匀浆LPO生成的抑制作用，见表1。
表1 木贼提取物对小鼠脑匀浆LPO的影响(体外实验)(n=10,±s) 组 别
剂量(mg/ml)
MDA(nmol/g，组织)
抑制率(%)
对照组
-
52.81±2.25
-
复方丹参组
, 百拇医药
2.8
3.37±0.77
93.62
木贼高剂量组
5.6
12.04±0.60
76.92
木贼低剂量组
2.8
14.32±1.04
72.88
注：木贼高、低剂量组及与对照组比较差异非常显著(P<0.01)
, 百拇医药
2.2.2 木贼提取物对小鼠心匀浆LPO生成的抑制作用，见表2。
表2 木贼提取物对小鼠心匀浆LPO的影响(体外实验)(n=10,±s) 组 别
剂量(mg/10ml)
MDA(nmol/g，组织)
抑制率(%)
对照组
-
108.76±1.24
-
复方丹参组
2.8
, 百拇医药
11.00±0.76
89.89
木贼高剂量组
5.6
30.33±0.51
72.11
木贼低剂量组
2.8
32.83±1.07
69.81
注：木贼高、低剂量组及与对照组比较差异非常显著(P<0.01)
2.2.3 木贼提取物对小鼠肺匀浆LPO生成的抑制作用，见表3。
, http://www.100md.com
表3 木贼提取物对小鼠肺匀浆LPO的影响(体外实验)(n=10,±s) 组 别
剂量(mg/ml)
MDA(nmol/g，组织)
抑制率(%)
对照组
-
61.33±0.41
-
复方丹参组
2.8
6.84±0.23
88.77
, 百拇医药
木贼高剂量组
5.6
5.40±0.58
91.15
木贼中剂量组
2.8
14.13±0.74
76.42
木贼低剂量组
1.4
42.44±0.58
30.80
, http://www.100md.com 注：木贼各剂量组及与对照组比较差异非常显著(P<0.01)
2.3 木贼提取物对小鼠脑心肺匀浆(整体实验)脂质过氧化物LPO生成的影响
方法：昆明种小白鼠24只(34～36g),♀♂各半，随机分为3组。对照组按8ml/kg蒸馏水灌胃，高剂量组木贼按8g/kg灌胃，木贼低剂量组按4g/kg灌胃，每日一次，灌胃10d。末次给药1.5h后，将动物脱颈椎处死，迅速取出其脑、心、肺制成匀浆，依次加入各种反应试剂(不再震荡温育1.5h),参照上述离体实验方法测定脑、心、肺匀浆MDA值。结果见表4～6。
表4 木贼提取物对小鼠脑匀浆LPO的影响(n=8) 组 别
剂量(mg/g)
MDA(nmol/g)
, 百拇医药 抑制率(%)
对照组
-
28.35±4.61
-
木贼高剂量组
8
10.21±2.23
63.99
木贼低剂量组
4
16.35±2.51
42.33
, http://www.100md.com
注：木贼高低剂量组及与对照组比较差异非常显著(P<0.01)，下表同
表5 木贼提取物对在体小鼠心匀浆LPO的影响(n=8) 组 别
剂量(mg/g)
MDA(nmol/g)
抑制率(%)
对照组
-
45.21±5.12
-
木贼高剂量组
8
, 百拇医药
28.52±4.13
36.92
木贼低剂量组
4
35.33±4.87
21.19
表4 木贼提取物对在体小鼠肺匀浆LPO的影响(n=10) 组 别
剂量(mg/ml)
MDA(nmol/g)
抑制率(%)
对照组
-
, 百拇医药
32.76±5.13
-
木贼高剂量组
8
8.93±1.56
72.74
木贼低剂量组
4
20.35±3.18
37.89
3 讨 论
本文实验是分为动物体外与体内两部分进行的。动物体外抗氧化实验方法简单可行，初步考察木贼对小鼠脑心肺是否有抗LPO生成的影响。体外抗氧化作用实验，作为筛选有效的延年益寿药也具有一定的参考价值[5]。在此基础上，又进行动物体内抗氧化作用实验，2种实验结果均表明，木贼水醇提取物能明显对抗小鼠脑、心、肺过氧化脂质的产生，降低其匀浆中LPO水平，其作用强度随药物浓度增加而加强，与阳性对照组复方丹参有相似的抗氧化作用。从实验结果看，木贼提取物对3种脏器匀浆过氧化脂质产生的抑制作用由强至弱依次为肺、脑、心，对肺匀浆过氧化脂质产生的抑制作用明显强于脑和心的作用。过氧化脂质是引起衰老及产生各种疾病最基本的原因之一[6]，近年有研究认为脂质过氧化损伤与动脉粥样硬化有关[7]，我们已观察到木贼有抗实验动物高血脂作用[3]，本实验结果表明的抗LPO作用提示木贼可能具有抗衰老作用，其机理有待进一步探讨。
, 百拇医药
参考文献
1 江苏新医学院.中药大辞典.上海：上海人民出版社，1977∶356.
