美洛昔康在大鼠体内代谢的考察
作者：夏运岳 潘建新 顾振纶
单位：苏州医学院药理学教研室，苏州，215007
关键词：美洛昔康；HPLC；体内代谢
苏州医学院学报ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SUZHOU1999年 第19卷 第8期 Vol 摘要 采用高效液相法，C18柱，流动相为甲醇∶水∶冰醋酸：乙腈(600∶500∶20∶50)。检测波长为355 nm，柱温 40℃，流速1.0 ml/min。1～10 mg/L线性关系良好，最低检测限0.05 mg/L。结果：大鼠ig 6 mg/kg MLX，96 h内，小便、大便及胆汁中的排泄分数分别为0.191%、5.1%、0.764%，总排泄量为5%～6%。结论：药物大部分以体内代谢形式消除。
中图法分类 R971.1
, 百拇医药 Study on Metabolism of Meloxicam in Rat
Xia Yunyue, Pan Jianxin，Gu zhenlun
Department of Pharmacy, Suzhou Medical College, Suzhou,215007
Abstract Objective to study on metabolism of meloxicam in rat. Method Drugs was determinated by HPLC on C18 column with methanol: water: acetic acid:acetonitrile (600∶500∶20∶50). UV detector was set at 355nm, the temperature of colum was 40°C, the flow rate was 1.0ml. min-1. Results The calibration curve was linear within the concentration range from 1.0 to 10.0mg/L and the limit of detection was 50 μg/L. The excretion rate of meloxicam in rat was: urine, 0.191%; feces, 5.1%; bile, 0.764%, the total excretion was 5～6%. Conclusion The great majority of drug is eliminated by metabolism in vivo.
, http://www.100md.com
Key Words meloxicam; metabolism; rate
美洛昔康(Meloxicam,MLX)是一种新型非甾体抗炎药，对慢性风湿性关节炎的抗炎、镇痛效果与吡罗昔康、萘普生相同，但对胃及十二指肠溃疡诱生作用较弱。为了考察MLX在大鼠体内的代谢情况，我们用HPLC法测定MLX原形药在大鼠代谢产物小便、大便及胆汁中的含量，计算MLX在各代谢产物中的累积排泄量。
1 材料与方法
1.1 实验材料：SD大白鼠，体重200～300g。雌雄各半。由苏州医学院动物实验中心提供。Waters高效液相色谱仪，510泵，484紫外检测器，810工作站。MLX标准品由北京中达医药研究所提供(批号970401，含量98.6%)。乙腈为色谱纯。水为超纯水(自制)。
1.2 色谱条件：色谱柱：LUNAC18 (5μm,4.6mm×150mm)，由美国PHENOMENEX公司提供。流动相为甲醇∶水∶冰醋酸∶乙腈(600∶500∶20∶50)，流速为1.0ml/min，检测波长355nm。柱温40℃。在此色谱条件下，MLX的出峰时间约为A，代谢物峰为B，见图1、2。
, http://www.100md.com
图1 空白样品色谱峰 图2 ig MLX1h后的色谱峰
1.3 MLX样品溶液的配制：精密称取MLX 120mg，用0.5%CMC-Na溶液200ml，配成混悬液。MLX的混悬储备液4℃冰箱保存。
1.4 样品的处理
1.4.1 尿样品的处理：取5ml尿样，加乙醚5ml,加0.5mol/L HCl溶液，调节pH3～4，震荡1min，3500r/min离心5min。取乙醚层，重复两次，合并乙醚层。将乙醚层于40～50℃水浴上挥发，除去乙醚后，加200μl流动相,振荡溶解。取20μl进样，积峰高。
1.4.2 大便样品的处理：精密取大便样品0.2～0.3g，加0.01mol/L NaOH 2ml搅拌，振荡离心，取上清液，重复两次，合并上清液。向上清液中加0.5mol/L HCl，调节pH3～4后，处理同尿样。
, 百拇医药
1.4.3 胆汁样品处理：取胆汁样品3ml。处理同尿样。
2 结果2.1 标准曲线的制备：将1 g/L MLX标准品溶液稀释成20 mg/L，取尿液、大便、胆汁。加入不同量的标准品后，按上述样品的处理进行处理。数据回归见表1。
表1 尿、大便、胆汁的标准曲线 样品
浓度(mg/L)
回归方程
相关系数(r)
尿
1 2 5 10
R=-98.13+6186C
