冬虫夏草多糖的含量测定
作者：白云娥 李青山 王毅 刘许媛 漆小梅
单位：白云娥(山西医科大学药学系中草药教研室 太原 030001)；李青山(山西医科大学药学系中草药教研室 太原 030001)；王毅(山西医科大学药学系中草药教研室 太原 030001)；刘许媛(山西医科大学药学系中草药教研室 太原 030001)；漆小梅(山西医科大学药学系中草药教研室 太原 030001)
关键词：冬虫夏草；多糖类；中药理化鉴定；比色法
山西医科大学学报000214 摘要： 目的 测定冬虫夏草中多糖的含量。方法 用硫酸-蒽酮比色法于波长624 nm处测定其含量。结果 冬虫夏草多糖含量为42.0%(n=5，以粗多糖中多糖含量计算)，平均加样回收率为99.2%，RSD=2.3%。结论 该法测定操作简单、准确，重现性、稳定性好。多糖的含量测定可以为冬虫夏草的应用提供一基础性依据。
, 百拇医药
中图分类号： R284.1 文献标识码： A
文章编号：1007-6611(2000)02-0129-02
冬虫夏草为麦角菌科冬虫夏草菌[Cordyceps sinensis (Burk)Sacc]，寄生在蝙蝠蛾科昆虫蝙蝠蛾越冬幼虫体上的子座与虫体的复合体。性平，味甘。能补肺益肾，止血化痰[1]，有文献报道虫草多糖有提高机体免疫功能，抑肿瘤作用[2]，但未见有对冬虫夏草中多糖含量的测定，为此我们对其中多糖的含量进行了测定。
1 仪器与试药
UV-260(日本岛津自记分光光度计)；D-无水葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所提供)；冬虫夏草粗多糖(灰白色粉末，本室提供)；蒽酮试剂(自配)；98%硫酸；其他试剂均为分析纯。
, 百拇医药
2 试液的制备
2.1 对照品液 精密称取105 ℃干燥至恒重的D-无水葡萄糖5.0 mg，于25 ml容量瓶中加蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2 供试品液 精密称取冬虫夏草粗多糖15.0 mg，用蒸馏水溶解，放50 ml容量瓶中定容，摇匀，即得。
3 含量测定方法
3.1 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0 ml，分别置10 ml容量瓶中，用蒸馏水定容、摇匀。再分别精密吸取1.0 ml置干燥具塞试管中，各加蒽酮试剂0.5 ml和浓硫酸3.0 ml，立即摇匀，放置，冷却至室温。以1.0 ml蒸馏水加0.5 ml蒽酮试剂和3.0 ml浓硫酸为空白，在λmax=624 nm处测定其吸收度，以A对葡萄糖浓度C回归，得方程：C＝0.056 4A+0.001 9，r=0.998 8。
, 百拇医药
3.2 加样回收率试验 精密称取已知含量的粗多糖适量(5份)，分别精密加入一定量的D-无水葡萄糖，用蒸馏水定容，自标准曲线项下“吸取1.0 ml……”起，按标准曲线项操作，依法测定，结果见表1。
表1 冬虫夏草多糖回收率 (n=5) 投入量(μg)
测得量(μg)
回收率(%)
41.260
40.478
98.10
41.260
40.026
97.01
, 百拇医药
41.260
40.308
97.69
41.260
41.662
100.97
41.260
42.170
102.20
(%)=99.2 RSD=0.023
3.3 精密度实验 取同一供试液5份，按标准曲线项下操作，结果RSD＝2.5%。
, 百拇医药
3.4 稳定性实验 精密吸取供试液，按标准曲线项下操作，于不同时间内测其吸收度，在0，15，30，45，60，75，90，105，120 min时间，吸收度分别为0.623，0.629，0.630，0.621，0.625，0.635，0.650，0.622，0.620。结果表明本法测定多糖在2 h内稳定RSD=0.015 1。
3.5 样品测定 精密吸取供试液3.0 ml，用蒸馏水定容于10 ml容量瓶中，摇匀。再精密吸取1.0 ml，按标准曲线项下“精密吸取1.0 ml……”开始操作，按下式计算粗多糖中多糖的含量。
式中：A为吸光度，m为样品质量，单位mg。
结果5份样品的A值分别为：0.623，0.627，0.646，0.617，0.656。A为0.636，RSD为2.5%，多糖含量为42.0%。
4 讨论
, 百拇医药
4.1 本法操作时，必须严格、小心、快速。特别是在加浓硫酸时，防浓硫酸溅出。
4.2 实验时发现室内温度和湿度，对实验结果有影响，以湿度低于42%、温度20 ℃为佳。本法操作简便，为多糖的测定提供了一种新方法，同时也为冬虫夏草的进一步研究提供了一可靠的依据。
国家自然科学基金和山西省归国人员基金资助项目
作者简介：白云娥，女，1966年9月生，本科，讲师
参考文献：
[1] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典.一部[M].广州：化学工业出版社,广东科技出版社,1995.82～83.
[2] 章灵华，肖培根.药用真菌中生物活性多糖的研究进展[J].中成药，1992，23(1)：98.
