雷公藤多甙对慢性肾炎患者外周血IL-6、TNF水平影响的研究
作者：董吉祥 刘志达 韩惠琴 谢 炜 汪 寅 沈华英 石永兵 谢 莹 张学光
单位：董吉祥 刘志达 韩惠琴 汪 寅 沈华英 石永兵 谢 莹 苏州医学院附属二院肾内科，苏州,215004;谢 炜 张学光 免疫学教研室
关键词：慢性肾炎；雷公藤多甙；IL-6；TNF
苏州医学院学报ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SUZHOU1999年 第19卷 第8期 Vol摘要 应用IL-6、TNF的生物学检测测定77例慢性肾炎患者外周血IL-6、TNF水平，并观察经雷公藤多甙(TW)治疗前后的动态变化。结果发现，正常成人组IL-6，TNF均<5mg/L，而CN组分别显著升高(P<0.0001)，且与CN组病情有一定联系。CN组经TW治疗后，IL-6、TNF均显著下降，但仍高于正常对照组，结果表明，IL-6、TNF参与了CN的发病机制，TW对CN患者体内IL-6，TNF有明显的抑制作用，此可能与TW治疗CN的作用机理有关，IL-6、TNF的水平变化可能有助于判断CN病情轻重程度及预后。
, http://www.100md.com
中图法分类 R692.304
Effect of Tripterygium Wilfordii Hook f. on the Serum IL-6 and TNF Levels in Patients with Chronic Nephritis
Dong Jixiang, Liu Zhida, Han Huiqin, et al
Department of Nephrology, the Second Hospital Affiliated to Suzhou Medical College, Suzhou, 215004
Abstract Objective To invetigate the effect of tripterygium wilfordii hook f. (TW) on serum IL-6 and TNF in patients with chronic nephritis(CN). Methods By the bioassay methods of IL-6 and TNF, serum IL-6 and TNF levels were studied in 77 patients by analyzing the levels of IL-6 and TNF before and after the treatment. Results The levels of serium IL-6 and TNF in patients with CN were 300±25U/ml and 454±25U/ml, respectively. Both of them were significantly higher than that in healthy donors (P<0.0001) in the controls in which both concentrations of serum IL-6 and TNF were lower than <5U/ml. After the treatment with TW, the levels of IL-6 and TNF in peripheral blood went down markedly (P<0.01). It was 218±31U/ml for IL-6 and 358±39U/ml for TNF. Conclusion These data showed that IL-6 and TNF play an important role in the pathogenesis of CN. TW can inhibit the levels of IL-6 and TNF in patients with CN. It may be one of the mechanisms, Through which TW play a role in the treatment of CN.
, 百拇医药
Key words chronic nephritis; tripterygium wlffordii hookf; IL-6;TNF
雷公藤多甙(TW)是一种免疫抑制剂，已广泛应用于临床，尤其是用于治疗慢性肾炎(CN)疗效明显，近年来认为，TW可能对体液免疫和细胞免疫都有免疫抑制作用，能对细胞周期多个阶段抑制T细胞增殖[1，2]，但其对IL-6，TNF的作用则未见报道。本文报道应用IL-6，TNF的生物学检测法测定77例CN患者IL-6，TNF的水平，并观察了经TW治疗前后的动态变化，以探讨TW对CN患者IL-6，TNF的影响，从而进一步研究CN的发病机理及TW治疗的作用机理。
1 材料和方法
