凝固酶阴性葡萄球菌院内感染的现况调查
作者：沈文彩 梁丽萍
单位：沈文彩 (太原铁路中心医院检验科 太原 030013)；梁丽萍 (太原市杏花岭区中心医院检验科)
关键词：交叉感染；葡萄球菌，凝固酶阴性；微生物敏感性试验
山西医科大学学报990210 摘要 目的 了解凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)院内感染现况，影响因素及药物敏感性。方法 调查作者医院分离到CNS住院患者的临床资料，并对其临床分离菌株进行了鉴定和药敏试验。结果 分离到8种CNS，其中表皮葡萄球菌占55.9%，溶血性葡萄球菌占28.7%，青霉素耐药率为81.6%，甲氧苯青霉素耐药CNS(MR-CNS)株占56.6%，没有发现万古霉素耐药菌株。结论 患有严重的基础疾病，接受介入诊疗操作，滥用抗生素，应用免疫抑制剂等可能是CNS院内感染的危险因素。
中图号 R515.9
, http://www.100md.com
以表皮葡萄球菌为主的CNS一直被认为是皮肤粘膜的正常菌群，既往从临床标本中分离出大多认为是污染菌。然而近十年越来越多的文献表明，CNS已是院内感染的重要病原微生物，且对多种抗生素耐药[1]。为了解住院病人CNS感染的流行现况，查明流行因素控制其院内感染，我们对住院患者CNS感染进行了现况调查，并对感染菌株的耐药性进行了研究。
1 材料与方法
1.1 诊断标准 依据国内统一标准《医院感染监测指南》进行诊断。
1.2 调查对象 1995～1996年分离到CNS的住院患者。
1.3 调查方法 凡属调查对象需填写表格，对患者的基本情况，感染类型、诱发因素、诊疗经过和细菌学检查等进行临床调查。
1.4 菌种鉴定方法 将标本接种于5%脱纤维羊血培养基，35℃培养18～24 h，挑取G+球菌经纯培养后，按照全国临床检验操作规程中葡萄球菌属常规鉴定方法鉴定。
, 百拇医药
1.5 药敏试验
1.5.1 药敏纸片购自卫生部生物制品检定所
1.5.2 采用K-B纸片扩散法，参照美国临床实验室标准委员会(NCCLS)操作标准。其中甲氧苯霉素耐药CNS判断标准，按照NCCLS规定，取oxaillin 1 μg纸片，在4% NaCl M-H琼脂平皿上进行，经24 h培养观察，并记录结果，抑菌环直径≤10 mm为MR-CNS。
2 结果
2.1 136株CNS鉴定结果及感染分布状况 在调查中共分离到8种CNS，第一位为表皮葡萄球菌76株(55.9%)，第二位是溶血葡萄球菌39株(28.7%)，腐生、里昂、人型、木糖、华纳、孔氏葡萄球菌共21株(15.4%)，136例被调查的患者中，院内感染占61%，院外感染占14.7%，带菌状态24.3%。本次调查发现CNS感染主要发生在下呼吸道、尿道、咽部、血液、伤口等部位(见表1、2)。
, http://www.100md.com
表1 136株CNS鉴定结果及感染状况 (株) 菌 种
院内感染
院外感染
带菌
合计
构成比(%)
表皮葡萄球菌
45
11
20
76
55.9
溶血葡萄球菌
, 百拇医药
28
6
5
39
28.7
腐生葡萄球菌
4
1
3
8
5.9
里昂葡萄球菌
3
2
, 百拇医药
1
6
4.4
木糖葡萄球菌
2
0
0
2
1.5
华纳葡萄球菌
1
0
1
2
, http://www.100md.com
1.5
人型葡萄球菌
0
0
2
2
1.5
孔氏葡萄球菌
0
0
1
1
0.7
表2 凝固酶阴性葡萄球菌感染部位分布 (例) 感染部位
, http://www.100md.com
院内感染
院外感染
合计
构成比(%)
下呼吸道
28
9
37
35.9
尿 道
26
8
34
, http://www.100md.com
33.0
血 液
12
1
13
12.6
咽 部
5
2
7
6.8
伤 口
5
0
, http://www.100md.com
5
4.9
其 它
7
0
7
6.8
合 计
83
20
103
100.0
2.2 医院感染相关因素分析
, http://www.100md.com
2.2.1 性别及年龄 83例院内感染病例中，女性15例，男性68例占81.9%。年龄60岁以下者17例，60～79岁为63例，80岁以上者3例，60岁以上者共66例占79.5%。
