正交设计法研究久益烧伤膏最佳提取工艺
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前卫药学杂志
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正交设计法研究久益烧伤膏最佳提取工艺
申庆亮
(91医院 兖州272100)
摘要 目的：研究久益烧伤膏最佳提取工艺。方法：用正交设计法考察提取温度、保温时间、浸泡时间3个因素。每个因素确定3个水平。结果：浸泡时间为最重要的因素，其次为保温时间，而提取温度没有大的影响，各因素水平为A2 B3 D2。结论：最佳方案是取以上10味。除冰片、樟脑外，其余黄连、丹皮等八味，酌予碎断，加入香油，浸泡2h，加热至170℃左右，保温20min，去渣，滤过，另加峰蜡适量(每油10g加蜂蜡1~1.2g)，使熔化，滤过，待温，不断搅拌下加入冰片、樟脑，继续搅拌至室温，即得。
, 百拇医药
关键词 正交设计；久益烧伤膏；提取工艺；差示光谱
久益烧伤膏是解放军第91医院烧伤科与济宁市久益中药研究所联合研制的用于治疗烧伤烫伤的外用药物。为了保证制剂质量，进行了提取工艺的研究。
1 实验材料
1.1 牡丹皮、黄连等中药，均符合中国药典(1995年版)一部有关规定。
1.2 丹皮酚对照品(中国药品生物制品检定所提供，0708—9003)
1.3 紫外分光光度计(HP8453系统，美国惠普公司生产)
2 正交设计
2.1 因素水平的确定：本新药采用传统油炸工艺。重点考察影响比较大的提取温度、保温时间、浸泡时间3个因素，每个因素确定3个水平，列因素-水平表如表1。
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2.2 正交设计表的选择选择L9(34)表
2.3 正交试验实施方案见表2。
3 实验方法
3.1 样品的制备取以上10味，除冰片、樟脑外，其余黄连、丹皮等八味，酌予碎断，加入香油内浸泡规定的时间，加热煎炸，保持规定的温度、保温规定的时间，去渣，滤过，另加峰蜡(每油10g加蜂蜡1~1.2g)，熔化，待温，加入冰片、樟脑，搅拌至室温，即得。
3.2 含量测定
3.2.1 对照品溶液的制备；精密称取丹皮酚对照品16.5mg，置100ml量瓶中，加乙醇溶解并稀释到刻度，摇匀。(0.165mg/ml)
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3.2.2 取对照品溶液1.0、1.5、2.0、2.5、3ml，各2份，置25ml量瓶中，一份加0.01mol/L氢氧化钠溶液至刻度，一份加水至刻度，摇匀。置紫外分光光度计于350nm波长范围内测定吸收度。结果见表3。
以丹皮酚重量为横坐标，吸收度为纵坐标作图，得回归方程：
C= 2.3963A - 0.0049 r=0.9989。
3.2.3 样品测定精密称取样品约2g，置250ml三角瓶内，加水200ml，加热，收集蒸馏液100ml。取25ml量瓶，加1mol/L氢氧化钠溶液0.25ml，加蒸馏液至刻度，摇匀，作为供试品液，于350nm波长处分别测定蒸馏及供试品吸收度，计算△A，从标准曲线读出丹皮酚的重量，计算，结果见表2。
4 结果分析
, http://www.100md.com 各因素影响大小顺序为：D>B>A，各因素水平为A2B3D2。
5 结论
最佳提取工艺为：取以上10味，除冰片、樟脑外，其余丹皮等八味，酌予醉断，加入香油，浸泡2小时，加热至170℃左右，保温20分钟，去渣，滤过，另加蜂蜡适量(每油10g加蜂蜡1~1.2g)，使熔化，滤过，待温，不断搅拌下加入冰片、樟脑，继续搅拌至室温，即得。
6 讨论
6.1 本新药是以牡丹皮、黄连、紫草、黄柏、当归等中药组成。丹皮为主药之一，丹皮的有效成分为丹皮酚。故选择测定丹皮酚的含量作为制剂的质量控制指标。
6.2 丹皮酚的含量测定方法很多。高效液相色谱法[1—3]；气相色谱法[2]，毛细管气相色谱法[4]；直接蒸发—高分辨率气相色谱法[5]；闪蒸—气相色谱法[6]；薄层扫描法[7]；醇浸出—紫外分光光度法[8]等方法。但是，本制剂中含有冰片、樟脑等挥发性成分，均可以同时为水蒸汽所蒸馏。而且，紫外吸收特征于丹皮酚相同，难以测定。高效液相色谱法测定，多种条件测定，色谱行为不理想。采用差示光谱法测定，丹皮酚在碱性条件下，在348nm波长处产生特征吸收峰，而且空白样品在此波长处没有特征吸收，故可用差示光谱法测定，避免了冰片等成分的干扰。
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6.3 本方法操作简便，普通紫外分光光度计可以完成。适用与医院制剂质量控制及生产单位快速测定。
参 考 文 献
1 房杏春.等.HPLC法测定丹皮中丹皮酚的含量，中国药科大学学报，1989，20(2)：109
2 原田正敏，他.繁用生药四成分定量.东京：广川书店，1989，306~336
3 丁安伟.等.丹皮炭中丹皮酚含量的高效液相色谱测定中国中药杂志，1996，21(1)：23
4 段玲.等.毛细管气相色谱法测定牡丹皮中丹皮酚的含量.中国药科大学学报
5 房杏春等直接蒸发—高分辨率气相色谱分析牡丹皮和六味地黄丸中丹皮酚的含量. 国药科大学学报，1989，20(6)：370
6 萧红.等.闪蒸—气相色谱法对丹皮及六味地黄丸中丹皮酚的微量分析.药物分析杂志，1989，9(4)：225
7 张兰珍.等.野生、栽培徐长卿中丹皮酚含量测定的研究.中草药，1989，20(1)：15
8 刘信顺.等.醇浸出—紫外分光光度法测定牡丹皮中丹皮酚的含量.中药材，1985，(2)：22, http://www.100md.com