类风湿性关节炎患者血清IL-6、TNF水平变化及其意义探讨
作者：浦月华 董吉祥 胡 吉 韩惠琴 谢 炜 张学光 刘志达
单位：浦月华 苏州市金阊区人民医院内科，苏州，215008；董吉祥 胡 吉 韩惠琴 刘志达 苏州医学院附属二院肾内科；谢 炜 张学光 苏医免疫学教研室
关键词：类风湿性关节炎；IL-6；TNF
苏州医学院学报ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SUZHOU1999年 第19卷 第8期 Vol 摘要 采用细胞生物学方法测定类风湿性关节炎(RA)14例血清IL-6、TNF水平，均显著高于正常对照组(P<0.001)。相关分析显示IL-6与TNF水平变化呈正相关(P<0.01)，IL-6、TNF与血沉亦呈正相关(P<0.05)。认为，IL-6、TNF参与RA的发病，两者在致病中有协同相同；其水平变化与RA的活动性及血沉相关。
中图法分类 R593.2204
, http://www.100md.com
Variation of Serum IL-6 and TNF Rhematoid Arthritis and the Significance
PuYuehua, Dong Jixiang, Hu Ji, et al
Department of Medicince, Suzhou Jinchang People's Hospital, Suzhou, 215008
Abstract Objective To study the serum level of IL-6, TNF in patients with active rheumatoid arthritis (RA) and the significance of this variation. Methods Serum IL-6 and TNF were measured by cytobiological technique in 14 patients with RA, and the comparism was made between their levels in patients and that in the controls. Result The serum levels of IL-6 and TNF (IL-6 414±62U/ml,TNF 305±32U/ml)were significantly higher in all 14 patients than that in the controls (P<0.001).Positive correlation was existed between levels of IL-6 and TNF (P<0.01) as well as between IL-6, TNF and erythrocyte sedimentation rate (P<0.05). Conclusion IL-6 and TNF play a role in the pathogenesis of RA synergically. Their levels are related to the activity of RA and erythrocytc sedimentation rate.
, 百拇医药
Key words rheumatoid arthritis; IL-6; TNF
类风湿性关节炎(RA)的病因尚不完全明了，其发病机制复杂。细胞因子(CK)在其发病中有重要作用。本文报告采用细胞生物学方法检测14例RA患者活动期血清IL-6、TNF的水平，并就其临床意义作初步探讨。
1 材料和方法1.1 研究对象：RA14例，皆符合美国风湿病学会诊断标准，男1例，女13例，年龄43.4±11.3岁。另选择年龄、性别与患者匹配的正常对照组36例。
1.2 主要试剂与材料：RPMI-1640培养液(GIBCO)，小牛血清(杭州产品)；MTT(Sigma产品)；96孔培养板(进口)。
1.3 细胞株及重组品：B9细胞株(IL-6依赖细胞株)。荷兰Aarden LA博士赠送，用含5%人IL-6粗制上清(本室研制)的培养液维持培养；L929细胞株(TNF敏感株)来自美国ACTT，用普通全培养基维持培养；人重组IL-6和TNF均由法国蒙贝利埃医学院Bernard Klein博士赠送。
, 百拇医药
1.4 仪器：DG 3022型酶联免疫检测仪(华东电子管厂产品)。
1.5 IL-6、TNF生物学检测法，参照文献[1]方法。
1.6 结果
1.6.1 RA活动期血清IL-6、TNF水平分别为414±62 U/ml，305±32 U/ml，两者呈正相关，r=0.8371,P<0.01；对照组两者皆<5 U/ml。与RA组差异显著(P皆<0.001)。
1.6.2 RA患者血沉升高，与IL-6、TNF水平呈显著正相关，r=0.6548,P<0.05。