, 百拇医药
0.9998
大便
1 2 5 10
R=-655+6595C
0.9993
胆汁
1 2 5 10
R=-779.02+6754C
0.9993
2.2 MLX在大鼠尿中的排泄：取大鼠4只，体重234±20g，雌雄各半，禁食12h,但可自由饮水。ig, 6mg/kg MLX分别放入代谢笼中。收集24、48、72、96h的尿，取尿液5.0 ml测定尿药浓度，并折算成尿总药量，累积排泄分数(累积排泄量/给药剂量)。结果见表2。
, http://www.100md.com
表2 大鼠ig 6mg/kg MLX后尿的排泄量和排泄分数[μg(%)] 动物编号
剂量
(mg/只)
0～24h
0～48h
0～72h
0～96h
1
1.524
1.323(0.087)
1.918(0.126)
2.227(0.146)
, 百拇医药
2.391(0.157)
2
1.536
2.035(0.133)
2.544(0.166)
2.948(0.192)
3.146(0.205)
3
1.272
0.365(0.029)
0.365(0.029)
1.308(0.103)
, 百拇医药
1.442(0.113)
4
1.170
-
0.350(0.030)
0.350(0.030)
3.418(0.290)
x±s
0.083±0.043
0.107±0.057
0.147±0.031
0.191±0.066
, 百拇医药
2.3 MLX在大鼠粪中排泄：取大鼠4只，体重235±20g，雌雄各半，禁食12h,但可自由饮水，ig 6 mg/kg MLX，分别放在代谢笼中收集24、48、72、96 h的粪便，取0.2～0.3 g粪便用定量的0.01 mol/ml NaOH制成匀浆后进行分析，折算成粪药量，累积排泄量和排泄分数。见表3。表3 大鼠不同时间粪的排泄量与排泄分数[μg(%)] 动物
编号
剂量
(mg/只)
0～24h
0～48h
0～72h
0～96h
, 百拇医药 1
1.530
44.421(2.90)
81.098(5.30)
96.909(6.33)
107.435(7.02)
2
1.536
28.001(1.82)
43.641(2.84)
43.641(2.84)
50.445(3.28)
, 百拇医药
3
1.272
10.641(1.31)
22.335(1.76)
14.647(3.27)
53.560(4.21)
4
1.308
24.893(1.90)
44.606(3.41)
62.185(4.75)
76.895(5.88)
, 百拇医药
x±s
1.983±0.58
3.328±1.284
4.783±1.25
5.098±1.45
2.4 MLX 在鼠胆法中的排泄：取16只大鼠，体重234±27 g，雌雄各半。以待0～24、～48、～72、～96h 4个时间段，分成4组。每组禁食12 h，但可自由饮水，ig 6 mg/kg MLX，作胆管插管术。分别收集0～24，～48，～72，～96h的胆汁，用HPLC法分析胆汁中药物的排泄量、计算累积排泄量、累积排泄分数，结果见表4。
表4 大鼠胆汁的排泄量和排泄分数[μg(%)] 动物
编号
, http://www.100md.com
剂量
(mg/只)
0～24h
24～48h
48～72h
72～96h
1
1.35
1.629
0.121
1.29
2.387
0.185
, http://www.100md.com
1.39
2.376
0.171
2
1.26
1.992
0.158
1.41
3.262
0.231
1.52
2.341
0.154
, http://www.100md.com
3
1.66
1.850
0.112
1.90
3.762
0.198
1.51
3.830
0.254
4
1.50
1.829
, 百拇医药
0.122
1.25
3.220
0.258
1.71
2.429
0.142
x±s
0.128±0.0176
0.218±0.0285
0.180±0.4380
0.238±0.027
, 百拇医药
3 讨论
MLX是一种新型的非甾体抗炎药，对慢性风湿性关节炎有抗炎和镇痛效果，对胃肠道作用较弱，是一种很有希望的抗炎镇痛药。
本实验结果说明，大鼠ig 6mg/kg MLX后，96h内药物的胆汁、尿、粪中累积排泄分数分别为0.764%、0.191%、5.098%，MLX在大鼠尿、粪和胆汁中的总排泄量仅为给药量的5%～6%，提示MLX主要在体内代谢消除。
从药物结构看，MLX难溶于水，易溶于乙醚及碱性溶液。因而在提取过程中，对生物样品先用HCl酸化，使之游离，再用乙醚提取。
参考文献
1 D Turck, et al. Clinical Pharmacokinetics of Meloxicam. ArzeimForsch. 1997, 47(I)∶253
2 Schid, et al. Pharmacokinetics and Metabolic Pattern of Meloxicam. Durg Metabol Disposit, 1995,23(11)
