青霉胺和硫酸锌对正常人外周血淋巴细胞SCE的影响
作者：张锋 苏爱 杜嗣廉 王修海
单位：青岛医学院生物学教研室(青岛266021)
关键词：青霉胺；硫酸锌；姐妹染色单体交换
青岛医学院学报990208 【摘要】 ①目的 探讨青霉胺和硫酸锌对正常人外周血淋巴细胞DNA的损伤程度。②方法 采用染色体分析技术，分别对对照组、青霉胺组(0.01μg/L)、硫酸锌组(0.02μg/L)和青霉胺+硫酸锌组(青霉胺0.01μg/L，硫酸锌0.02μg/L)体外培养的淋巴细胞姐妹染色单体交换(SCE)频率进行了观察。③结果 对照组、青霉胺组、硫酸锌组和青霉胺+硫酸锌组的SCE计数平均值分别为5.43±0.53,8.15±1.36,5.66±0.59和6.71±0.74,除对照组与硫酸锌组之间差异无显著性(t=1.264，P>0.05)外，其他各组之间差异均有极显著性(t=4.054～8.120，P<0.001)。④结论 硫酸锌对染色体稳定性无影响，青霉胺对DNA损伤有一定的作用。
, 百拇医药
中国图书馆分类法分类号R394.6
THE EFFECTS OF PENICILLAMINE AND Z INC SULPHATE
ON SCE IN HUMAN PERIPHERAL BLOOD LYMPHOCYTES
Zhang Feng, Su Ai, Du Silian, et al
Department of Biology, Qingdao Medical College, Q ingdao 266021
【ABSTRACT】 Objective To study the damaging effect of peni cillamine and zinc sulphate on DNA. Methods Chromosome analysis technique was used to study SCE freq uencies in culturing blood lymphocyte of control group, penicillamine group(pen icillamine 0.01μg/L), zinc sulphate group(zinc sulphate 0.02μg/L) and penicil lamine+zinc sulphate group(penicillamine 0.01μg/L zinc, sulphate 0.02μg/L) . Results The frequencies of SCE in control group, penicillamine gr oup, zinc sulphate group and penicillamine+zinc sulphate group were 5.43±0.53, 8.15±1.36,5.66±0.59 and 6.71±0.74 respectively. The frequencies of SCE betwee n control group and zinc sulphate group was not significantly different (t=1.2 64, P>0.05), while the frequencies of SCE between other groups were signific antly different(t=4.054-8.120, P<0.001). Conclusion Zinc sulphate had no damaging effect on DNA stability, penicillamine played certain role in DNA damage.
, 百拇医药
【KEY WORDS】 penicillamine; zinc sulphate; sister chromatid exchan ge
青霉胺和硫酸锌是治疗肝豆状核变性(Wilson病)的主要药物之一，在服药过程中，两种药物均可不同程度地引起多种副作用〔1，2〕。本文观察了两种药物对正常人外周血淋巴细胞姐妹染色单体交换(SCE)的影响，探讨两种药物对DNA损伤的程度，以期指导临床用药。
1 对象和方法
1.1 对象及分组
20例供血者均为健康志愿者，男11例，女9例；年龄20～24岁，平均21.6岁。无乙型肝炎、丙型肝炎病史，近期无化学致癌物、致突变剂及放射线接触史。每个供血者抽取肘静脉血4mL，分为4个组：不加任何药品的对照组，青霉胺组(青霉胺0.01μg/L)，硫酸锌组(硫酸锌0.02μg/L)和青霉胺+硫酸锌组(青霉胺0.01μg/L，硫酸锌0.02μg/L)。
, http://www.100md.com
1.2 实验方法
1.2.1 淋巴细胞培养与制片 外周血淋巴细胞按常规方法培养。培养至24h，加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)(10mg/L)，继续避光培养48h，制片前2h加入秋水仙素溶液(终浓度为0.2mg/L)。常规气干法制片。
1.2.2 分化染色和SCE计数采用夏家辉等〔3〕的方法行姐妹染色单体分化染色。选择BrdU掺入后第2细胞周期的中期分裂象，油镜下SCE计数。每例样本分析20个中期分裂象，计算每个细胞SCE计数平均值。
2 结果
对照组、青霉胺组、硫酸锌组及青霉胺并硫酸锌组SCE计数平均值分别为5.43±0.53,8.15±1.36,5.66±0.59,6.71±0.74.青霉胺组、青霉胺+硫酸锌组SCE计数较对照组升高，差异有极显著意义(t=6.130，8.120,P<0.001)；硫酸锌组SCE计数与对照组比较无明显差异(t=1.264,P>0.05)；青霉胺组SCE计数较硫酸锌组、青霉胺+硫酸锌组明显升高，差异有极显著性(t=4.045，7.320,P<0.001)；青霉胺+硫酸锌组与硫酸锌组比较差异亦有极显著性(t=4.836,P<0.001)。
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3 讨论
