离子选择电极法测定三黄片中盐酸小檗碱的含量
作者：张素梅 张晓燕 车 轩 李耀维
单位：张素梅 车 轩 (太谷 030800 山东太谷县人民医院；；张晓燕 交城 030500 山西交城县药品检验所；李耀维 太谷 030801 山西农业大学基础部)
关键词：三黄片；盐酸小檗碱；离子选择电极
980322摘要 以小檗碱溴汞酸盐为电活性物制备PVC膜离子选择电极，用以测定三黄片中盐酸小檗碱的含量。电极的线性范围1.0×10-3～5.0×10-7mol/L,级差56mV/pC,检测下限2.3×10-7mol/L,平均加样回收率100.3%,RSD0.75%。
Determination of berberine hydrochloride in
, 百拇医药
sanhuan tablets by selective electrode method
Zhang Sumei(Zhang SM),Zhang Xiaoyan
(Zhang XY),Che Xuan(Che X),et al(Shanxi taigu Pepole's Hospital,Taiguo 030801)
ABSTRACT A PVC membrane ion-selective electrode of berberine hydrochloride was prepared.The electrode could be used to determine berberine hydrochloride in Sanhuang tablets.The electrode showed nerast response with a slope of 56 mV/pC over the concentration range of 1.0×10-3～5.0×10-7mol/L.The minimal detection limit was 2.3×10-7mol/L.The average recovery was 100.3% with a RSD of 0.75%.
, 百拇医药
KEY WORDS Sanhuang tablets,berberine hydrochloride,Ion-selective electrode
三黄片是临床常用清热泻火药，盐酸小檗碱是三黄片中主要成分之一，其含量测定，地方标准[1]未作规定，文献报道可用薄层扫描法[2]、脉冲极谱法[3]、分光光度法[4]、示波滴定法[5]等。有关离子选择电极法用于三黄片的定量研究，尚未见报道。本文以小檗碱溴汞酸盐为电活性物制备聚氯乙稀(PVC)膜离子选择电极，并用以测定三黄片中盐酸小檗碱的含量。
1 材料与方法
1.1 仪器与药品
PXJ-B型数字式离子计(江苏电分析仪器厂)：UJ-31型直流电位差计(上海电表厂)；盐酸小檗碱化学对照品(中国药品生物制品检定所)；三黄片(市售)；PVC粉(工业品)。所用试剂均为分析纯。
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1.2 盐酸小檗碱标准溶液的配制
准确称取105℃干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品0.2039g,置50ml量瓶中，加0.01mol/L的KCl(pH6.5)溶液适量，加热使盐酸小檗碱溶解，冷至室温，加相同溶液至刻度，摇匀得0.01mol/L的标准溶液。再用0.01mol/L KCl溶液稀释得1.0×10-3～1.0×10-7mol/L的标准溶液。
1.3 电极的制备
1.3.1 电活性物的制备：称取HgBr2 0.22g于烧杯中，用0.01mol/L的KBr溶液100ml溶解。称取盐酸小檗碱0.20g于烧杯中，加水150ml,加热使溶解，在搅拌状态下缓慢加入上述HgBr2-KBr溶液，静置2h,用4号砂芯漏斗抽滤，并用去离子水洗涤6～8次，于50℃烘干得小檗碱溴汞酸盐电活性物。
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1.3.2 电极的制备：将包有PVC套管的石墨电极一端磨平。称取上述电活性物10mg,加入邻苯二甲酸二丁酯0.4ml,PVC粉200mg,四氢呋喃5ml,混匀，取适量涂在磨平的石墨电极一端，涂3～4次(使成膜厚度约1mm)，自然干燥48h。