1.1 对象：正常对照组：40名为体检健康成人，男18名，女22名，年龄34.23±14.59岁。CN组：77例，男35例，女42例，年龄33.3±14.04岁，病程4.5±7.8年(1月～19年)，均为我院住院病例，诊断根据我国1985年全国肾脏病学术会议制定的标准。
, 百拇医药
1.2 试剂与药品：RPMI 1640培养液(美国Gibco)，含10%新生小牛血清(杭州产)，2mmol/L谷氨酰胺，10mmol/L Hepes, 1mmol/L丙酮酸钠，人IL-6粗制上清由本室自制，MTT(瑞士)，重组人IL-6，TNF由法国Klein B博士赠送。雷公藤多甙片(TW)：为江苏泰州制药厂产品。
1.3 细胞系：IL-6依赖细胞株B9细胞(荷兰Aarden LA博士赠送)用含5%人IL-6粗制上清的培养液维持培养，TNF依赖细胞株L929细胞(ACTT)用普通全培养基维持培养。
1.4 IL-6、TNF的生物学活性测定方法，参考文献[3]。
1.5 临床治疗：本组CN病例均以TW治疗为主，辅以常规对症治疗，治疗前、后测IL-6、TNF作自身对照。
2 结果 两组治疗前后外周血IL-6，TNF含量见附表。我们根据患者临床表现及有关实验室检查发现，IL-6>200U/ml，TNF>270U/ml者，病情相对较重，反之则相对较轻。
, 百拇医药
附表 正常组及CN组治疗前后IL-6，TNF水平变化比较(U/ml,
±s)
n
IL-6
TNF
正常对照组
40
<5.0
<5.0
CN治疗前
77
300.0±24.8△△
, 百拇医药
453.9±25.0△△
CN治疗后
77
218.4±31.3△
358.1±38.6△
与正常对照组比较△P<0.001，△△P<0.0001；与治疗前比较，P<0.01
2 讨论 IL-6是细胞因子网络中一种多功能的细胞因子[4～6]，对多种细胞的生长、分化或基因表达都有影响。IL-6可由多种细胞分泌，肾系膜细胞亦可分泌。IL-6与IL-1，IL-8一样对维持机体免疫反应、炎症反应等状态下的生理平衡具有重要作用。若IL-6基因过度表达，则可导致机体免疫性疾病和良性增殖性疾病等。CN是一种自身免疫性疾病，其病理特点是肾小球系膜细胞和间质增生，系膜中有大量Ig沉着，其发病机制复杂，近期资料表明，慢性增生性肾小球肾炎的动物肾小球系膜细胞可持续分泌IL-6，与系膜细胞表面IL-6R 结合，刺激系膜细胞增殖，进一步加剧免疫病理反应，这样形成一条自分泌调节途径的恶性循环，使肾小球病理变化加剧，引起肾小球组织结构及功能异常，因此，IL-6在CN的发病机制中起了重要作用，Ruef[5]等应用抗IL-6抗体，既可抑制系膜细胞分泌IL-6，又可抑制系膜增殖，此进一步表明IL-6在CN的发生、发展及转归中的重要意义。本文实验结果亦进一步证实，CN患者血清中IL-6增加是CN发病机制中的一个重要因素，而且其升高的水平与病情轻重程度有一定的联系。但是何原因起动使IL-6过度表达，尚待进一步研究。本组CN患者TW治疗前IL-6 300.0±24.88U/ml，治后为218.4±31.3U/ml，提示TW不仅具有免疫抑制作用及抗炎作用，其对IL-6亦有明显抑制作用。
, 百拇医药
TNF是单核—巨噬细胞系统产生的一种肽类激素，对人或动物多种肿瘤细胞有细胞毒性作用和细胞静止作用，且也参与机体炎症与免疫反应的调节。近期文献报道[3，7]TNF与肾小球肾炎有关。本文实验结果CN患者TNF水平显著高于正常人，似支持此看法。
Camussi[7]等在兔急性血清病肾炎(ACSS)的基础上注射PHA，发现肾小球系膜细胞TNF合成增多，肾小球病变加重。进一步研究发现，单独注射小剂量TNF可使狼疮性肾炎、肾毒血清性肾炎、ACSS肾炎的肾小球损伤加重。推测TNF可通过激活肾小球内皮细胞、系膜细胞和浸润的炎症细胞，造成肾小球损伤。有人认为，TNF可增加肾小球系膜细胞IL-8及单核细胞趋化蛋白I的mRNA转录，促进人或转基因鼠IL-6释放，加速增生性肾小球肾炎的进展。本文报告CN患者TNF水平显著升高，且与病情轻重程度有一定的联系。经TW治疗后TNF水平明显下降，此提示TW可能具有抑制CN患者体内TNF生成作用。
, 百拇医药
本文结果表明，TW对CN患者外周血IL-6，TNF有明显的抑制作用，经TW治疗后外周血IL-6，TNF水平显著下降，但CN患者即使处于病程稳定期，其IL-6，TNF水平仍显著高于正常人，此提示TW仅能使病情缓解，而不能治愈。有待寻找疗效更佳的免疫调节剂治疗；同时还表明，CN患者必须坚持长期的治疗，不可过早地减量或停止治疗。
参考文献
1 陈香美，等.利用流式细胞仪探讨雷公藤多甙对小鼠细胞免疫功能的影响.免疫学杂志，1992，8∶145
2 朱立平，等.雷公藤总甙在细胞周期多个阶段抑制T细胞增殖.中国免疫学杂志，1992，8∶379
3 陈永珍，等.慢性肾炎患者外周血IL-6.TNF水平变化研究.苏州医学院学报，1993，13(增刊)∶528
, 百拇医药 4 Zhang XG, et al. Interleukin-6 is a potent myeloma-cell growth factor inpatients with agressive multiple myeloma. Blood, 1989,74∶11