2.2.2 住院时间 1个月以下者8例，1个月15例，2个月45例，3个月以上者15例。平均住院时间(62.6±8.0) d，明显大于当年全院患者平均住院时间25 d。CNS院内感染84.3%发生于入院30 d 后。
2.2.3 原发疾病 院内感染患者79例有严重基础疾病，其中21例(25.3%)为癌种和白血病，肺部疾患16例(19.3%)，颅脑外伤10例(12.0%)，其他32例(38.6%)。
2.2.4 医源性因素 手术治疗，留置导尿、气管切开、应用免疫抑制剂、滥用抗生素等院内感染的比例明显高于院外感染(见表3)。表3 院内感染危险因素 (%) 因素
, 百拇医药
院内感染
院外感染
手术
33.0
9.7
留置导尿
31.0
6.8
气管切开
15.5
0
应用抗生素4种以上者
36.0
, 百拇医药
0.7
应用免疫抑制剂
24.0
3.9
r＝4 χ2＝14.8 P<0.01
2.3 对常用抗生素的耐药性：136株CNS对青霉素G的耐药率达81.6%，MR-CNS耐药菌株占56.6%，尚未发现万古霉素耐药菌(见表4)。表4 136株CNS对8种抗生素的耐药性 菌名
菌株数
耐药菌 株数(%)
青霉素G
苯唑青霉素
, http://www.100md.com
头孢唑啉
利福平
红霉素
复方新诺明
环丙沙星
万古霉素
表皮葡萄球菌
76
63(82.9)
43(56.6)
8(10.5)
3(3.9)
61(80.3)
, 百拇医药
56(73.7)
44(57.9)
0(0)
溶血葡萄球菌
39
34(87.2)
28(71.8)
17(43.6)
5(12.8)
32(82.1)
30(76.9)
28(71.8)
, 百拇医药
0(0)
腐生葡萄球菌
8
5(62.5)
4(50.0)
1(12.5)
0(0)
5(62.5)
6(75.0)
5(62.5)
0(0)
其 他
13
, 百拇医药
9(69.2)
2(15.4)
2(15.4)
1(7.7)
5(38.5)
6(46.2)
8(61.5)
0(0)
合 计
136
111(81.6)
77(56.6)
, 百拇医药
28(20.6)
9(6.6)
103(75.7)
98(72.1)
85(62.5)
0(0)
3 讨论
CNS在院内感染的病原菌中占有重要地位。其致病作用不容忽视。部分CNS可以产生溶血素，杀白细胞素,及肠毒素[2]，其产生胞外粘液物(ESS)也是CNS的一个重要特性。ESS能在生物体表面形成生物膜，构成抗生素的渗透屏障，而此生物膜一旦建立很难移去。ESS能减低免疫应答和抑制吞噬作用，以干扰宿主防御功能[3]。本次调查显示，CNS耐药率极高，青霉素G耐药率为81.6%，除头孢唑啉、利福平外，红霉素、复方新诺明、环丙沙星耐药率均超过60%，MR-CNS检出率为56.6%与国外调查结果相似。细菌耐药是临床抗感染的一大难题。在治疗此类细菌感染时应首选万古霉素，因国内实验室的药物敏感试验还未发现耐万古霉素的CNS，我们的实验也证实了这一点。
, 百拇医药
本次调查CNS院内感染占61%，感染部位主要是下呼吸道其次是尿道，与国内报道相符，引起院内感染的CNS主要是表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌。此外里昂、腐生、木糖、华纳葡萄球菌均能引起院内感染。
CNS院内感染和院外感染有显著不同，一是感染发生率不同，院内感染占多数；二是伴发危险因素不同，CNS院内感染多有气管切开、手术、留置导尿管、滥用抗生素、应用免疫抑制剂或有某种基础疾病。而院外感染极少有这些因素。两种有显著差异，提示这些因素可能是CNS院内感染的危险因素。
本次调查发现白血病患者的咽部定植菌与一般患者及正常人不同。正常人与一般患者咽部细菌主要是草绿色链球菌和奈瑟氏菌，而白血病患者咽部分离到细菌主要是表皮葡萄球菌或溶血葡萄球菌。其原因何在，有待今后研究。
(本文蒙山西医科大学微生物学教研室主任郝素珍老师指导修改，特此致谢)
参考文献
1 李振林，主编.微生物学及检验技术.第3版.广州：广东科技出版社， 1997. 68
2 刘振英，高屹，尹铭芳.凝固酶阴性葡萄球菌的分布特点及耐药性分析.中华医学检验杂志， 1996， 19 (4)： 232
3 宋秀宇.CNS的临床意义.国外医学微生物学分册， 1995， 18 (2)： 30