肝豆状核变性是一种可治疗的常染色体隐性遗传病，在几种治疗药物中，以青霉胺和硫酸锌使用最为普遍。这两种药物应用过程中都有一定的副作用，尤以青霉胺最为严重〔1，2,4〕。由于本病的治疗需要终生服药，服药是否能引起基因突变、SCE频率升高等遗传学效应，尚无定论，但目前还没有关于服用青霉胺产生遗传学效应的报道。SCE频率可以反映某一个体细胞DNA损伤与修复的情况，是遗传学不稳定性和早期染色体变化的灵敏指标〔5〕。
本实验采用小剂量青霉胺(0.01μg/L,约相当于10mg/kg体质量的治疗剂量)和大剂量硫酸锌(0.02μg/L，约相当于20mg/kg体质量的治疗用量)，对体外培养正常人外周血淋巴细胞SCE的影响进行观察。结果表明，硫酸锌对染色体稳定性并无影响；青霉胺可导致淋巴细胞DNA的损伤和染色体的不稳定；硫酸锌对青霉胺所致的淋巴细胞DNA的损伤可能有一定的保护作用。临床上使用硫酸锌除具有治疗作用外，对青霉胺造成的损伤是否也有保护作用尚需进一步研究。
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病人在怀孕期间服用青霉胺等驱铜药物，对孕妇和胎儿的影响是病人及医生十分关注的问题。文献报道，妊娠早期流产与怀孕前和孕期长期口服青霉胺有关〔6〕。本研究的结果从一个方面证实了青霉胺具有致畸作用。但由于缺乏直接的证据，青霉胺的致畸作用还需进一步探讨。
参考文献
1 杨任民，鲍远程，江停战，等.青霉胺副作用的探讨.新药与临床，1986,5(2):91
2 ScheinbergIH.Penicillamine in Wilsons disease. Lancet,1982,26( 1):1469
3 夏家辉，李麓云.姐妹染色体互换.生物科学动态,1978,(6):9
4 杜嗣廉，李博琴，林荣军，等.锌盐治疗19例肝豆状核变性的远期效果.中华儿科杂志,1991，29(5):270
5 Gebhert E，范耀山译.姐妹染色单体交换和结构染色体畸变在诱变检测中的作用.国外医学遗传学分册，1982,5(3):128
6 杨任民主编.肝豆状核变性.合肥：安徽科学技术出版社，1995.309
(1998-12-07收稿 1999-05-02修回), http://www.100md.com
单位：青岛医学院生物学教研室(青岛266021)
关键词：青霉胺；硫酸锌；姐妹染色单体交换
青岛医学院学报990208 【摘要】 ①目的 探讨青霉胺和硫酸锌对正常人外周血淋巴细胞DNA的损伤程度。②方法 采用染色体分析技术，分别对对照组、青霉胺组(0.01μg/L)、硫酸锌组(0.02μg/L)和青霉胺+硫酸锌组(青霉胺0.01μg/L，硫酸锌0.02μg/L)体外培养的淋巴细胞姐妹染色单体交换(SCE)频率进行了观察。③结果 对照组、青霉胺组、硫酸锌组和青霉胺+硫酸锌组的SCE计数平均值分别为5.43±0.53,8.15±1.36,5.66±0.59和6.71±0.74,除对照组与硫酸锌组之间差异无显著性(t=1.264，P>0.05)外，其他各组之间差异均有极显著性(t=4.054～8.120，P<0.001)。④结论 硫酸锌对染色体稳定性无影响，青霉胺对DNA损伤有一定的作用。
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中国图书馆分类法分类号R394.6
THE EFFECTS OF PENICILLAMINE AND Z INC SULPHATE
ON SCE IN HUMAN PERIPHERAL BLOOD LYMPHOCYTES
Zhang Feng, Su Ai, Du Silian, et al
Department of Biology, Qingdao Medical College, Q ingdao 266021
【ABSTRACT】 Objective To study the damaging effect of peni cillamine and zinc sulphate on DNA. Methods Chromosome analysis technique was used to study SCE freq uencies in culturing blood lymphocyte of control group, penicillamine group(pen icillamine 0.01μg/L), zinc sulphate group(zinc sulphate 0.02μg/L) and penicil lamine+zinc sulphate group(penicillamine 0.01μg/L zinc, sulphate 0.02μg/L) . Results The frequencies of SCE in control group, penicillamine gr oup, zinc sulphate group and penicillamine+zinc sulphate group were 5.43±0.53, 8.15±1.36,5.66±0.59 and 6.71±0.74 respectively. The frequencies of SCE betwee n control group and zinc sulphate group was not significantly different (t=1.2 64, P>0.05), while the frequencies of SCE between other groups were signific antly different(t=4.054-8.120, P<0.001). Conclusion Zinc sulphate had no damaging effect on DNA stability, penicillamine played certain role in DNA damage.
