中药复方962胶囊对老年雌、雄性大鼠肝脏过氧化脂质及胸腺脾指数的影响
作者：楚晋 李斌 李林 叶翠飞 刘汇波 何士大
单位：楚晋(首都医科大学宣武医院药理研究室(北京 100053))；李斌(首都医科大学宣武医院药理研究室(北京 100053))；李林(首都医科大学宣武医院药理研究室(北京 100053))；叶翠飞(首都医科大学宣武医院药理研究室(北京 100053))；刘汇波(首都医科大学宣武医院药理研究室(北京 100053))；何士大(首都医科大学宣武医院药理研究室(北京 100053))
关键词：中药复方；老年；过氧化脂质；胸腺指数；脾指数
中国中西医结合杂志000216 内容提要 目的：研究中药复方962胶囊对老年雌、雄性大鼠肝脏过氧化脂质及胸腺指数和脾指数的影响，从而观察中药复方962胶囊的抗氧化作用和对免疫功能的影响作用。方法：将雌、雄两种性别的大鼠分别设青年对照、老年模型、阳性对照脑复康、962小剂量(0.9g/kg)、962大剂量(1.8g/kg)5个组，其中，各给药组均为老年大鼠，采用灌胃给药途径，给药1个月。采用硫代巴比妥酸比色法进行肝脏脂质过氧化测定。用称重法对胸腺指数及脾指数进行测定。结果：962小、大剂量组大鼠的肝脏过氧化脂质(MDA)均低于老年模型组，其中962大剂量组与老年雌性组比较有显著性差异(P<0.01)；962小、大剂量组的胸腺指数均高于老年模型组，其中962大剂量组对老年雌性大鼠胸腺指数的升高作用趋势较大；各给药组与老年模型组脾指数比较均无显著性差异。结论：中药复方962胶囊能减少肝脏脂质过氧化物，增加胸腺指数，有助于延缓衰老过程。
, 百拇医药
Effect of 962 Capsule on Liver Peroxidation, Thymus and Spleen Index
CHU Jin LI Bin LI Lin et al
(Xuanwu Hospital, Capital University of Medical Sciences, Beijing (100053))
Objective: To investigate the effect of 962 capsule, a TCM compound recipe, on liver peroxidation and weight of thymus and spleen (thymus index, spleen index) in aged rats, and observe the anti-oxidation effect and the influence on immunological function in rats. Methods: Rats were divided into young control, aged model, positive control (piracetam), 962 middle (0.9g/kg) dose and high dose (1.8g/kg) groups, and the medicated rats used in each group were aged rats. All tested drugs were administered for 1 month by gastrogavage. The liver peroxidation was determined by thiobarbituric acid method. The thymus index and spleen index were determined by weighing method. Results: Middle and high dose of 962 capsule attenuated liver peroxidation, their liver MDA lowered, increased the thymus index of aged rats. There was no effect on spleen index in all medicated groups. Conclusions: 962 capsule could reduce liver lipid peroxidation and increase thymus index. It is suggested that 962 capsule might be beneficial in retarding aging process.
, 百拇医药
Key words traditional Chinese medicine compound recipe, aging, lipid peroxidation, thymus index, spleen index.