[1998-11-13收稿], 百拇医药
单位：沈文彩 (太原铁路中心医院检验科 太原 030013)；梁丽萍 (太原市杏花岭区中心医院检验科)
关键词：交叉感染；葡萄球菌，凝固酶阴性；微生物敏感性试验
山西医科大学学报990210 摘要 目的 了解凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)院内感染现况，影响因素及药物敏感性。方法 调查作者医院分离到CNS住院患者的临床资料，并对其临床分离菌株进行了鉴定和药敏试验。结果 分离到8种CNS，其中表皮葡萄球菌占55.9%，溶血性葡萄球菌占28.7%，青霉素耐药率为81.6%，甲氧苯青霉素耐药CNS(MR-CNS)株占56.6%，没有发现万古霉素耐药菌株。结论 患有严重的基础疾病，接受介入诊疗操作，滥用抗生素，应用免疫抑制剂等可能是CNS院内感染的危险因素。
中图号 R515.9
, http://www.100md.com
以表皮葡萄球菌为主的CNS一直被认为是皮肤粘膜的正常菌群，既往从临床标本中分离出大多认为是污染菌。然而近十年越来越多的文献表明，CNS已是院内感染的重要病原微生物，且对多种抗生素耐药[1]。为了解住院病人CNS感染的流行现况，查明流行因素控制其院内感染，我们对住院患者CNS感染进行了现况调查，并对感染菌株的耐药性进行了研究。
1 材料与方法
1.1 诊断标准 依据国内统一标准《医院感染监测指南》进行诊断。
1.2 调查对象 1995～1996年分离到CNS的住院患者。
1.3 调查方法 凡属调查对象需填写表格，对患者的基本情况，感染类型、诱发因素、诊疗经过和细菌学检查等进行临床调查。
1.4 菌种鉴定方法 将标本接种于5%脱纤维羊血培养基，35℃培养18～24 h，挑取G+球菌经纯培养后，按照全国临床检验操作规程中葡萄球菌属常规鉴定方法鉴定。
, 百拇医药
1.5 药敏试验
1.5.1 药敏纸片购自卫生部生物制品检定所
1.5.2 采用K-B纸片扩散法，参照美国临床实验室标准委员会(NCCLS)操作标准。其中甲氧苯霉素耐药CNS判断标准，按照NCCLS规定，取oxaillin 1 μg纸片，在4% NaCl M-H琼脂平皿上进行，经24 h培养观察，并记录结果，抑菌环直径≤10 mm为MR-CNS。
2 结果
2.1 136株CNS鉴定结果及感染分布状况 在调查中共分离到8种CNS，第一位为表皮葡萄球菌76株(55.9%)，第二位是溶血葡萄球菌39株(28.7%)，腐生、里昂、人型、木糖、华纳、孔氏葡萄球菌共21株(15.4%)，136例被调查的患者中，院内感染占61%，院外感染占14.7%，带菌状态24.3%。本次调查发现CNS感染主要发生在下呼吸道、尿道、咽部、血液、伤口等部位(见表1、2)。
, http://www.100md.com
表1 136株CNS鉴定结果及感染状况 (株) 菌 种
院内感染
院外感染
带菌
合计
构成比(%)
表皮葡萄球菌
45
11
20
76
55.9
溶血葡萄球菌
, 百拇医药
28
6
5
39
28.7
腐生葡萄球菌
4
1
3
8
5.9
里昂葡萄球菌
3
2
, 百拇医药
1
6
4.4
木糖葡萄球菌
2
0
0
2
1.5
华纳葡萄球菌
1
0
1
2
, http://www.100md.com
1.5
人型葡萄球菌
0
0
2
2
1.5
孔氏葡萄球菌
0
0
1
1
0.7
表2 凝固酶阴性葡萄球菌感染部位分布 (例) 感染部位
, http://www.100md.com
院内感染
院外感染
合计
构成比(%)
下呼吸道
28
9
37
35.9
尿 道
26
8
34
, http://www.100md.com
33.0
血 液
12
1
13
12.6
咽 部
5
2
7
6.8
伤 口
5
0
, http://www.100md.com
5
4.9
其 它
7
0
7
6.8
合 计
83
20
103
100.0
2.2 医院感染相关因素分析
, http://www.100md.com
2.2.1 性别及年龄 83例院内感染病例中，女性15例，男性68例占81.9%。年龄60岁以下者17例，60～79岁为63例，80岁以上者3例，60岁以上者共66例占79.5%。
