常见STD的实验检查和质控
作者：唐书谦 叶庆佾
单位：第三军医大学西南医院皮肤科 重庆 400038
关键词：
重庆医学000234 STD病原体或血清学检查，各地所用的实验诊断方法基本一样 ，但阳性率却有差异，其原因有多种[1，2]，如取材、染色方法、技术操作的正规 与熟练程度、所用试剂的特异性和稳定性，以及所用试剂的批号等均有一定的关系。以下是 对取材、病原体培养、染色和血清学检查等方法的几点看法，供同行参考。
1 取材方法[3，4]应重视以下几点
1.1 淋菌直接镜检和培养 淋病患者多合并有衣原体、支原体等感染，常 多项检查指标同时要求取材，如直接检查、培养检查、PCR检查、或支原体和衣原体也同时 取材等。同一个部位多次取材，常取不到足够的标本，影响检查的阳性率，而且对病人的尿 道粘膜也易造成损伤，病人难以接受。我们认为：男性尿道取材不应在同一时间内连续多次 取材，以分时、分次采取为宜，可考虑依标本的需要隔1～2小时后，或次日再取1～2项指标 较好。
, 百拇医药
1.2 尿道取材，应注意插入尿道的深度。男性标本：应插入前尿 道2～4cm。其次要争取病人合作，解除病人的怕痛或恐惧感。女性标本：从宫颈和尿道口同 时分别取材，能提高检查阳性率。用窥阴器取材时，应避免使用如石蜡油润滑剂等影响淋菌 培养生长的物质。
1.3 支原体和衣原体均为细胞内病原体，所取标本应含有一定量上皮样细 胞，否则可造成假阴性延误诊断。
1.4 检查阴道滴虫，棉拭子不能干燥 ，应立即涂片检查。冬季最好保持标本的一定温度，以有助于滴虫的活动，便于观察。
1.5 梅毒标本暗视野检查 应尽量采取病损组织液；载物片要洁净，厚度 小于1mm。暗视野观察后的标本，可固定后留作其它如银染色法等检查，有利于进一步观察 证实。
1.6 衣原体培养标本，未及时接种可置5℃存放；但超过18小时应 存于-70℃；如仅存于-20℃，约90%衣原体可死亡。
, 百拇医药
1.7 尿液(中段尿为宜)、CSF等体液标本，应离心沉淀后接种或涂片阳性率 较高。
2 染色观察注意以下几点
2.1 涂片不能太厚 淋菌棉拭子涂片，应在玻片上轻滚动而不能用力涂， 有利于观察菌体位于细胞内或外。标本固定时加温不能太高，以防细胞固缩或蛋白变性。
2.2 淋菌革兰氏染色 染液配制和染色程序应标准化，严防染液污染、挥 发变干或发生沉淀，误导检查结果。
2.3 免疫组化染色(如酶标、金标法等) 同类抗体厂家甚多，应注意抗体 的特异性和敏感性，有利于提高检查质量。
2.4 注意同一染色或涂片可同时观察几种检查结果，如淋菌涂片革兰氏染 色，可同时观察到念珠菌感染；阴道滴虫涂片，同时可观察到霉菌、线索细胞等。
, 百拇医药
3 病原菌培养
3.1 淋球菌培养 注意恒定准确的培养温度；注意冬天取材、培养基保温 对淋菌生长的影响；离实验室较远，可将标本取材接种后保温送实验室，可提高培养阳性率 。
3.2 支原体培养 应强调培养前滤菌接种和培养出现反应后再次通过滤菌 二次接种，以避免染菌污染所产生的假阳性反应。
3.3 服用过抗生素或新近用过某些阴道制剂的尿液、精液等标本不宜作培 养用。
4 STD血清学检查[5]
4.1 梅毒非特异性血清学检查，如RPR等试验，应注意试剂的特异性和敏感 性，要求操作正规、定量准确。阳性应进行特异性(如荧光密螺旋体吸附试验)确诊试验，并 结合临床综合考虑确诊。
, 百拇医药
4.2 注意排除技术性和生物性的假阳性。据报道估计技术性假阳性可达25% ，生物性假阳性比较复杂一些，除少数其他螺旋体感染(如品他)可能引起真阳性外，主要见 于非梅毒螺旋体感染性疾病(如麻疹等)和常见的一些慢性疾病，如红斑狼疮、麻风(可高达4 0%)等。作出阳性结果时，应对病史有详细了解，以利于提高诊断的准确性。