衰老的自由基学说认为自由基能引发脂质过氧化，产生丙二醛(MDA)等代谢产物，从而形成脂褐质沉积于脑、肝等脏器中，并最终导致正常细胞结构和功能的损伤(1～3)；随着增龄，机体对自由基损害的防御能力逐渐下降，加速了机体的衰老进程。同时，免疫学说认为，胸腺和脾脏为机体主要免疫器官，而免疫系统结构老化与功能下降是衰老的主要原因与标志。笔者在总结本院防治老年性痴呆经验的基础上，结合现代药理研究成果，组成含何首乌等6味中药的复方制剂962胶囊(4，5)，采用多项抗衰老药效学指标对其进行评价，现报道如下。
材料与方法
1 动物 Wistar大鼠，老年雄性为24月龄(第一批33只，体重515.55g；第二批18只，体重516.60g)，青年雄性为2～5月龄(第一批8只，体重122.15g；第二批3只，体重386.68g)，老年雌性为22月龄(33只，体重320.35g)，青年雌性为5月龄(9只，体重334.28g)，均购自卫生部药品和生物制品检定所，批准号：京动管制字Wistar082。
, 百拇医药
2 药物与试剂 中药复方962胶囊，主要成分为何首乌、石菖蒲、黄芩、三七等，由本院药理研究室与北京第四制药厂共同研制，批号：980515，剂量为每粒0.4g干粉，其中每克干粉含生药量8.163g，用水溶解，小剂量为每毫升0.09g干粉，大剂量为每毫升0.18g干粉，动物灌胃量10ml/kg。脑复康(Piracetam)，即乙酰胺吡咯烷酮，含量为每粒0.4g，由北京市曙光制药厂提供，批号：970618，实验时用水溶解配成0.056g/ml。硫代巴比妥酸(TBA)，四乙氧基丙烷(Sigma公司)；磷钨酸(北京市化学试剂公司提供)。
3 主要仪器 853型紫外分光光度计(美国惠普公司)。
4 方法
4.1 动物分组及给药方法 将雌、雄两种性别的大鼠分别设青年对照、老年模型、脑复康(0.56g/kg)、962小剂量(0.9g/kg)、962大剂量(1.8g/kg)5个组，其中给药组均为老年大鼠，给药组每日灌胃给药6次，连续灌胃1个月，处死，取出大鼠肝脏、胸腺及脾脏。
, 百拇医药
4.2 肝脏MDA含量的测定：采用张其兰等(6)的方法。
4.3 胸腺指数及脾指数的测定：采用杭秉茜等(7)的方法，取出大鼠胸腺及脾脏后分别称重，并分别除以大鼠体重，得到胸腺指数(100×胸腺重量/体重)及脾指数(100×脾脏重量/体重)。
4.4 统计学方法 采用统计学软件SPSS8.0对实验数据分别进行t检验。
结果
1 中药复方962胶囊对老年雌、雄性大鼠肝脏MDA的影响 见表1。雌性及雄性老年大鼠肝脏MDA较青年对照组高，但无显著性差异；962小、大剂量组均低于老年模型组，其中962大剂量组与老年模型组同性别鼠比较，有显著性差异(P<0.01)；脑复康组低于老年模型组，但无显著性差异。
表1 各组大鼠MDA含量、胸腺及脾指数的比较 (±s) 组别
, 百拇医药
MDA
(×10-2nmol/mg pro)
胸腺指数
脾指数
青年对照
雄性
1.86±0.50(11)
1.25±0.39(9)*
2.44±0.40(10)
雌性
2.78±0.98(9)
, 百拇医药
0.31±0.09(8)*
0.79±0.10(9)
老年模型
雄性
2.22±0.62(8)
0.50±0.16(8)
2.42±0.77(8)
雌性
3.26±0.84(5)
0.11±0.06(5)
1.04±0.36(8)
, 百拇医药
脑复康
雄性
1.89±0.26(9)
0.46±0.09(9)
2.29±0.51(9)
雌性
2.79±0.86(7)
0.13±0.03(7)
0.77±0.10(9)
962
雄性
2.07±0.63(7)
, 百拇医药
0.58±0.19(6)
2.17±0.49(7)
小剂量
雌性
3.19±0.43(5)
0.17±0.09(5)
0.88±0.22(7)
962
雄性
1.73±0.33(7)
0.58±0.16(8)
1.99±0.26(8)
, 百拇医药
大剂量
雌性
2.26±0.31(8)
0.17±0.06(7)
0.90±0.23(8)
注：与老年模型组同性别鼠比较，*P<0.01；( )内为鼠数
