依诺沙星软膏制备及临床应用
作者：朱小华
单位：武汉马应龙药业集团股份有限公司 武汉430062
关键词：
中国医院药学杂志990335
依诺沙星是第三代喹诺酮类抗感染药物。将其制成O/W型乳膏，治疗细菌感染性皮肤病，收到满意疗效，现报道如下。
1 仪器与药品
LC-5A高效液相色谱仪(日本岛津)；254～365 nm紫外分析仪(上海分析仪四厂)；依诺沙星(武汉制药厂生产批号950803)；依诺沙星软膏(自制批号961015)；试剂均为分析纯。
2 处方及制备方法
2.1 处方 依诺沙星10 g，白凡士林100 g，十八醇100 g，吐温-80 45 g，司盘-40 27 g，甘油50 g，液状石蜡60 g，乳酸2.8 g，蒸馏水适量，制成1000 g。
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2.2 制法 称取白凡士林，十八醇，液状石蜡和司盘-40置水上加热到75 ℃混合均匀为油相。另取依诺沙星，甘油，吐温-80，乳酸熔于热蒸馏水中为水相。控温75 ℃，水相缓缓加入油相中，充分乳化，继续搅拌至凝即得。本方选择运用了本厂软膏生产成熟之经验，采用醋酸肤轻松软膏基质配伍，广泛易得，稳定可靠，乳化剂选择非离子型的司盘-40和吐温-80，处方HLB值计算公式如下：
混合乳化剂HLB值为：11.88
油相所需HLB值：11.83
HLB值相近，基质配方正确。
软膏剂乳化过程中，溶液法优于混匀法。而本方主药依诺沙星不溶于水。因此，我们选择了乳酸溶液作主药溶剂。实验表明。此法在乳化过程中能极好地分散药物，从而使软膏达到含量均匀，外观细腻。
依诺沙星原料和依诺沙星乳酸盐，依诺沙星钠盐的167株细菌体外抗菌活性比较结果表明ENX成盐后仍能呈现出良好的抗菌活力，其抗菌作用与原料药基本相同。在相同条件下，ENX乳酸盐对某些菌株抑菌活力略强。
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3 鉴定和含量测定
3.1 鉴别 取本品，加0.4%氢氧化钠液适量，置热水浴中加热数分钟，振摇使依诺沙星溶解后，稀释成每1ml中含依诺沙星4μg，摇匀，置冰浴中冷却2h后，迅速滤过，取续滤液，照分光光度法(中国药典1995年版二部附录24页)测定，在266 ±1nm与346±1nm的波长处有最大吸收。
3.2 含量测定 依诺沙星软膏处方比较复杂，含有乳化剂和各种基质。常规的含量测定方法，如原料药采用的非水滴定法，片剂和胶囊采用紫外分光光度法，因受共存物质干扰，均不宜选用，最后选用高效液相色谱法进行测定(中国药典1995年版二部附录9页)。
系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.3%溴化四丁基铵溶液-冰醋酸(38∶60∶2)为流动相，检测波长254 nm，理论板数按依诺沙星峰计算应不低于1 000，依诺沙星和内标物质峰的分离度应符合要求。
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校正因子测定：取依诺沙星对照品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1 ml中约含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液；另取苯甲酸，加流动相制成每1 ml中含5 mg的溶液，作为内标溶液。精密量取对照品溶液和内标溶液各5 ml，置50 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，取10 μl注入液相色谱仪，按峰面积计算校正因子。
供试品溶液的制备与测定，取本品适量(约相当依诺沙星2.5 mg)精密称定，加流动相约30 ml，置80 ℃水浴中加热2 min，搅拌使依诺沙星溶解。放冷到室温，精密加内标溶液5 ml，用流动相稀释成50 ml，摇匀，置冰浴中冷却2 h以上，取出后迅速滤过，弃去初滤液，取续滤液10 μl注入液相色谱仪，测定，计算，即得。
3.3 回收率试验 按照样品处方准确配制依诺沙星模拟样品5批，按照含量测定法测定含量，计算回收率。5批回收率分别为99.5%，100.8%，100.0%，101.4%，101.4%。平均值100.6%，相对标准偏差RSD=0.84%。