2 讨论 细胞因子是RA炎症和关节损伤的重要介质，许多研究结果显示，细胞因子可能通过介导细胞与细胞之间的相互作用引起组织损伤酶的释放而导致关节损伤，特别是关节软骨基质崩解。骨的吸收破坏很大程度上需要CK的介导。研究表明，CK之间的关系往往表现为多种CK的连续作用、协同作用或拮抗作用，如IL-1和TNF往往同时合成分泌。TNF诱导IL-6的分泌，IL-6则可增强TNF的效用[2，3]。本文结果显示，RA患者活动期外周血IL-6、TNF水平显著升高，且IL-6与TNF水平变化呈正相关，此两个CK与RA患者血沉亦呈正相关。说明IL-6、TNF可能共同参与RA的发病过程，而且在致关节损伤方面可能有协同作用。研究表明，TNF在关节病变中具有：①刺激骨膜细胞和软骨细胞合成PGE2和胶原酶；②引起骨和软骨的吸收破坏，促进成纤维细胞的增生[3，4]。Saxne[3]报告，RA患者的血清和关节液中TNF-α含量均明显升高，并认为TNF水平与血沉及滑液中的细胞数相关，血清中TNF升高可能提示疾病的活动期或严重性。Youn[5]认为，在疾病活动期或进展期，TNF进入外周血流，同时分泌高水平的TNF，导致一系列临床症状及局部关节组织的破坏。而在疾病的慢性期，TNF水平相对较低且较稳定。本文结果亦支持上述看法。
, 百拇医药
IL-6是由T细胞、单核细胞及成纤维细胞等产生的糖蛋白，具有多种生物学功能。其在关节病变中的作用是：①促进活化B细胞增殖，并分化为Ig分泌细胞，这可能与自身抗体的产生有关；②IL-6不能刺激滑漠细胞和软骨细胞合成PGE2和胶原酶，但能诱导肝细胞分泌急性相蛋白，促进Ig的合成，是IL-1和TNF某些生物效应的放大因子；③IL-6可能调节成纤维细胞的增殖[2]。Guerne在RA患者的滑液中检测到高水平IL-6，其水平较同样滑液中IL-1、TNF-α提高幅度大，且IL-6水平增高与疾病的活动程度相关，还与疾病活动的全身变化参数如血沉率相一致。其用免疫组化染色揭示IL-6蛋白主要存在于滑膜纤维母细胞。Waage检测了炎症性关节病和创伤性关节病患者的关节液，结果炎症性的IL-6水平高于创伤性，并认为IL-6水平高低往往与疾病的活动期相关[6]。本文结果显示，RA患者活动期IL-6、TNF-α水平显著升高，并与血沉呈正相关，此提示IL-6、TNF参与了RA的病理过程，并与RA疾病的活动性相关。
, 百拇医药
Hess[7]在RA患者尿液和关节液中检测到特异的TNF-α的抑制因子。这种因子能对抗TNF-α诱导的PGE2合成及人类成纤维细胞的IL-1表达。TNF-α抑制因子能改善关节炎症，可能会象IL-1抑制因子一样用于治疗。有人用CA2(抗TNF-α的单抗)治疗20例RA发现，抗TNF-α单克隆抗体治疗RA在临床上有很好的应用前景[8]。笔者认为，深入研究RA患者体内相关CK水平变化规律，有助于进一步揭示RA的病因和发病机理，并为临床诊断、预后判断及治疗开辟新的途径。
参考文献
1 陈荣珍，等.慢性肾炎患者外周血IL-6、TNF水平变化研究.苏州医学院学报，1993，13(增刊)∶528
2 Guerne PA, et al. Synovium as a source of interleukin 6 in vitro. Contribution to local and systemic manifestations of arthritis. J Clin Invest 1989，83∶585
, 百拇医药
3 Saxne T, et al. Detection of tumor necrosis factor alpha but not tumor necrosis factor beta in rheumatoid arthritis synovial fluid and serum. Arthritis Rheum,1988，31∶1041
4 Meretey K, et al. Study of autoantibodies, natural antibodies and lgE level in four families with rheumatoid arthritis. Z Rheumatol, 1987，46∶189
5 Youcu DE, et al. Characteristics of tumor necrosis factor production in rheumatoid arthritis. Cell lmmunol, 1989，122∶131
, 百拇医药
6 Waage A, et al. Interleukin-6 in synovial fluid from patients with arthritis. Clin lmmunol lmmunopathol, 1989，50∶394
7 Hess EV. Cytokine inhibitors and osteoarthritis. J Rheumatol, 1990，17∶1123
8 Maini RN, et al. Monoclonal anti-TNF alpha antibody as a probe of pathogenesis and therapy of rheumatoid disease. Immunol Rev, 1995，144∶195
(1999年5月4日收稿)
更正：本刊1999年第19卷第2期143页《灌肠装置的改进二则》一文作者名“钱明芬”改为“陈明芬”。