1.4 测试方法
使用前将电极在1.0×10-3mol/L的盐酸小檗碱溶液中活化1h,用去离子水洗3～4次至电位稳定，与饱和甘汞电极组成如下电池
PVC膜选择电极｜供试液｜SCE
在恒温恒速搅拌下读取稳定的电势值。
2 结果与讨论
2.1 电极的响应曲线和响应时间
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依法配制系列浓度的盐酸小檗碱标准溶液，测定电极的响应曲线，结果表明，电极的线性范围为1.0×10-3～5.0×10-7mol/L,线性相关系数r=0.9998,级差56mV/pC,检出限2.3×10-7mol/L,响应时间<30s。
2.2 pH值对电极电位的影响
用HCl将10-4和10-5mol/L的盐酸小檗碱标准溶液的pH值调至3，然后用NaOH逐步调节pH值，同时记录相应电势值，结果在pH5～9的范围内，电极电位的变化<0.3mV。
2.3 电极的稳定性，重现性和使用寿命
室温下将电极连续置于10-4mol/L的盐酸小檗碱溶液中4h,结果电位漂移<0.5mV。将电极在10-4,10-5和10-6mol/L的盐酸小檗碱溶液中交叉测定，结果电位值的RSD分别为0.10%,0.17%和0.14%(n=5)。电极使用后立即用清水冲洗干净，低温避光保存，膜的使用寿命可达150d左右。
, 百拇医药
2.4 电极的内阻
用并联电阻法[6]测定8支电极的内阻，阻值范围1.5～1.8MΩ,平均阻值1.6MΩ。
2.5 电极的选择性
按照处方[1]比例制备不含盐酸小檗碱的三黄片阴性物溶液(1.0×10-4mol/L),采用分别溶液法[7]测定电极对该溶液和另外10余种无机及有机物的选择性系数，结果(见表1)表明，结晶紫和盐酸巴马汀对测定存在严重干扰，三黄片中其它组分与辅料等其它物质基本无干扰。
表1 电极选择性系数测定结果(Ci=Cj=10-4mol/L) 干扰物
KPotij
, 百拇医药
干扰物
KPotij
盐酸麻黄碱
4.2×10-3
盐酸普鲁卡因
3.3×10-4
盐酸可卡因
3.5×10-3
盐酸巴马汀
0.25
氢溴酸东莨菪碱
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1.0×10-3
NaCl
1.8×10-5
盐酸乌头碱
2.8×10-2
NH4Cl
3.0×10-5
结晶紫
23
CaCl2
2.5×10-6
, 百拇医药
盐酸马钱子碱
1.5×10-3
三黄片阴性物
7.2×10-3
2.6 精密度与回收率实验
按照实验方法，在电极的线性范围内对同一样品平行处理5次，结果RSD为0.29%。在已知含量的样品中准确加入盐酸小檗碱适量，采用标准曲线法测定其含量，平均加样回收率为100.3%,RSD为0.75%(n=8)。
2.7 样品测定
取待测样品10片，精密称定，研细，准确称取适量(约相当于盐酸小檗碱2mg)置50ml量瓶中，加0.01mol/L的KCl溶液(pH6.5)适量，加热并振摇使盐酸小檗碱溶解，用上述KCl溶液稀释至刻度，摇匀，用标准曲线法测定盐酸小檗碱含量，测定结果与分光光度法[4]相符(表2)。可以看出，不同厂家的产品间差异较大。表2 样品测定结果(n=3) 样品
, 百拇医药
号
本 法
本 法
(标示量%)
RSD(%)
(标示量%)
RSD(%)
1
100.6
0.63
99.6
0.58
2
, 百拇医药
81.6
0.89
80.6
0.64
3
96.6
1.04
95.8
0.93
4
62.0
0.70
62.4
, http://www.100md.com
0.81
参考文献
1 山西省药品标准.1990∶17.
2 张如珍，徐成愈，胡永久.三黄片中黄连素的薄层扫描测定.中成药研究，1986，(11)∶10.
3 张秀琴，徐礼桑.三黄片中几种有效成份的脉冲极谱测定.药物分析杂志，1985，5(5)∶288.
4 张广治，梁生旺，张元伟.三波长分光光度法测定三黄片中盐酸小檗碱的含量.中成药研究，1988，(2)∶15.
5 张素梅，李耀维.交流示波极谱滴定法测定三黄片中盐酸小檗碱含量.中国中药杂志，1997，22(4)∶224..
6 俞汝勤.离子选择电极分析法.北京：人民教育出版社，1980∶26..