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3.4 样品测定 检验样品6批，鉴别(照3.1方法)均呈正反应。含量(照3.2方法)为100.7%，101.8%，97.5%，92.6%，92.7%和99.4%。
4 临床试验
4.1 药品 依诺沙星软膏(武汉马应龙药业公司研制)；新霉素软膏(广州何济公制药厂生产)。
4.2 用法 患者先清洁创面，暴露或包扎，每日二次，每次不超过1 g/cm2(相当于原药10 mg)，5～7 d为一疗程，共1～2个疗程，对照组用新霉素软膏，方法和疗程同试验组。
4.3 观察方法 治疗前后检查并记录局部皮肤感染情况及严重度，查血，尿常规，血小板计数，肝功(GPT、AKP)肾功(BuN,Cr)。观察和记录有无药物不良反应。
细菌学检查：治疗前于感染部位取标本作细菌培养，纸片法药敏试验，阳性标本送测MIC。疗程结束后次日消除感染部位残余药物后，再取标本培养，了解致病菌转归。
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4.4 疗效判定 痊愈：自觉症状消失，体征消失，伤口愈合；白细胞总数及分类计数恢复正常；病灶细菌培养阴转。显效：病情明显好转，但上述四项中有一项未恢复者。进步：用药后病情有所好转，但不够明显。无效：用药后病情无好转或有加重。痊愈和显效合计为有效，据此计算有效率。
4.5 临床结果 依诺沙星软膏治疗122例，痊愈率75.89%，有效率92.86%。新霉素软膏组痊愈率44.28%，有效率72.86%，两组差异有统计学意义。
平均症状消除日两组为5.7±2.2 d，6.5±3.0 d。细菌阴转率两组为96.83%，89.61%；依诺沙星均优于新霉素软膏，但差异无统计学意义。临床发现：依诺沙星软膏对原发感染中的疖、毛囊炎、脓疱疮疗效最好。
体外抗菌活性测定：纸片法药敏实验表明依诺沙星对本次实验分离出的革兰氏阳性菌，如金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和链球菌的敏感菌分别为92.37%，93.75%和84.62%，优于新霉素，四环素和红霉素，对革兰氏阴性细菌，除绿脓杆菌和产气杆菌外，全部敏感，明显优于其他3种抗菌素。最低抑菌浓度测定显示依诺沙星对绝大多数革兰氏阳性和阴性细菌均有很好的抗菌活性。
(1998年3月5日收稿), http://www.100md.com
单位：武汉马应龙药业集团股份有限公司 武汉430062
关键词：
中国医院药学杂志990335
依诺沙星是第三代喹诺酮类抗感染药物。将其制成O/W型乳膏，治疗细菌感染性皮肤病，收到满意疗效，现报道如下。
1 仪器与药品
LC-5A高效液相色谱仪(日本岛津)；254～365 nm紫外分析仪(上海分析仪四厂)；依诺沙星(武汉制药厂生产批号950803)；依诺沙星软膏(自制批号961015)；试剂均为分析纯。
2 处方及制备方法
2.1 处方 依诺沙星10 g，白凡士林100 g，十八醇100 g，吐温-80 45 g，司盘-40 27 g，甘油50 g，液状石蜡60 g，乳酸2.8 g，蒸馏水适量，制成1000 g。
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2.2 制法 称取白凡士林，十八醇，液状石蜡和司盘-40置水上加热到75 ℃混合均匀为油相。另取依诺沙星，甘油，吐温-80，乳酸熔于热蒸馏水中为水相。控温75 ℃，水相缓缓加入油相中，充分乳化，继续搅拌至凝即得。本方选择运用了本厂软膏生产成熟之经验，采用醋酸肤轻松软膏基质配伍，广泛易得，稳定可靠，乳化剂选择非离子型的司盘-40和吐温-80，处方HLB值计算公式如下：
混合乳化剂HLB值为：11.88
油相所需HLB值：11.83
HLB值相近，基质配方正确。
软膏剂乳化过程中，溶液法优于混匀法。而本方主药依诺沙星不溶于水。因此，我们选择了乳酸溶液作主药溶剂。实验表明。此法在乳化过程中能极好地分散药物，从而使软膏达到含量均匀，外观细腻。
依诺沙星原料和依诺沙星乳酸盐，依诺沙星钠盐的167株细菌体外抗菌活性比较结果表明ENX成盐后仍能呈现出良好的抗菌活力，其抗菌作用与原料药基本相同。在相同条件下，ENX乳酸盐对某些菌株抑菌活力略强。
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3 鉴定和含量测定
3.1 鉴别 取本品，加0.4%氢氧化钠液适量，置热水浴中加热数分钟，振摇使依诺沙星溶解后，稀释成每1ml中含依诺沙星4μg，摇匀，置冰浴中冷却2h后，迅速滤过，取续滤液，照分光光度法(中国药典1995年版二部附录24页)测定，在266 ±1nm与346±1nm的波长处有最大吸收。