2 《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编.北京：人民卫生出版社，1976∶175.
3 徐朝峰，边学义，曲淑梅，等.木贼对大白鼠实验性高脂血症的影响及急性毒性实验研究.中国中药杂志，1993，18(1)∶52.
4 许实波，唐孝礼，林永成.姜黄素的抗氧化作用.中草药，1991，22(6)∶264.
5 郭月英，邹莉菠，于床海.补益强壮药抗衰老作用的研究.中成药研究，1987，6∶21.
6 刘时中.自由基与衰老.生理科学进展，1983，14(2)∶147.
7 娄宁，周玫，陈瑗.云芝多糖对小鼠肝、脾、肾和红细胞抗氧化能力的影响.中国药理学通报，1996，12(5)∶425.
收稿日期：1997-05-15, http://www.100md.com
单位：徐朝峰 (锦州 121001 锦州医学院药理教研室；孙丽云 锦州 121001 锦州医学院附属第一医院儿科)
关键词：木贼；脂质过氧化；心；肺；脑
980303摘要 木贼水醇提取物对小鼠过氧化脂质的产生有明显抑制作用。该提取物能减少体外与体内实验小鼠脑、心、肺匀浆中MDA含量，并随剂量的增加作用增强。提示木贼水醇提取物可能具有抗衰老作用。
The effect of extract form Equisetum Hyemale on
forming of Mouse' brain heart and lung lipid peroxide
Xu Chaofeng
, http://www.100md.com
(Xu CF),Sun Liyun(Sun LY)
(Dep of Pharmacology,Jinzhou Medical College,Jinzhou 121001)
ABSTRACT The results of the present study indicate that the extract from Equisetum Hyemale by water and alcohol has obvious inhibiting effects on Forming of lipid peroxides in mice.In vitro and in vivo,Equisetum Hyemale extract can reduce the malondialdehyde contents of brain,heart and lung homogenate,and the effect increases with its dosage.The experimental results suggest that the extract may have an antiaging effect,which may provide this drug with new clue to its application.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Equisetum Hyemale ,lipid peroxide,brain,heart,lung
木贼系木贼属植物木贼(Equisetum Hyemale L)的干燥全草，有解肌、发汗、退翳、益肝胆、消积块、治目疾、迎风流泪、喉痹等。含问荆碱、二甲矾、阿魏酸、胸腺嘧啶、香荚兰醛等[1，2]。我们曾观察到其有阻止实验性高脂血症大白鼠TC、TG增高的作用[3]，本文报道木贼对小鼠脑心、肺过氧化脂质产生的影响。
1 材 料