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【KEY WORDS】 penicillamine; zinc sulphate; sister chromatid exchan ge
青霉胺和硫酸锌是治疗肝豆状核变性(Wilson病)的主要药物之一，在服药过程中，两种药物均可不同程度地引起多种副作用〔1，2〕。本文观察了两种药物对正常人外周血淋巴细胞姐妹染色单体交换(SCE)的影响，探讨两种药物对DNA损伤的程度，以期指导临床用药。
1 对象和方法
1.1 对象及分组
20例供血者均为健康志愿者，男11例，女9例；年龄20～24岁，平均21.6岁。无乙型肝炎、丙型肝炎病史，近期无化学致癌物、致突变剂及放射线接触史。每个供血者抽取肘静脉血4mL，分为4个组：不加任何药品的对照组，青霉胺组(青霉胺0.01μg/L)，硫酸锌组(硫酸锌0.02μg/L)和青霉胺+硫酸锌组(青霉胺0.01μg/L，硫酸锌0.02μg/L)。
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1.2 实验方法
1.2.1 淋巴细胞培养与制片 外周血淋巴细胞按常规方法培养。培养至24h，加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)(10mg/L)，继续避光培养48h，制片前2h加入秋水仙素溶液(终浓度为0.2mg/L)。常规气干法制片。
1.2.2 分化染色和SCE计数采用夏家辉等〔3〕的方法行姐妹染色单体分化染色。选择BrdU掺入后第2细胞周期的中期分裂象，油镜下SCE计数。每例样本分析20个中期分裂象，计算每个细胞SCE计数平均值。
2 结果
对照组、青霉胺组、硫酸锌组及青霉胺并硫酸锌组SCE计数平均值分别为5.43±0.53,8.15±1.36,5.66±0.59,6.71±0.74.青霉胺组、青霉胺+硫酸锌组SCE计数较对照组升高，差异有极显著意义(t=6.130，8.120,P<0.001)；硫酸锌组SCE计数与对照组比较无明显差异(t=1.264,P>0.05)；青霉胺组SCE计数较硫酸锌组、青霉胺+硫酸锌组明显升高，差异有极显著性(t=4.045，7.320,P<0.001)；青霉胺+硫酸锌组与硫酸锌组比较差异亦有极显著性(t=4.836,P<0.001)。
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3 讨论
肝豆状核变性是一种可治疗的常染色体隐性遗传病，在几种治疗药物中，以青霉胺和硫酸锌使用最为普遍。这两种药物应用过程中都有一定的副作用，尤以青霉胺最为严重〔1，2,4〕。由于本病的治疗需要终生服药，服药是否能引起基因突变、SCE频率升高等遗传学效应，尚无定论，但目前还没有关于服用青霉胺产生遗传学效应的报道。SCE频率可以反映某一个体细胞DNA损伤与修复的情况，是遗传学不稳定性和早期染色体变化的灵敏指标〔5〕。
本实验采用小剂量青霉胺(0.01μg/L,约相当于10mg/kg体质量的治疗剂量)和大剂量硫酸锌(0.02μg/L，约相当于20mg/kg体质量的治疗用量)，对体外培养正常人外周血淋巴细胞SCE的影响进行观察。结果表明，硫酸锌对染色体稳定性并无影响；青霉胺可导致淋巴细胞DNA的损伤和染色体的不稳定；硫酸锌对青霉胺所致的淋巴细胞DNA的损伤可能有一定的保护作用。临床上使用硫酸锌除具有治疗作用外，对青霉胺造成的损伤是否也有保护作用尚需进一步研究。
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病人在怀孕期间服用青霉胺等驱铜药物，对孕妇和胎儿的影响是病人及医生十分关注的问题。文献报道，妊娠早期流产与怀孕前和孕期长期口服青霉胺有关〔6〕。本研究的结果从一个方面证实了青霉胺具有致畸作用。但由于缺乏直接的证据，青霉胺的致畸作用还需进一步探讨。
参考文献
1 杨任民，鲍远程，江停战，等.青霉胺副作用的探讨.新药与临床，1986,5(2):91
2 ScheinbergIH.Penicillamine in Wilsons disease. Lancet,1982,26( 1):1469
3 夏家辉，李麓云.姐妹染色体互换.生物科学动态,1978,(6):9
4 杜嗣廉，李博琴，林荣军，等.锌盐治疗19例肝豆状核变性的远期效果.中华儿科杂志,1991，29(5):270
5 Gebhert E，范耀山译.姐妹染色单体交换和结构染色体畸变在诱变检测中的作用.国外医学遗传学分册，1982,5(3):128
6 杨任民主编.肝豆状核变性.合肥：安徽科学技术出版社，1995.309
(1998-12-07收稿 1999-05-02修回), http://www.100md.com