3.2 含量测定 依诺沙星软膏处方比较复杂，含有乳化剂和各种基质。常规的含量测定方法，如原料药采用的非水滴定法，片剂和胶囊采用紫外分光光度法，因受共存物质干扰，均不宜选用，最后选用高效液相色谱法进行测定(中国药典1995年版二部附录9页)。
系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.3%溴化四丁基铵溶液-冰醋酸(38∶60∶2)为流动相，检测波长254 nm，理论板数按依诺沙星峰计算应不低于1 000，依诺沙星和内标物质峰的分离度应符合要求。
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校正因子测定：取依诺沙星对照品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1 ml中约含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液；另取苯甲酸，加流动相制成每1 ml中含5 mg的溶液，作为内标溶液。精密量取对照品溶液和内标溶液各5 ml，置50 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，取10 μl注入液相色谱仪，按峰面积计算校正因子。
供试品溶液的制备与测定，取本品适量(约相当依诺沙星2.5 mg)精密称定，加流动相约30 ml，置80 ℃水浴中加热2 min，搅拌使依诺沙星溶解。放冷到室温，精密加内标溶液5 ml，用流动相稀释成50 ml，摇匀，置冰浴中冷却2 h以上，取出后迅速滤过，弃去初滤液，取续滤液10 μl注入液相色谱仪，测定，计算，即得。
3.3 回收率试验 按照样品处方准确配制依诺沙星模拟样品5批，按照含量测定法测定含量，计算回收率。5批回收率分别为99.5%，100.8%，100.0%，101.4%，101.4%。平均值100.6%，相对标准偏差RSD=0.84%。
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3.4 样品测定 检验样品6批，鉴别(照3.1方法)均呈正反应。含量(照3.2方法)为100.7%，101.8%，97.5%，92.6%，92.7%和99.4%。
4 临床试验
4.1 药品 依诺沙星软膏(武汉马应龙药业公司研制)；新霉素软膏(广州何济公制药厂生产)。
4.2 用法 患者先清洁创面，暴露或包扎，每日二次，每次不超过1 g/cm2(相当于原药10 mg)，5～7 d为一疗程，共1～2个疗程，对照组用新霉素软膏，方法和疗程同试验组。
4.3 观察方法 治疗前后检查并记录局部皮肤感染情况及严重度，查血，尿常规，血小板计数，肝功(GPT、AKP)肾功(BuN,Cr)。观察和记录有无药物不良反应。
细菌学检查：治疗前于感染部位取标本作细菌培养，纸片法药敏试验，阳性标本送测MIC。疗程结束后次日消除感染部位残余药物后，再取标本培养，了解致病菌转归。
, http://www.100md.com
4.4 疗效判定 痊愈：自觉症状消失，体征消失，伤口愈合；白细胞总数及分类计数恢复正常；病灶细菌培养阴转。显效：病情明显好转，但上述四项中有一项未恢复者。进步：用药后病情有所好转，但不够明显。无效：用药后病情无好转或有加重。痊愈和显效合计为有效，据此计算有效率。
4.5 临床结果 依诺沙星软膏治疗122例，痊愈率75.89%，有效率92.86%。新霉素软膏组痊愈率44.28%，有效率72.86%，两组差异有统计学意义。
平均症状消除日两组为5.7±2.2 d，6.5±3.0 d。细菌阴转率两组为96.83%，89.61%；依诺沙星均优于新霉素软膏，但差异无统计学意义。临床发现：依诺沙星软膏对原发感染中的疖、毛囊炎、脓疱疮疗效最好。
体外抗菌活性测定：纸片法药敏实验表明依诺沙星对本次实验分离出的革兰氏阳性菌，如金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和链球菌的敏感菌分别为92.37%，93.75%和84.62%，优于新霉素，四环素和红霉素，对革兰氏阴性细菌，除绿脓杆菌和产气杆菌外，全部敏感，明显优于其他3种抗菌素。最低抑菌浓度测定显示依诺沙星对绝大多数革兰氏阳性和阴性细菌均有很好的抗菌活性。
(1998年3月5日收稿), http://www.100md.com