酶联免疫吸附法检测肺炎支原体抗体IgG和IgM结果分析
作者：谭淑珍 杨媛华 胡维 周艳 刘敬忠
单位：首都医科大学附属北京红十字朝阳医院基础医学研究中心
关键词：
首都医科大学学报/990324 肺炎支原体是人体内支原体属中主要的一种病原体[1]，由其引起的肺炎占X线诊断肺炎的15%～20%[2]，临床上常因诊断不及时而影响治疗，因此对于此种感染的快速诊断是有效治疗的基础。近年发展起来的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺炎支原体抗体，可同时检测IgG和IgM抗体，特异性强，敏感性高[3]。本研究用ELISA法检测了565例肺炎及上呼吸道感染患者的血清肺炎支原体IgG、IgM抗体。其中的109例同时做冷凝集试验，并对检查结果及治疗情况进行比较分析。
1 材料和方法
, http://www.100md.com
检测对象均为我院1997年12月至1998年10月呼吸科住院病人，共565例，其中女性256例，男性309例，年龄15～90岁。病种包括：肺炎、慢性支气管炎急性发作合并肺炎、上呼吸道感染、肺心病、肺癌伴有肺炎等。
所有病人均取静脉血，分离血清，-20 ℃保存，2周内测定。
用ELISA法检测肺炎支原体抗体IgG、IgM(采用美国GenBio公司试剂盒)，将患者血清1∶100稀释，加到包被有抗原的微孔中，室温反应60 min，去除未结合的抗体，加入结合有过氧化物酶的抗人IgM或IgG抗体，室温反应30 min，再加显色底物ABTS，反应30 min，以草酸中止反应，在波长405 nm的酶标仪上读取OD值。测定IgM抗体前血清与吸附剂作用30 min，以去除患者血清中的类风湿因子或补体IgG的干扰。每个标本的OD值经公式计算出标准化活性值(kU/L)。
结果判断：IgM<770 kU/L为阴性；770～950 kU/L为弱阳性；>950 kU/L为阳性。IgG活性值>320 kU/L或动态升高2倍以上诊断为阳性。
, 百拇医药
同时对109例血清做冷凝集试验，滴度>1∶32对肺炎支原体感染有参考意义。
统计学处理采用χ2检验法。
2 结果和讨论
565例患者中IgG阳性213例，占37.7%；IgM阳性125例，占22.1%；IgG、IgM同时阳性77例，占13.6%。
IgG类抗体常在发病后3～4 d产生，2～4周达高峰，阳性提示已过急性期，可作为回顾性诊断。IgM类抗体在发病前3～4 d产生，1周达高峰，4周后逐渐降低，然而特异性IgM在感染后可在体内持续存在几个月，但是当检测出的IgM抗体水平低于770 kU/L时，判断为阴性。因此IgM阳性提示感染急性期，是早期诊断的特异性指标。IgG、IgM同时阳性表示已过感染早期，最初出现的IgM尚未消失，IgG已出现，抗体处于较高水平，对诊断有意义。
, 百拇医药
在565例患者中的109例血清同时也做了冷凝集试验，用ELISA法检出58例阳性，阳性率53.2%。而用冷凝集法仅查出4例阳性，阳性率3.7%。可见ELISA法阳性检出率明显高于后者，差异非常显著(P<0.01，表1)。
表1 109例患者ELISA法和冷凝集法检测结果比较 方法
ELISA
合计
阳性
阴性
冷凝集法
阳性
4
0
, 百拇医药
4
阴性
54
51
105
合计
58
51
109
经χ2检验2种方法阳性率相差非常显著(P<0.01)
4例冷凝集阳性血清用ELISA法检测也阳性，而冷凝集阴性中有54例ELISA法阳性，说明ELISA法的特异性也是好的。
, 百拇医药
对565例患者的检测结果表明，ELISA法具有灵敏、特异、快速等特点，是支原体肺炎感染早期诊断较为理想的方法，具有在临床检验中推广的价值。
参考文献
1.Handley O J G, Gray L D. The incidence of Mycoplasma pneumoniae pneumonia. J Am Board Fam Pract, 1997,10(6):425～429
2.Foy H M, Kenny G E, Cooney M K, et al. Long term epidemiology of infections with Mycoplasma pneumoniae. J Infect Dis, 1979,139:681
3.Rastawicki W. Evaluation of conventional and new generation tests for testing the humeral response to Mycoplasma pneumoniae antigens in natural infection in humans. Ⅲ Use of ELISA, complement fixation and immunoelectroprecipitation tests in diagnosis of Mycoplasma pneumoniae infections-comparative analysis. Med Dosw Mikrobiol, 1995,47(1-2):77～88
收稿日期:1998-11-12, 百拇医药