5 Ruef C, et al. Interleukin-6 is an autocrine growth factor for mesangial cells. Kidney Int, 1990,38∶249
6 Houssiau F, et al. Disinct roles of IL-1 and IL-6 in human T cells activation. J Immunol, 1989,143∶2520
7 Camussi G, et al. Effect of leukocyte stimulation on rabbit immune complex glomerulonephritis. Kidney Int, 1990,38∶1047
8 曹雪涛，叶天星.可溶性肿瘤坏死因子受体及其临床意义.国外医学：免疫学分册，1994；11∶57, http://www.100md.com
单位：董吉祥 刘志达 韩惠琴 汪 寅 沈华英 石永兵 谢 莹 苏州医学院附属二院肾内科，苏州,215004;谢 炜 张学光 免疫学教研室
关键词：慢性肾炎；雷公藤多甙；IL-6；TNF
苏州医学院学报ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SUZHOU1999年 第19卷 第8期 Vol摘要 应用IL-6、TNF的生物学检测测定77例慢性肾炎患者外周血IL-6、TNF水平，并观察经雷公藤多甙(TW)治疗前后的动态变化。结果发现，正常成人组IL-6，TNF均<5mg/L，而CN组分别显著升高(P<0.0001)，且与CN组病情有一定联系。CN组经TW治疗后，IL-6、TNF均显著下降，但仍高于正常对照组，结果表明，IL-6、TNF参与了CN的发病机制，TW对CN患者体内IL-6，TNF有明显的抑制作用，此可能与TW治疗CN的作用机理有关，IL-6、TNF的水平变化可能有助于判断CN病情轻重程度及预后。
, http://www.100md.com
中图法分类 R692.304
Effect of Tripterygium Wilfordii Hook f. on the Serum IL-6 and TNF Levels in Patients with Chronic Nephritis
Dong Jixiang, Liu Zhida, Han Huiqin, et al
Department of Nephrology, the Second Hospital Affiliated to Suzhou Medical College, Suzhou, 215004
Abstract Objective To invetigate the effect of tripterygium wilfordii hook f. (TW) on serum IL-6 and TNF in patients with chronic nephritis(CN). Methods By the bioassay methods of IL-6 and TNF, serum IL-6 and TNF levels were studied in 77 patients by analyzing the levels of IL-6 and TNF before and after the treatment. Results The levels of serium IL-6 and TNF in patients with CN were 300±25U/ml and 454±25U/ml, respectively. Both of them were significantly higher than that in healthy donors (P<0.0001) in the controls in which both concentrations of serum IL-6 and TNF were lower than <5U/ml. After the treatment with TW, the levels of IL-6 and TNF in peripheral blood went down markedly (P<0.01). It was 218±31U/ml for IL-6 and 358±39U/ml for TNF. Conclusion These data showed that IL-6 and TNF play an important role in the pathogenesis of CN. TW can inhibit the levels of IL-6 and TNF in patients with CN. It may be one of the mechanisms, Through which TW play a role in the treatment of CN.