(1998年12月1日收稿), 百拇医药
单位：苏州医学院药理学教研室，苏州，215007
关键词：美洛昔康；HPLC；体内代谢
苏州医学院学报ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SUZHOU1999年 第19卷 第8期 Vol 摘要 采用高效液相法，C18柱，流动相为甲醇∶水∶冰醋酸：乙腈(600∶500∶20∶50)。检测波长为355 nm，柱温 40℃，流速1.0 ml/min。1～10 mg/L线性关系良好，最低检测限0.05 mg/L。结果：大鼠ig 6 mg/kg MLX，96 h内，小便、大便及胆汁中的排泄分数分别为0.191%、5.1%、0.764%，总排泄量为5%～6%。结论：药物大部分以体内代谢形式消除。
中图法分类 R971.1
, 百拇医药 Study on Metabolism of Meloxicam in Rat
Xia Yunyue, Pan Jianxin，Gu zhenlun
Department of Pharmacy, Suzhou Medical College, Suzhou,215007
Abstract Objective to study on metabolism of meloxicam in rat. Method Drugs was determinated by HPLC on C18 column with methanol: water: acetic acid:acetonitrile (600∶500∶20∶50). UV detector was set at 355nm, the temperature of colum was 40°C, the flow rate was 1.0ml. min-1. Results The calibration curve was linear within the concentration range from 1.0 to 10.0mg/L and the limit of detection was 50 μg/L. The excretion rate of meloxicam in rat was: urine, 0.191%; feces, 5.1%; bile, 0.764%, the total excretion was 5～6%. Conclusion The great majority of drug is eliminated by metabolism in vivo.
, http://www.100md.com
Key Words meloxicam; metabolism; rate
美洛昔康(Meloxicam,MLX)是一种新型非甾体抗炎药，对慢性风湿性关节炎的抗炎、镇痛效果与吡罗昔康、萘普生相同，但对胃及十二指肠溃疡诱生作用较弱。为了考察MLX在大鼠体内的代谢情况，我们用HPLC法测定MLX原形药在大鼠代谢产物小便、大便及胆汁中的含量，计算MLX在各代谢产物中的累积排泄量。
1 材料与方法
1.1 实验材料：SD大白鼠，体重200～300g。雌雄各半。由苏州医学院动物实验中心提供。Waters高效液相色谱仪，510泵，484紫外检测器，810工作站。MLX标准品由北京中达医药研究所提供(批号970401，含量98.6%)。乙腈为色谱纯。水为超纯水(自制)。
1.2 色谱条件：色谱柱：LUNAC18 (5μm,4.6mm×150mm)，由美国PHENOMENEX公司提供。流动相为甲醇∶水∶冰醋酸∶乙腈(600∶500∶20∶50)，流速为1.0ml/min，检测波长355nm。柱温40℃。在此色谱条件下，MLX的出峰时间约为A，代谢物峰为B，见图1、2。
, http://www.100md.com
图1 空白样品色谱峰 图2 ig MLX1h后的色谱峰
1.3 MLX样品溶液的配制：精密称取MLX 120mg，用0.5%CMC-Na溶液200ml，配成混悬液。MLX的混悬储备液4℃冰箱保存。
1.4 样品的处理
1.4.1 尿样品的处理：取5ml尿样，加乙醚5ml,加0.5mol/L HCl溶液，调节pH3～4，震荡1min，3500r/min离心5min。取乙醚层，重复两次，合并乙醚层。将乙醚层于40～50℃水浴上挥发，除去乙醚后，加200μl流动相,振荡溶解。取20μl进样，积峰高。
1.4.2 大便样品的处理：精密取大便样品0.2～0.3g，加0.01mol/L NaOH 2ml搅拌，振荡离心，取上清液，重复两次，合并上清液。向上清液中加0.5mol/L HCl，调节pH3～4后，处理同尿样。
, 百拇医药
1.4.3 胆汁样品处理：取胆汁样品3ml。处理同尿样。
2 结果2.1 标准曲线的制备：将1 g/L MLX标准品溶液稀释成20 mg/L，取尿液、大便、胆汁。加入不同量的标准品后，按上述样品的处理进行处理。数据回归见表1。
表1 尿、大便、胆汁的标准曲线 样品
浓度(mg/L)
回归方程
相关系数(r)
尿
1 2 5 10
R=-98.13+6186C
, 百拇医药
0.9998