试剂：四乙氧基丙烷(Sigma产品)；冰乙酸分析纯(大连无机化工厂)；三氯醋酸分析纯(天津市化学试剂批发部监制)；硫代巴比妥酸(上海试剂二厂)。
药品：木贼(锦州市医药批发站，经锦州市品检验所任绍俭鉴定)。制成水醇提取液，过滤，高压灭菌置冰箱备用。复方丹参注射液(含丹参、降香，江苏东台制药厂)。
, http://www.100md.com
动物：体外抗氧化实验昆明种小白鼠10只，25～27g;体内抗氧化实验昆明种小白鼠24只，34～36g,♀♂兼用(本院实验动物中心)。
2 方法与结果
2.1 木贼提取物对小鼠脑心肺匀浆(体外实验)脂质过氧化物(LPO)生成的影响
方法：参照文献[4]，将小鼠脱颈椎处死，迅速剖取其脑、心、肺，用4℃生理盐水冲洗干净，用滤纸吸去多余的水分，准确称重，用生理盐水制成4%肺匀浆、3%脑匀浆、1.5%心匀浆。每组11支试管，每管加组织匀浆1.5ml，分别加入各浓度被测药物0.1ml,对照组每管加0.1ml生理盐水。每组取1支试管先加入20%三氯醋酸1.5ml(为调零管)。震荡温育(37±0.5℃)1.5h,使其充分氧化。恒温后每管加入20%三氯醋酸1.5ml(每组已加入的一管不再加)，以中止氧化。2000r/min离心10min,取出上清液1.5ml加入0.69%的硫代巴比妥酸0.5ml，沸水浴10min,取出迅速冷却(过氧化的脂质分解所产生的丙二醛MDA在酸性条件下能与2分子硫代巴比妥酸TBA缩合成红色物质，此物质在535nm吸收峰最高，用分光光度计比色测定之)，在721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)535nm波长比色测定，以四乙氧基丙烷为标准物，计算每克湿组织过氧化脂质生成量，即LPO的二级分解产物丙二醛(MDA)的含量。
, 百拇医药
2.2 结果
2.2.1 木贼提取物对小鼠脑匀浆LPO生成的抑制作用，见表1。
表1 木贼提取物对小鼠脑匀浆LPO的影响(体外实验)(n=10,±s) 组 别
剂量(mg/ml)
MDA(nmol/g，组织)
抑制率(%)
对照组
-
52.81±2.25
-
复方丹参组
, 百拇医药
2.8
3.37±0.77
93.62
木贼高剂量组
5.6
12.04±0.60
76.92
木贼低剂量组
2.8
14.32±1.04
72.88
注：木贼高、低剂量组及与对照组比较差异非常显著(P<0.01)
, 百拇医药
2.2.2 木贼提取物对小鼠心匀浆LPO生成的抑制作用，见表2。
表2 木贼提取物对小鼠心匀浆LPO的影响(体外实验)(n=10,±s) 组 别
剂量(mg/10ml)
MDA(nmol/g，组织)
抑制率(%)
对照组
-
108.76±1.24
-
复方丹参组
2.8
, 百拇医药
11.00±0.76
89.89
木贼高剂量组
5.6
30.33±0.51
72.11
木贼低剂量组
2.8
32.83±1.07
69.81
注：木贼高、低剂量组及与对照组比较差异非常显著(P<0.01)
2.2.3 木贼提取物对小鼠肺匀浆LPO生成的抑制作用，见表3。
, http://www.100md.com
表3 木贼提取物对小鼠肺匀浆LPO的影响(体外实验)(n=10,±s) 组 别
剂量(mg/ml)
MDA(nmol/g，组织)
抑制率(%)
对照组
-
61.33±0.41
-
复方丹参组
2.8
6.84±0.23
88.77
, 百拇医药
木贼高剂量组
5.6
5.40±0.58
91.15
木贼中剂量组
2.8
14.13±0.74
76.42
木贼低剂量组
1.4
42.44±0.58
30.80