, http://www.100md.com
单位：浦月华 苏州市金阊区人民医院内科，苏州，215008；董吉祥 胡 吉 韩惠琴 刘志达 苏州医学院附属二院肾内科；谢 炜 张学光 苏医免疫学教研室
关键词：类风湿性关节炎；IL-6；TNF
苏州医学院学报ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SUZHOU1999年 第19卷 第8期 Vol 摘要 采用细胞生物学方法测定类风湿性关节炎(RA)14例血清IL-6、TNF水平，均显著高于正常对照组(P<0.001)。相关分析显示IL-6与TNF水平变化呈正相关(P<0.01)，IL-6、TNF与血沉亦呈正相关(P<0.05)。认为，IL-6、TNF参与RA的发病，两者在致病中有协同相同；其水平变化与RA的活动性及血沉相关。
中图法分类 R593.2204
, http://www.100md.com
Variation of Serum IL-6 and TNF Rhematoid Arthritis and the Significance
PuYuehua, Dong Jixiang, Hu Ji, et al
Department of Medicince, Suzhou Jinchang People's Hospital, Suzhou, 215008
Abstract Objective To study the serum level of IL-6, TNF in patients with active rheumatoid arthritis (RA) and the significance of this variation. Methods Serum IL-6 and TNF were measured by cytobiological technique in 14 patients with RA, and the comparism was made between their levels in patients and that in the controls. Result The serum levels of IL-6 and TNF (IL-6 414±62U/ml,TNF 305±32U/ml)were significantly higher in all 14 patients than that in the controls (P<0.001).Positive correlation was existed between levels of IL-6 and TNF (P<0.01) as well as between IL-6, TNF and erythrocyte sedimentation rate (P<0.05). Conclusion IL-6 and TNF play a role in the pathogenesis of RA synergically. Their levels are related to the activity of RA and erythrocytc sedimentation rate.
, 百拇医药
Key words rheumatoid arthritis; IL-6; TNF
类风湿性关节炎(RA)的病因尚不完全明了，其发病机制复杂。细胞因子(CK)在其发病中有重要作用。本文报告采用细胞生物学方法检测14例RA患者活动期血清IL-6、TNF的水平，并就其临床意义作初步探讨。
1 材料和方法1.1 研究对象：RA14例，皆符合美国风湿病学会诊断标准，男1例，女13例，年龄43.4±11.3岁。另选择年龄、性别与患者匹配的正常对照组36例。
1.2 主要试剂与材料：RPMI-1640培养液(GIBCO)，小牛血清(杭州产品)；MTT(Sigma产品)；96孔培养板(进口)。
1.3 细胞株及重组品：B9细胞株(IL-6依赖细胞株)。荷兰Aarden LA博士赠送，用含5%人IL-6粗制上清(本室研制)的培养液维持培养；L929细胞株(TNF敏感株)来自美国ACTT，用普通全培养基维持培养；人重组IL-6和TNF均由法国蒙贝利埃医学院Bernard Klein博士赠送。
, 百拇医药
1.4 仪器：DG 3022型酶联免疫检测仪(华东电子管厂产品)。
1.5 IL-6、TNF生物学检测法，参照文献[1]方法。
1.6 结果
1.6.1 RA活动期血清IL-6、TNF水平分别为414±62 U/ml，305±32 U/ml，两者呈正相关，r=0.8371,P<0.01；对照组两者皆<5 U/ml。与RA组差异显著(P皆<0.001)。
1.6.2 RA患者血沉升高，与IL-6、TNF水平呈显著正相关，r=0.6548,P<0.05。