大便
1 2 5 10
R=-655+6595C
0.9993
胆汁
1 2 5 10
R=-779.02+6754C
0.9993
2.2 MLX在大鼠尿中的排泄：取大鼠4只，体重234±20g，雌雄各半，禁食12h,但可自由饮水。ig, 6mg/kg MLX分别放入代谢笼中。收集24、48、72、96h的尿，取尿液5.0 ml测定尿药浓度，并折算成尿总药量，累积排泄分数(累积排泄量/给药剂量)。结果见表2。
, http://www.100md.com
表2 大鼠ig 6mg/kg MLX后尿的排泄量和排泄分数[μg(%)] 动物编号
剂量
(mg/只)
0～24h
0～48h
0～72h
0～96h
1
1.524
1.323(0.087)
1.918(0.126)
2.227(0.146)
, 百拇医药
2.391(0.157)
2
1.536
2.035(0.133)
2.544(0.166)
2.948(0.192)
3.146(0.205)
3
1.272
0.365(0.029)
0.365(0.029)
1.308(0.103)
, 百拇医药
1.442(0.113)
4
1.170
-
0.350(0.030)
0.350(0.030)
3.418(0.290)
x±s
0.083±0.043
0.107±0.057
0.147±0.031
0.191±0.066
, 百拇医药
2.3 MLX在大鼠粪中排泄：取大鼠4只，体重235±20g，雌雄各半，禁食12h,但可自由饮水，ig 6 mg/kg MLX，分别放在代谢笼中收集24、48、72、96 h的粪便，取0.2～0.3 g粪便用定量的0.01 mol/ml NaOH制成匀浆后进行分析，折算成粪药量，累积排泄量和排泄分数。见表3。表3 大鼠不同时间粪的排泄量与排泄分数[μg(%)] 动物
编号
剂量
(mg/只)
0～24h
0～48h
0～72h
0～96h
, 百拇医药 1
1.530
44.421(2.90)
81.098(5.30)
96.909(6.33)
107.435(7.02)
2
1.536
28.001(1.82)
43.641(2.84)
43.641(2.84)
50.445(3.28)
, 百拇医药
3
1.272
10.641(1.31)
22.335(1.76)
14.647(3.27)
53.560(4.21)
4
1.308
24.893(1.90)
44.606(3.41)
62.185(4.75)
76.895(5.88)
, 百拇医药
x±s
1.983±0.58
3.328±1.284
4.783±1.25
5.098±1.45
2.4 MLX 在鼠胆法中的排泄：取16只大鼠，体重234±27 g，雌雄各半。以待0～24、～48、～72、～96h 4个时间段，分成4组。每组禁食12 h，但可自由饮水，ig 6 mg/kg MLX，作胆管插管术。分别收集0～24，～48，～72，～96h的胆汁，用HPLC法分析胆汁中药物的排泄量、计算累积排泄量、累积排泄分数，结果见表4。
表4 大鼠胆汁的排泄量和排泄分数[μg(%)] 动物
编号
, http://www.100md.com
剂量
(mg/只)
0～24h
24～48h
48～72h
72～96h
1
1.35
1.629
0.121
1.29
2.387
0.185
, http://www.100md.com
1.39
2.376
0.171
2
1.26
1.992
0.158
1.41
3.262
0.231
1.52
2.341
0.154
, http://www.100md.com
3
1.66
1.850
0.112
1.90
3.762
0.198
1.51
3.830
0.254
4
1.50
1.829
, 百拇医药
0.122
1.25
3.220
0.258
1.71
2.429
0.142
x±s
0.128±0.0176
0.218±0.0285
0.180±0.4380
0.238±0.027
, 百拇医药
3 讨论
MLX是一种新型的非甾体抗炎药，对慢性风湿性关节炎有抗炎和镇痛效果，对胃肠道作用较弱，是一种很有希望的抗炎镇痛药。
本实验结果说明，大鼠ig 6mg/kg MLX后，96h内药物的胆汁、尿、粪中累积排泄分数分别为0.764%、0.191%、5.098%，MLX在大鼠尿、粪和胆汁中的总排泄量仅为给药量的5%～6%，提示MLX主要在体内代谢消除。
从药物结构看，MLX难溶于水，易溶于乙醚及碱性溶液。因而在提取过程中，对生物样品先用HCl酸化，使之游离，再用乙醚提取。
参考文献
1 D Turck, et al. Clinical Pharmacokinetics of Meloxicam. ArzeimForsch. 1997, 47(I)∶253
2 Schid, et al. Pharmacokinetics and Metabolic Pattern of Meloxicam. Durg Metabol Disposit, 1995,23(11)
(1998年12月1日收稿), 百拇医药