收稿日期：1999-09-13, 百拇医药
单位：白云娥(山西医科大学药学系中草药教研室 太原 030001)；李青山(山西医科大学药学系中草药教研室 太原 030001)；王毅(山西医科大学药学系中草药教研室 太原 030001)；刘许媛(山西医科大学药学系中草药教研室 太原 030001)；漆小梅(山西医科大学药学系中草药教研室 太原 030001)
关键词：冬虫夏草；多糖类；中药理化鉴定；比色法
山西医科大学学报000214 摘要： 目的 测定冬虫夏草中多糖的含量。方法 用硫酸-蒽酮比色法于波长624 nm处测定其含量。结果 冬虫夏草多糖含量为42.0%(n=5，以粗多糖中多糖含量计算)，平均加样回收率为99.2%，RSD=2.3%。结论 该法测定操作简单、准确，重现性、稳定性好。多糖的含量测定可以为冬虫夏草的应用提供一基础性依据。
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中图分类号： R284.1 文献标识码： A
文章编号：1007-6611(2000)02-0129-02
冬虫夏草为麦角菌科冬虫夏草菌[Cordyceps sinensis (Burk)Sacc]，寄生在蝙蝠蛾科昆虫蝙蝠蛾越冬幼虫体上的子座与虫体的复合体。性平，味甘。能补肺益肾，止血化痰[1]，有文献报道虫草多糖有提高机体免疫功能，抑肿瘤作用[2]，但未见有对冬虫夏草中多糖含量的测定，为此我们对其中多糖的含量进行了测定。
1 仪器与试药
UV-260(日本岛津自记分光光度计)；D-无水葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所提供)；冬虫夏草粗多糖(灰白色粉末，本室提供)；蒽酮试剂(自配)；98%硫酸；其他试剂均为分析纯。
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2 试液的制备
2.1 对照品液 精密称取105 ℃干燥至恒重的D-无水葡萄糖5.0 mg，于25 ml容量瓶中加蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2 供试品液 精密称取冬虫夏草粗多糖15.0 mg，用蒸馏水溶解，放50 ml容量瓶中定容，摇匀，即得。
3 含量测定方法
3.1 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0 ml，分别置10 ml容量瓶中，用蒸馏水定容、摇匀。再分别精密吸取1.0 ml置干燥具塞试管中，各加蒽酮试剂0.5 ml和浓硫酸3.0 ml，立即摇匀，放置，冷却至室温。以1.0 ml蒸馏水加0.5 ml蒽酮试剂和3.0 ml浓硫酸为空白，在λmax=624 nm处测定其吸收度，以A对葡萄糖浓度C回归，得方程：C＝0.056 4A+0.001 9，r=0.998 8。
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3.2 加样回收率试验 精密称取已知含量的粗多糖适量(5份)，分别精密加入一定量的D-无水葡萄糖，用蒸馏水定容，自标准曲线项下“吸取1.0 ml……”起，按标准曲线项操作，依法测定，结果见表1。
表1 冬虫夏草多糖回收率 (n=5) 投入量(μg)
测得量(μg)
回收率(%)
41.260
40.478
98.10
41.260
40.026
97.01
, 百拇医药
41.260
40.308
97.69
41.260
41.662
100.97
41.260
42.170
102.20
(%)=99.2 RSD=0.023
3.3 精密度实验 取同一供试液5份，按标准曲线项下操作，结果RSD＝2.5%。
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3.4 稳定性实验 精密吸取供试液，按标准曲线项下操作，于不同时间内测其吸收度，在0，15，30，45，60，75，90，105，120 min时间，吸收度分别为0.623，0.629，0.630，0.621，0.625，0.635，0.650，0.622，0.620。结果表明本法测定多糖在2 h内稳定RSD=0.015 1。
3.5 样品测定 精密吸取供试液3.0 ml，用蒸馏水定容于10 ml容量瓶中，摇匀。再精密吸取1.0 ml，按标准曲线项下“精密吸取1.0 ml……”开始操作，按下式计算粗多糖中多糖的含量。
式中：A为吸光度，m为样品质量，单位mg。
结果5份样品的A值分别为：0.623，0.627，0.646，0.617，0.656。A为0.636，RSD为2.5%，多糖含量为42.0%。
4 讨论
, 百拇医药
4.1 本法操作时，必须严格、小心、快速。特别是在加浓硫酸时，防浓硫酸溅出。
4.2 实验时发现室内温度和湿度，对实验结果有影响，以湿度低于42%、温度20 ℃为佳。本法操作简便，为多糖的测定提供了一种新方法，同时也为冬虫夏草的进一步研究提供了一可靠的依据。
国家自然科学基金和山西省归国人员基金资助项目
作者简介：白云娥，女，1966年9月生，本科，讲师
参考文献：
[1] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典.一部[M].广州：化学工业出版社,广东科技出版社,1995.82～83.
[2] 章灵华，肖培根.药用真菌中生物活性多糖的研究进展[J].中成药，1992，23(1)：98.
收稿日期：1999-09-13, 百拇医药
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