4.3 临床考虑一期梅毒，而暗视野检查阴性，建议二天内再复查2次。如果 血清学检查阴性，建议4周后再复查一次较准确。
4.4 HIV检查 除注意试剂特异和敏感性外，先取初筛试验(如EIA)，待检 查阳性后做确诊试验证明，如免疫印迹(WB)等。
4.5 血清试验滴度与疾 病活度有关，定性试验阳性后再作定量试验，有利于评价疗效。
4.6 神经梅毒的诊断，不能作单一的血清学试验，应结合CSF白细胞计数和 CSF-血清学试验，必要时可用FTA-ABS等试验综合考虑确诊。
, 百拇医药
5 STD患者PCR检查
现根据卫生部文件，PCR检查法一般不作为临床诊断依据，只能作为科学研究，但对HSV感染 有时可用PCR。
6 关于购买STD试剂盒问题
目前推销厂家较多，关键是试剂的特异性、稳定性，抗体效价有时与保存有关。新购抗体用 前均应预试验，确保质量。
7 防止交叉感染应注意以下二点
7.1 梅毒血清试验测试卡片，使用完应消毒处理后再丢掉。
7.2 工作人员应戴手套，术后洗手；凡用后污染物不随意丢放，以免自身 或交叉感染。■
参考文献：
, 百拇医药
[1]邵长庚.关于性传播疾病诊断标准的制定与应用.中华皮肤科杂志，1995，28(3) ：139
[2]王千秋，邵长庚.关于性病诊断标准的修订意见.中华皮肤科杂志，1998，31(2) ：202
[3]叶干运，徐文严，邵长庚.性播疾病.第1版，南京：江苏科学技术出版社，1988 ：157
[4]乐嘉豫.性病实验诊断的应用与质控《性传播疾病诊断与预防》.第1版，广东： 广东科技出版社，1996：378
[5]龚匡隆，尤永燕，邵长庚.梅毒血清学试验的质量控制与质量保证.性传播疾 病诊断与预防.第1版.广东：广东科技出版社，1996：412, 百拇医药
单位：第三军医大学西南医院皮肤科 重庆 400038
关键词：
重庆医学000234 STD病原体或血清学检查，各地所用的实验诊断方法基本一样 ，但阳性率却有差异，其原因有多种[1，2]，如取材、染色方法、技术操作的正规 与熟练程度、所用试剂的特异性和稳定性，以及所用试剂的批号等均有一定的关系。以下是 对取材、病原体培养、染色和血清学检查等方法的几点看法，供同行参考。
1 取材方法[3，4]应重视以下几点
1.1 淋菌直接镜检和培养 淋病患者多合并有衣原体、支原体等感染，常 多项检查指标同时要求取材，如直接检查、培养检查、PCR检查、或支原体和衣原体也同时 取材等。同一个部位多次取材，常取不到足够的标本，影响检查的阳性率，而且对病人的尿 道粘膜也易造成损伤，病人难以接受。我们认为：男性尿道取材不应在同一时间内连续多次 取材，以分时、分次采取为宜，可考虑依标本的需要隔1～2小时后，或次日再取1～2项指标 较好。
, 百拇医药
1.2 尿道取材，应注意插入尿道的深度。男性标本：应插入前尿 道2～4cm。其次要争取病人合作，解除病人的怕痛或恐惧感。女性标本：从宫颈和尿道口同 时分别取材，能提高检查阳性率。用窥阴器取材时，应避免使用如石蜡油润滑剂等影响淋菌 培养生长的物质。
1.3 支原体和衣原体均为细胞内病原体，所取标本应含有一定量上皮样细 胞，否则可造成假阴性延误诊断。
1.4 检查阴道滴虫，棉拭子不能干燥 ，应立即涂片检查。冬季最好保持标本的一定温度，以有助于滴虫的活动，便于观察。
1.5 梅毒标本暗视野检查 应尽量采取病损组织液；载物片要洁净，厚度 小于1mm。暗视野观察后的标本，可固定后留作其它如银染色法等检查，有利于进一步观察 证实。
1.6 衣原体培养标本，未及时接种可置5℃存放；但超过18小时应 存于-70℃；如仅存于-20℃，约90%衣原体可死亡。