, 百拇医药
Key words chronic nephritis; tripterygium wlffordii hookf; IL-6;TNF
雷公藤多甙(TW)是一种免疫抑制剂，已广泛应用于临床，尤其是用于治疗慢性肾炎(CN)疗效明显，近年来认为，TW可能对体液免疫和细胞免疫都有免疫抑制作用，能对细胞周期多个阶段抑制T细胞增殖[1，2]，但其对IL-6，TNF的作用则未见报道。本文报道应用IL-6，TNF的生物学检测法测定77例CN患者IL-6，TNF的水平，并观察了经TW治疗前后的动态变化，以探讨TW对CN患者IL-6，TNF的影响，从而进一步研究CN的发病机理及TW治疗的作用机理。
1 材料和方法
1.1 对象：正常对照组：40名为体检健康成人，男18名，女22名，年龄34.23±14.59岁。CN组：77例，男35例，女42例，年龄33.3±14.04岁，病程4.5±7.8年(1月～19年)，均为我院住院病例，诊断根据我国1985年全国肾脏病学术会议制定的标准。
, 百拇医药
1.2 试剂与药品：RPMI 1640培养液(美国Gibco)，含10%新生小牛血清(杭州产)，2mmol/L谷氨酰胺，10mmol/L Hepes, 1mmol/L丙酮酸钠，人IL-6粗制上清由本室自制，MTT(瑞士)，重组人IL-6，TNF由法国Klein B博士赠送。雷公藤多甙片(TW)：为江苏泰州制药厂产品。
1.3 细胞系：IL-6依赖细胞株B9细胞(荷兰Aarden LA博士赠送)用含5%人IL-6粗制上清的培养液维持培养，TNF依赖细胞株L929细胞(ACTT)用普通全培养基维持培养。
1.4 IL-6、TNF的生物学活性测定方法，参考文献[3]。
1.5 临床治疗：本组CN病例均以TW治疗为主，辅以常规对症治疗，治疗前、后测IL-6、TNF作自身对照。
2 结果 两组治疗前后外周血IL-6，TNF含量见附表。我们根据患者临床表现及有关实验室检查发现，IL-6>200U/ml，TNF>270U/ml者，病情相对较重，反之则相对较轻。
, 百拇医药
附表 正常组及CN组治疗前后IL-6，TNF水平变化比较(U/ml,
±s)n
IL-6
TNF
正常对照组
40
<5.0
<5.0
CN治疗前
77
300.0±24.8△△
, 百拇医药
453.9±25.0△△
CN治疗后
77
218.4±31.3△
358.1±38.6△
与正常对照组比较△P<0.001，△△P<0.0001；与治疗前比较，P<0.01
2 讨论 IL-6是细胞因子网络中一种多功能的细胞因子[4～6]，对多种细胞的生长、分化或基因表达都有影响。IL-6可由多种细胞分泌，肾系膜细胞亦可分泌。IL-6与IL-1，IL-8一样对维持机体免疫反应、炎症反应等状态下的生理平衡具有重要作用。若IL-6基因过度表达，则可导致机体免疫性疾病和良性增殖性疾病等。CN是一种自身免疫性疾病，其病理特点是肾小球系膜细胞和间质增生，系膜中有大量Ig沉着，其发病机制复杂，近期资料表明，慢性增生性肾小球肾炎的动物肾小球系膜细胞可持续分泌IL-6，与系膜细胞表面IL-6R 结合，刺激系膜细胞增殖，进一步加剧免疫病理反应，这样形成一条自分泌调节途径的恶性循环，使肾小球病理变化加剧，引起肾小球组织结构及功能异常，因此，IL-6在CN的发病机制中起了重要作用，Ruef[5]等应用抗IL-6抗体，既可抑制系膜细胞分泌IL-6，又可抑制系膜增殖，此进一步表明IL-6在CN的发生、发展及转归中的重要意义。本文实验结果亦进一步证实，CN患者血清中IL-6增加是CN发病机制中的一个重要因素，而且其升高的水平与病情轻重程度有一定的联系。但是何原因起动使IL-6过度表达，尚待进一步研究。本组CN患者TW治疗前IL-6 300.0±24.88U/ml，治后为218.4±31.3U/ml，提示TW不仅具有免疫抑制作用及抗炎作用，其对IL-6亦有明显抑制作用。