2 讨论 细胞因子是RA炎症和关节损伤的重要介质，许多研究结果显示，细胞因子可能通过介导细胞与细胞之间的相互作用引起组织损伤酶的释放而导致关节损伤，特别是关节软骨基质崩解。骨的吸收破坏很大程度上需要CK的介导。研究表明，CK之间的关系往往表现为多种CK的连续作用、协同作用或拮抗作用，如IL-1和TNF往往同时合成分泌。TNF诱导IL-6的分泌，IL-6则可增强TNF的效用[2，3]。本文结果显示，RA患者活动期外周血IL-6、TNF水平显著升高，且IL-6与TNF水平变化呈正相关，此两个CK与RA患者血沉亦呈正相关。说明IL-6、TNF可能共同参与RA的发病过程，而且在致关节损伤方面可能有协同作用。研究表明，TNF在关节病变中具有：①刺激骨膜细胞和软骨细胞合成PGE2和胶原酶；②引起骨和软骨的吸收破坏，促进成纤维细胞的增生[3，4]。Saxne[3]报告，RA患者的血清和关节液中TNF-α含量均明显升高，并认为TNF水平与血沉及滑液中的细胞数相关，血清中TNF升高可能提示疾病的活动期或严重性。Youn[5]认为，在疾病活动期或进展期，TNF进入外周血流，同时分泌高水平的TNF，导致一系列临床症状及局部关节组织的破坏。而在疾病的慢性期，TNF水平相对较低且较稳定。本文结果亦支持上述看法。
, 百拇医药
IL-6是由T细胞、单核细胞及成纤维细胞等产生的糖蛋白，具有多种生物学功能。其在关节病变中的作用是：①促进活化B细胞增殖，并分化为Ig分泌细胞，这可能与自身抗体的产生有关；②IL-6不能刺激滑漠细胞和软骨细胞合成PGE2和胶原酶，但能诱导肝细胞分泌急性相蛋白，促进Ig的合成，是IL-1和TNF某些生物效应的放大因子；③IL-6可能调节成纤维细胞的增殖[2]。Guerne在RA患者的滑液中检测到高水平IL-6，其水平较同样滑液中IL-1、TNF-α提高幅度大，且IL-6水平增高与疾病的活动程度相关，还与疾病活动的全身变化参数如血沉率相一致。其用免疫组化染色揭示IL-6蛋白主要存在于滑膜纤维母细胞。Waage检测了炎症性关节病和创伤性关节病患者的关节液，结果炎症性的IL-6水平高于创伤性，并认为IL-6水平高低往往与疾病的活动期相关[6]。本文结果显示，RA患者活动期IL-6、TNF-α水平显著升高，并与血沉呈正相关，此提示IL-6、TNF参与了RA的病理过程，并与RA疾病的活动性相关。
, 百拇医药
Hess[7]在RA患者尿液和关节液中检测到特异的TNF-α的抑制因子。这种因子能对抗TNF-α诱导的PGE2合成及人类成纤维细胞的IL-1表达。TNF-α抑制因子能改善关节炎症，可能会象IL-1抑制因子一样用于治疗。有人用CA2(抗TNF-α的单抗)治疗20例RA发现，抗TNF-α单克隆抗体治疗RA在临床上有很好的应用前景[8]。笔者认为，深入研究RA患者体内相关CK水平变化规律，有助于进一步揭示RA的病因和发病机理，并为临床诊断、预后判断及治疗开辟新的途径。
参考文献
1 陈荣珍，等.慢性肾炎患者外周血IL-6、TNF水平变化研究.苏州医学院学报，1993，13(增刊)∶528
2 Guerne PA, et al. Synovium as a source of interleukin 6 in vitro. Contribution to local and systemic manifestations of arthritis. J Clin Invest 1989，83∶585
, 百拇医药
3 Saxne T, et al. Detection of tumor necrosis factor alpha but not tumor necrosis factor beta in rheumatoid arthritis synovial fluid and serum. Arthritis Rheum,1988，31∶1041
4 Meretey K, et al. Study of autoantibodies, natural antibodies and lgE level in four families with rheumatoid arthritis. Z Rheumatol, 1987，46∶189
5 Youcu DE, et al. Characteristics of tumor necrosis factor production in rheumatoid arthritis. Cell lmmunol, 1989，122∶131
, 百拇医药
6 Waage A, et al. Interleukin-6 in synovial fluid from patients with arthritis. Clin lmmunol lmmunopathol, 1989，50∶394
7 Hess EV. Cytokine inhibitors and osteoarthritis. J Rheumatol, 1990，17∶1123
8 Maini RN, et al. Monoclonal anti-TNF alpha antibody as a probe of pathogenesis and therapy of rheumatoid disease. Immunol Rev, 1995，144∶195
(1999年5月4日收稿)
更正：本刊1999年第19卷第2期143页《灌肠装置的改进二则》一文作者名“钱明芬”改为“陈明芬”。
, http://www.100md.com