单位：首都医科大学附属北京红十字朝阳医院基础医学研究中心
关键词：
首都医科大学学报/990324 肺炎支原体是人体内支原体属中主要的一种病原体[1]，由其引起的肺炎占X线诊断肺炎的15%～20%[2]，临床上常因诊断不及时而影响治疗，因此对于此种感染的快速诊断是有效治疗的基础。近年发展起来的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺炎支原体抗体，可同时检测IgG和IgM抗体，特异性强，敏感性高[3]。本研究用ELISA法检测了565例肺炎及上呼吸道感染患者的血清肺炎支原体IgG、IgM抗体。其中的109例同时做冷凝集试验，并对检查结果及治疗情况进行比较分析。
1 材料和方法
, http://www.100md.com
检测对象均为我院1997年12月至1998年10月呼吸科住院病人，共565例，其中女性256例，男性309例，年龄15～90岁。病种包括：肺炎、慢性支气管炎急性发作合并肺炎、上呼吸道感染、肺心病、肺癌伴有肺炎等。
所有病人均取静脉血，分离血清，-20 ℃保存，2周内测定。
用ELISA法检测肺炎支原体抗体IgG、IgM(采用美国GenBio公司试剂盒)，将患者血清1∶100稀释，加到包被有抗原的微孔中，室温反应60 min，去除未结合的抗体，加入结合有过氧化物酶的抗人IgM或IgG抗体，室温反应30 min，再加显色底物ABTS，反应30 min，以草酸中止反应，在波长405 nm的酶标仪上读取OD值。测定IgM抗体前血清与吸附剂作用30 min，以去除患者血清中的类风湿因子或补体IgG的干扰。每个标本的OD值经公式计算出标准化活性值(kU/L)。
结果判断：IgM<770 kU/L为阴性；770～950 kU/L为弱阳性；>950 kU/L为阳性。IgG活性值>320 kU/L或动态升高2倍以上诊断为阳性。
, 百拇医药
同时对109例血清做冷凝集试验，滴度>1∶32对肺炎支原体感染有参考意义。
统计学处理采用χ2检验法。
2 结果和讨论
565例患者中IgG阳性213例，占37.7%；IgM阳性125例，占22.1%；IgG、IgM同时阳性77例，占13.6%。
IgG类抗体常在发病后3～4 d产生，2～4周达高峰，阳性提示已过急性期，可作为回顾性诊断。IgM类抗体在发病前3～4 d产生，1周达高峰，4周后逐渐降低，然而特异性IgM在感染后可在体内持续存在几个月，但是当检测出的IgM抗体水平低于770 kU/L时，判断为阴性。因此IgM阳性提示感染急性期，是早期诊断的特异性指标。IgG、IgM同时阳性表示已过感染早期，最初出现的IgM尚未消失，IgG已出现，抗体处于较高水平，对诊断有意义。
, 百拇医药
在565例患者中的109例血清同时也做了冷凝集试验，用ELISA法检出58例阳性，阳性率53.2%。而用冷凝集法仅查出4例阳性，阳性率3.7%。可见ELISA法阳性检出率明显高于后者，差异非常显著(P<0.01，表1)。
表1 109例患者ELISA法和冷凝集法检测结果比较 方法
ELISA
合计
阳性
阴性
冷凝集法
阳性
4
0
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4
阴性
54
51
105
合计
58
51
109
经χ2检验2种方法阳性率相差非常显著(P<0.01)
4例冷凝集阳性血清用ELISA法检测也阳性，而冷凝集阴性中有54例ELISA法阳性，说明ELISA法的特异性也是好的。
, 百拇医药
对565例患者的检测结果表明，ELISA法具有灵敏、特异、快速等特点，是支原体肺炎感染早期诊断较为理想的方法，具有在临床检验中推广的价值。
参考文献
1.Handley O J G, Gray L D. The incidence of Mycoplasma pneumoniae pneumonia. J Am Board Fam Pract, 1997,10(6):425～429
2.Foy H M, Kenny G E, Cooney M K, et al. Long term epidemiology of infections with Mycoplasma pneumoniae. J Infect Dis, 1979,139:681
3.Rastawicki W. Evaluation of conventional and new generation tests for testing the humeral response to Mycoplasma pneumoniae antigens in natural infection in humans. Ⅲ Use of ELISA, complement fixation and immunoelectroprecipitation tests in diagnosis of Mycoplasma pneumoniae infections-comparative analysis. Med Dosw Mikrobiol, 1995,47(1-2):77～88
收稿日期:1998-11-12, 百拇医药