2.2.2 住院时间 1个月以下者8例，1个月15例，2个月45例，3个月以上者15例。平均住院时间(62.6±8.0) d，明显大于当年全院患者平均住院时间25 d。CNS院内感染84.3%发生于入院30 d 后。
2.2.3 原发疾病 院内感染患者79例有严重基础疾病，其中21例(25.3%)为癌种和白血病，肺部疾患16例(19.3%)，颅脑外伤10例(12.0%)，其他32例(38.6%)。
2.2.4 医源性因素 手术治疗，留置导尿、气管切开、应用免疫抑制剂、滥用抗生素等院内感染的比例明显高于院外感染(见表3)。表3 院内感染危险因素 (%) 因素
, 百拇医药
院内感染
院外感染
手术
33.0
9.7
留置导尿
31.0
6.8
气管切开
15.5
0
应用抗生素4种以上者
36.0
, 百拇医药
0.7
应用免疫抑制剂
24.0
3.9
r＝4 χ2＝14.8 P<0.01
2.3 对常用抗生素的耐药性：136株CNS对青霉素G的耐药率达81.6%，MR-CNS耐药菌株占56.6%，尚未发现万古霉素耐药菌(见表4)。表4 136株CNS对8种抗生素的耐药性 菌名
菌株数
耐药菌 株数(%)
青霉素G
苯唑青霉素
, http://www.100md.com
头孢唑啉
利福平
红霉素
复方新诺明
环丙沙星
万古霉素
表皮葡萄球菌
76
63(82.9)
43(56.6)
8(10.5)
3(3.9)
61(80.3)
, 百拇医药
56(73.7)
44(57.9)
0(0)
溶血葡萄球菌
39
34(87.2)
28(71.8)
17(43.6)
5(12.8)
32(82.1)
30(76.9)
28(71.8)
, 百拇医药
0(0)
腐生葡萄球菌
8
5(62.5)
4(50.0)
1(12.5)
0(0)
5(62.5)
6(75.0)
5(62.5)
0(0)
其 他
13
, 百拇医药
9(69.2)
2(15.4)
2(15.4)
1(7.7)
5(38.5)
6(46.2)
8(61.5)
0(0)
合 计
136
111(81.6)
77(56.6)
, 百拇医药
28(20.6)
9(6.6)
103(75.7)
98(72.1)
85(62.5)
0(0)
3 讨论
CNS在院内感染的病原菌中占有重要地位。其致病作用不容忽视。部分CNS可以产生溶血素，杀白细胞素,及肠毒素[2]，其产生胞外粘液物(ESS)也是CNS的一个重要特性。ESS能在生物体表面形成生物膜，构成抗生素的渗透屏障，而此生物膜一旦建立很难移去。ESS能减低免疫应答和抑制吞噬作用，以干扰宿主防御功能[3]。本次调查显示，CNS耐药率极高，青霉素G耐药率为81.6%，除头孢唑啉、利福平外，红霉素、复方新诺明、环丙沙星耐药率均超过60%，MR-CNS检出率为56.6%与国外调查结果相似。细菌耐药是临床抗感染的一大难题。在治疗此类细菌感染时应首选万古霉素，因国内实验室的药物敏感试验还未发现耐万古霉素的CNS，我们的实验也证实了这一点。
, 百拇医药
本次调查CNS院内感染占61%，感染部位主要是下呼吸道其次是尿道，与国内报道相符，引起院内感染的CNS主要是表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌。此外里昂、腐生、木糖、华纳葡萄球菌均能引起院内感染。
CNS院内感染和院外感染有显著不同，一是感染发生率不同，院内感染占多数；二是伴发危险因素不同，CNS院内感染多有气管切开、手术、留置导尿管、滥用抗生素、应用免疫抑制剂或有某种基础疾病。而院外感染极少有这些因素。两种有显著差异，提示这些因素可能是CNS院内感染的危险因素。
本次调查发现白血病患者的咽部定植菌与一般患者及正常人不同。正常人与一般患者咽部细菌主要是草绿色链球菌和奈瑟氏菌，而白血病患者咽部分离到细菌主要是表皮葡萄球菌或溶血葡萄球菌。其原因何在，有待今后研究。
(本文蒙山西医科大学微生物学教研室主任郝素珍老师指导修改，特此致谢)
参考文献
1 李振林，主编.微生物学及检验技术.第3版.广州：广东科技出版社， 1997. 68
2 刘振英，高屹，尹铭芳.凝固酶阴性葡萄球菌的分布特点及耐药性分析.中华医学检验杂志， 1996， 19 (4)： 232
3 宋秀宇.CNS的临床意义.国外医学微生物学分册， 1995， 18 (2)： 30
[1998-11-13收稿], 百拇医药