7 方惠群，史坚，倪君蒂.仪器分析原理.南京：南京大学出版社，1984∶28.
收稿日期：1997-08-20, 百拇医药
单位：张素梅 车 轩 (太谷 030800 山东太谷县人民医院；；张晓燕 交城 030500 山西交城县药品检验所；李耀维 太谷 030801 山西农业大学基础部)
关键词：三黄片；盐酸小檗碱；离子选择电极
980322摘要 以小檗碱溴汞酸盐为电活性物制备PVC膜离子选择电极，用以测定三黄片中盐酸小檗碱的含量。电极的线性范围1.0×10-3～5.0×10-7mol/L,级差56mV/pC,检测下限2.3×10-7mol/L,平均加样回收率100.3%,RSD0.75%。
Determination of berberine hydrochloride in
, 百拇医药
sanhuan tablets by selective electrode method
Zhang Sumei(Zhang SM),Zhang Xiaoyan
(Zhang XY),Che Xuan(Che X),et al(Shanxi taigu Pepole's Hospital,Taiguo 030801)
ABSTRACT A PVC membrane ion-selective electrode of berberine hydrochloride was prepared.The electrode could be used to determine berberine hydrochloride in Sanhuang tablets.The electrode showed nerast response with a slope of 56 mV/pC over the concentration range of 1.0×10-3～5.0×10-7mol/L.The minimal detection limit was 2.3×10-7mol/L.The average recovery was 100.3% with a RSD of 0.75%.
, 百拇医药
KEY WORDS Sanhuang tablets,berberine hydrochloride,Ion-selective electrode
三黄片是临床常用清热泻火药，盐酸小檗碱是三黄片中主要成分之一，其含量测定，地方标准[1]未作规定，文献报道可用薄层扫描法[2]、脉冲极谱法[3]、分光光度法[4]、示波滴定法[5]等。有关离子选择电极法用于三黄片的定量研究，尚未见报道。本文以小檗碱溴汞酸盐为电活性物制备聚氯乙稀(PVC)膜离子选择电极，并用以测定三黄片中盐酸小檗碱的含量。
1 材料与方法
1.1 仪器与药品
PXJ-B型数字式离子计(江苏电分析仪器厂)：UJ-31型直流电位差计(上海电表厂)；盐酸小檗碱化学对照品(中国药品生物制品检定所)；三黄片(市售)；PVC粉(工业品)。所用试剂均为分析纯。
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1.2 盐酸小檗碱标准溶液的配制
准确称取105℃干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品0.2039g,置50ml量瓶中，加0.01mol/L的KCl(pH6.5)溶液适量，加热使盐酸小檗碱溶解，冷至室温，加相同溶液至刻度，摇匀得0.01mol/L的标准溶液。再用0.01mol/L KCl溶液稀释得1.0×10-3～1.0×10-7mol/L的标准溶液。
1.3 电极的制备
1.3.1 电活性物的制备：称取HgBr2 0.22g于烧杯中，用0.01mol/L的KBr溶液100ml溶解。称取盐酸小檗碱0.20g于烧杯中，加水150ml,加热使溶解，在搅拌状态下缓慢加入上述HgBr2-KBr溶液，静置2h,用4号砂芯漏斗抽滤，并用去离子水洗涤6～8次，于50℃烘干得小檗碱溴汞酸盐电活性物。
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1.3.2 电极的制备：将包有PVC套管的石墨电极一端磨平。称取上述电活性物10mg,加入邻苯二甲酸二丁酯0.4ml,PVC粉200mg,四氢呋喃5ml,混匀，取适量涂在磨平的石墨电极一端，涂3～4次(使成膜厚度约1mm)，自然干燥48h。
1.4 测试方法
使用前将电极在1.0×10-3mol/L的盐酸小檗碱溶液中活化1h,用去离子水洗3～4次至电位稳定，与饱和甘汞电极组成如下电池