, http://www.100md.com 注：木贼各剂量组及与对照组比较差异非常显著(P<0.01)
2.3 木贼提取物对小鼠脑心肺匀浆(整体实验)脂质过氧化物LPO生成的影响
方法：昆明种小白鼠24只(34～36g),♀♂各半，随机分为3组。对照组按8ml/kg蒸馏水灌胃，高剂量组木贼按8g/kg灌胃，木贼低剂量组按4g/kg灌胃，每日一次，灌胃10d。末次给药1.5h后，将动物脱颈椎处死，迅速取出其脑、心、肺制成匀浆，依次加入各种反应试剂(不再震荡温育1.5h),参照上述离体实验方法测定脑、心、肺匀浆MDA值。结果见表4～6。
表4 木贼提取物对小鼠脑匀浆LPO的影响(n=8) 组 别
剂量(mg/g)
MDA(nmol/g)
, 百拇医药 抑制率(%)
对照组
-
28.35±4.61
-
木贼高剂量组
8
10.21±2.23
63.99
木贼低剂量组
4
16.35±2.51
42.33
, http://www.100md.com
注：木贼高低剂量组及与对照组比较差异非常显著(P<0.01)，下表同
表5 木贼提取物对在体小鼠心匀浆LPO的影响(n=8) 组 别
剂量(mg/g)
MDA(nmol/g)
抑制率(%)
对照组
-
45.21±5.12
-
木贼高剂量组
8
, 百拇医药
28.52±4.13
36.92
木贼低剂量组
4
35.33±4.87
21.19
表4 木贼提取物对在体小鼠肺匀浆LPO的影响(n=10) 组 别
剂量(mg/ml)
MDA(nmol/g)
抑制率(%)
对照组
-
, 百拇医药
32.76±5.13
-
木贼高剂量组
8
8.93±1.56
72.74
木贼低剂量组
4
20.35±3.18
37.89
3 讨 论
本文实验是分为动物体外与体内两部分进行的。动物体外抗氧化实验方法简单可行，初步考察木贼对小鼠脑心肺是否有抗LPO生成的影响。体外抗氧化作用实验，作为筛选有效的延年益寿药也具有一定的参考价值[5]。在此基础上，又进行动物体内抗氧化作用实验，2种实验结果均表明，木贼水醇提取物能明显对抗小鼠脑、心、肺过氧化脂质的产生，降低其匀浆中LPO水平，其作用强度随药物浓度增加而加强，与阳性对照组复方丹参有相似的抗氧化作用。从实验结果看，木贼提取物对3种脏器匀浆过氧化脂质产生的抑制作用由强至弱依次为肺、脑、心，对肺匀浆过氧化脂质产生的抑制作用明显强于脑和心的作用。过氧化脂质是引起衰老及产生各种疾病最基本的原因之一[6]，近年有研究认为脂质过氧化损伤与动脉粥样硬化有关[7]，我们已观察到木贼有抗实验动物高血脂作用[3]，本实验结果表明的抗LPO作用提示木贼可能具有抗衰老作用，其机理有待进一步探讨。
, 百拇医药
参考文献
1 江苏新医学院.中药大辞典.上海：上海人民出版社，1977∶356.
2 《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编.北京：人民卫生出版社，1976∶175.
3 徐朝峰，边学义，曲淑梅，等.木贼对大白鼠实验性高脂血症的影响及急性毒性实验研究.中国中药杂志，1993，18(1)∶52.
4 许实波，唐孝礼，林永成.姜黄素的抗氧化作用.中草药，1991，22(6)∶264.
5 郭月英，邹莉菠，于床海.补益强壮药抗衰老作用的研究.中成药研究，1987，6∶21.
6 刘时中.自由基与衰老.生理科学进展，1983，14(2)∶147.
7 娄宁，周玫，陈瑗.云芝多糖对小鼠肝、脾、肾和红细胞抗氧化能力的影响.中国药理学通报，1996，12(5)∶425.
收稿日期：1997-05-15, http://www.100md.com