, 百拇医药
1.7 尿液(中段尿为宜)、CSF等体液标本，应离心沉淀后接种或涂片阳性率 较高。
2 染色观察注意以下几点
2.1 涂片不能太厚 淋菌棉拭子涂片，应在玻片上轻滚动而不能用力涂， 有利于观察菌体位于细胞内或外。标本固定时加温不能太高，以防细胞固缩或蛋白变性。
2.2 淋菌革兰氏染色 染液配制和染色程序应标准化，严防染液污染、挥 发变干或发生沉淀，误导检查结果。
2.3 免疫组化染色(如酶标、金标法等) 同类抗体厂家甚多，应注意抗体 的特异性和敏感性，有利于提高检查质量。
2.4 注意同一染色或涂片可同时观察几种检查结果，如淋菌涂片革兰氏染 色，可同时观察到念珠菌感染；阴道滴虫涂片，同时可观察到霉菌、线索细胞等。
, 百拇医药
3 病原菌培养
3.1 淋球菌培养 注意恒定准确的培养温度；注意冬天取材、培养基保温 对淋菌生长的影响；离实验室较远，可将标本取材接种后保温送实验室，可提高培养阳性率 。
3.2 支原体培养 应强调培养前滤菌接种和培养出现反应后再次通过滤菌 二次接种，以避免染菌污染所产生的假阳性反应。
3.3 服用过抗生素或新近用过某些阴道制剂的尿液、精液等标本不宜作培 养用。
4 STD血清学检查[5]
4.1 梅毒非特异性血清学检查，如RPR等试验，应注意试剂的特异性和敏感 性，要求操作正规、定量准确。阳性应进行特异性(如荧光密螺旋体吸附试验)确诊试验，并 结合临床综合考虑确诊。
, 百拇医药
4.2 注意排除技术性和生物性的假阳性。据报道估计技术性假阳性可达25% ，生物性假阳性比较复杂一些，除少数其他螺旋体感染(如品他)可能引起真阳性外，主要见 于非梅毒螺旋体感染性疾病(如麻疹等)和常见的一些慢性疾病，如红斑狼疮、麻风(可高达4 0%)等。作出阳性结果时，应对病史有详细了解，以利于提高诊断的准确性。
4.3 临床考虑一期梅毒，而暗视野检查阴性，建议二天内再复查2次。如果 血清学检查阴性，建议4周后再复查一次较准确。
4.4 HIV检查 除注意试剂特异和敏感性外，先取初筛试验(如EIA)，待检 查阳性后做确诊试验证明，如免疫印迹(WB)等。
4.5 血清试验滴度与疾 病活度有关，定性试验阳性后再作定量试验，有利于评价疗效。
4.6 神经梅毒的诊断，不能作单一的血清学试验，应结合CSF白细胞计数和 CSF-血清学试验，必要时可用FTA-ABS等试验综合考虑确诊。
, 百拇医药
5 STD患者PCR检查
现根据卫生部文件，PCR检查法一般不作为临床诊断依据，只能作为科学研究，但对HSV感染 有时可用PCR。
6 关于购买STD试剂盒问题
目前推销厂家较多，关键是试剂的特异性、稳定性，抗体效价有时与保存有关。新购抗体用 前均应预试验，确保质量。
7 防止交叉感染应注意以下二点
7.1 梅毒血清试验测试卡片，使用完应消毒处理后再丢掉。
7.2 工作人员应戴手套，术后洗手；凡用后污染物不随意丢放，以免自身 或交叉感染。■
参考文献：
, 百拇医药
[1]邵长庚.关于性传播疾病诊断标准的制定与应用.中华皮肤科杂志，1995，28(3) ：139
[2]王千秋，邵长庚.关于性病诊断标准的修订意见.中华皮肤科杂志，1998，31(2) ：202
[3]叶干运，徐文严，邵长庚.性播疾病.第1版，南京：江苏科学技术出版社，1988 ：157
[4]乐嘉豫.性病实验诊断的应用与质控《性传播疾病诊断与预防》.第1版，广东： 广东科技出版社，1996：378
[5]龚匡隆，尤永燕，邵长庚.梅毒血清学试验的质量控制与质量保证.性传播疾 病诊断与预防.第1版.广东：广东科技出版社，1996：412, 百拇医药