PVC膜选择电极｜供试液｜SCE
在恒温恒速搅拌下读取稳定的电势值。
2 结果与讨论
2.1 电极的响应曲线和响应时间
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依法配制系列浓度的盐酸小檗碱标准溶液，测定电极的响应曲线，结果表明，电极的线性范围为1.0×10-3～5.0×10-7mol/L,线性相关系数r=0.9998,级差56mV/pC,检出限2.3×10-7mol/L,响应时间<30s。
2.2 pH值对电极电位的影响
用HCl将10-4和10-5mol/L的盐酸小檗碱标准溶液的pH值调至3，然后用NaOH逐步调节pH值，同时记录相应电势值，结果在pH5～9的范围内，电极电位的变化<0.3mV。
2.3 电极的稳定性，重现性和使用寿命
室温下将电极连续置于10-4mol/L的盐酸小檗碱溶液中4h,结果电位漂移<0.5mV。将电极在10-4,10-5和10-6mol/L的盐酸小檗碱溶液中交叉测定，结果电位值的RSD分别为0.10%,0.17%和0.14%(n=5)。电极使用后立即用清水冲洗干净，低温避光保存，膜的使用寿命可达150d左右。
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2.4 电极的内阻
用并联电阻法[6]测定8支电极的内阻，阻值范围1.5～1.8MΩ,平均阻值1.6MΩ。
2.5 电极的选择性
按照处方[1]比例制备不含盐酸小檗碱的三黄片阴性物溶液(1.0×10-4mol/L),采用分别溶液法[7]测定电极对该溶液和另外10余种无机及有机物的选择性系数，结果(见表1)表明，结晶紫和盐酸巴马汀对测定存在严重干扰，三黄片中其它组分与辅料等其它物质基本无干扰。
表1 电极选择性系数测定结果(Ci=Cj=10-4mol/L) 干扰物
KPotij
, 百拇医药
干扰物
KPotij
盐酸麻黄碱
4.2×10-3
盐酸普鲁卡因
3.3×10-4
盐酸可卡因
3.5×10-3
盐酸巴马汀
0.25
氢溴酸东莨菪碱
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1.0×10-3
NaCl
1.8×10-5
盐酸乌头碱
2.8×10-2
NH4Cl
3.0×10-5
结晶紫
23
CaCl2
2.5×10-6
, 百拇医药
盐酸马钱子碱
1.5×10-3
三黄片阴性物
7.2×10-3
2.6 精密度与回收率实验
按照实验方法，在电极的线性范围内对同一样品平行处理5次，结果RSD为0.29%。在已知含量的样品中准确加入盐酸小檗碱适量，采用标准曲线法测定其含量，平均加样回收率为100.3%,RSD为0.75%(n=8)。
2.7 样品测定
取待测样品10片，精密称定，研细，准确称取适量(约相当于盐酸小檗碱2mg)置50ml量瓶中，加0.01mol/L的KCl溶液(pH6.5)适量，加热并振摇使盐酸小檗碱溶解，用上述KCl溶液稀释至刻度，摇匀，用标准曲线法测定盐酸小檗碱含量，测定结果与分光光度法[4]相符(表2)。可以看出，不同厂家的产品间差异较大。表2 样品测定结果(n=3) 样品
, 百拇医药
号
本 法
本 法
(标示量%)
RSD(%)
(标示量%)
RSD(%)
1
100.6
0.63
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81.6
0.89
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95.8
0.93
4
62.0
0.70
62.4
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0.81
参考文献
1 山西省药品标准.1990∶17.
2 张如珍，徐成愈，胡永久.三黄片中黄连素的薄层扫描测定.中成药研究，1986，(11)∶10.
3 张秀琴，徐礼桑.三黄片中几种有效成份的脉冲极谱测定.药物分析杂志，1985，5(5)∶288.
4 张广治，梁生旺，张元伟.三波长分光光度法测定三黄片中盐酸小檗碱的含量.中成药研究，1988，(2)∶15.
5 张素梅，李耀维.交流示波极谱滴定法测定三黄片中盐酸小檗碱含量.中国中药杂志，1997，22(4)∶224..
6 俞汝勤.离子选择电极分析法.北京：人民教育出版社，1980∶26..
7 方惠群，史坚，倪君蒂.仪器分析原理.南京：南京大学出版社，1984∶28.
收稿日期：1997-08-20, 百拇医药