, 百拇医药
TNF是单核—巨噬细胞系统产生的一种肽类激素，对人或动物多种肿瘤细胞有细胞毒性作用和细胞静止作用，且也参与机体炎症与免疫反应的调节。近期文献报道[3，7]TNF与肾小球肾炎有关。本文实验结果CN患者TNF水平显著高于正常人，似支持此看法。
Camussi[7]等在兔急性血清病肾炎(ACSS)的基础上注射PHA，发现肾小球系膜细胞TNF合成增多，肾小球病变加重。进一步研究发现，单独注射小剂量TNF可使狼疮性肾炎、肾毒血清性肾炎、ACSS肾炎的肾小球损伤加重。推测TNF可通过激活肾小球内皮细胞、系膜细胞和浸润的炎症细胞，造成肾小球损伤。有人认为，TNF可增加肾小球系膜细胞IL-8及单核细胞趋化蛋白I的mRNA转录，促进人或转基因鼠IL-6释放，加速增生性肾小球肾炎的进展。本文报告CN患者TNF水平显著升高，且与病情轻重程度有一定的联系。经TW治疗后TNF水平明显下降，此提示TW可能具有抑制CN患者体内TNF生成作用。
, 百拇医药
本文结果表明，TW对CN患者外周血IL-6，TNF有明显的抑制作用，经TW治疗后外周血IL-6，TNF水平显著下降，但CN患者即使处于病程稳定期，其IL-6，TNF水平仍显著高于正常人，此提示TW仅能使病情缓解，而不能治愈。有待寻找疗效更佳的免疫调节剂治疗；同时还表明，CN患者必须坚持长期的治疗，不可过早地减量或停止治疗。
参考文献
1 陈香美，等.利用流式细胞仪探讨雷公藤多甙对小鼠细胞免疫功能的影响.免疫学杂志，1992，8∶145
2 朱立平，等.雷公藤总甙在细胞周期多个阶段抑制T细胞增殖.中国免疫学杂志，1992，8∶379
3 陈永珍，等.慢性肾炎患者外周血IL-6.TNF水平变化研究.苏州医学院学报，1993，13(增刊)∶528
, 百拇医药 4 Zhang XG, et al. Interleukin-6 is a potent myeloma-cell growth factor inpatients with agressive multiple myeloma. Blood, 1989,74∶11
5 Ruef C, et al. Interleukin-6 is an autocrine growth factor for mesangial cells. Kidney Int, 1990,38∶249
6 Houssiau F, et al. Disinct roles of IL-1 and IL-6 in human T cells activation. J Immunol, 1989,143∶2520
7 Camussi G, et al. Effect of leukocyte stimulation on rabbit immune complex glomerulonephritis. Kidney Int, 1990,38∶1047
8 曹雪涛，叶天星.可溶性肿瘤坏死因子受体及其临床意义.国外医学：免疫学分册，1994；11∶57, http://www.100md.com