2 中药复方962胶囊对老年雌、雄性大鼠胸腺、脾指数的影响 见表1。雌性及雄性老年大鼠胸腺指数均显著低于青年对照组(P<0.01)；962小、大剂量组均高于老年模型组，其中962大剂量组对老年雌性大鼠胸腺指数的升高作用趋势较大，脑复康组与老年模型组比较无显著性差异。老年模型组与青年对照组的脾指数无显著性差异；各给药组与老年模型组比较亦无显著性差异。
, http://www.100md.com
讨论
近年来研究认为，氧自由基能导致核酸、蛋白质、脂质膜的损伤，是衰老过程中生成过氧化脂质(LPO)的主要诱因之一。MDA是自由基对不饱和脂肪酸引发的脂质过氧化作用的中间产物，它进一步与蛋白质反应生成LPO。MDA和LPO含量能直接反映体内自由基水平和脂质过氧化速度或强度。实验表明，LPO逐龄增加(1)。因此可选用常用的肝脏过氧化脂质作为评价中药复方962胶囊抗衰老药效的指标之一。同时机体免疫功能在老年期是降低的。免疫组织与器官的功能状态与衰老的发生、发展有着极为密切的关系(8)。机体免疫防御功能的健全与抗衰老作用有密切关系。胸腺和脾脏为机体主要免疫器官，一些免疫抑制剂可使胸腺、脾脏萎缩；免疫增强剂可使胸腺、脾脏增重。因此，胸腺和脾脏可作为观察药物对免疫影响的指标之一(9)。中药复方962胶囊是以何首乌、石菖蒲为主组成的复方，具有补肾益智、祛痰开窍的功效。本研究结果表明，962大剂量组有降低老年大鼠肝脏过氧化脂质的作用，提示中药复方962胶囊能抑制老化引起的活性氧自由基反应的加速，可能主要是通过抑制氧自由基对脂类的氧化而保护与脂类相关联的结构免受破坏，而且，962小、大剂量组均有增加免疫器官胸腺指数的趋势，说明中药复方962胶囊具有延缓胸腺退化与萎缩或增加其重量的作用，这可能是由于它通过抗氧化而抑制自由基对免疫器官的损害，使由老化引起的机体功能减退得到恢复，延缓免疫功能的下降，显示其延缓衰老的作用。
, 百拇医药
本课题为北京市科委资助北京市重点科技实验室项目(No.951890600)；国家人事部资助优秀留学回国人员科研项目(No.1998)
参考文献
1.孟庆礼.过氧化脂质与老化的关系.中华老年医学杂志 1987；6(4)∶242—243.
2.Halliwell B. Lipid peroxidation, Oxygen radicals, cell damage and antioxdant therapy. Lancet 1984；(1)∶1396—1397.
3.陈 瑗，周 玫.脂质过氧化作用与疾病.中华医学杂志 1985；65(11)∶704—706.
4.李 斌，李 林，李宗信，等.补肾健脑1号合剂对小鼠学习记忆及抗疲劳能力的影响.中国中药杂志 1999；24(2)∶104—106.
, http://www.100md.com
5.刘汇波，李 林，李 斌，等.正交t值法在中药方剂961的主药分析中的应用.中国临床药理与治疗学杂志 1998；3(2)∶89—91.
6.张其兰，于庆梅.复方何首乌对大鼠血浆过氧化脂质的影响.见陈 奇主编.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993∶940—943.
7.杭秉茜，戴 岳.女贞子对小鼠免疫器官胸腺脾脏重量的影响.见李仪奎主编.中药药理实验方法学.上海：上海科技出版社，1994∶779—780.
8.钱玉昆，张国玺.衰老的免疫学研究.见邝安坤主编.老年医学在中国.长沙：湖南科学技术出版社，1989∶116—121.
9.周 勇.补益药药理研究方法.见陈 奇主编.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993∶712—713.
(收稿：1999-09-13 修回：1999-10-28), 百拇医药
单位：楚晋(首都医科大学宣武医院药理研究室(北京 100053))；李斌(首都医科大学宣武医院药理研究室(北京 100053))；李林(首都医科大学宣武医院药理研究室(北京 100053))；叶翠飞(首都医科大学宣武医院药理研究室(北京 100053))；刘汇波(首都医科大学宣武医院药理研究室(北京 100053))；何士大(首都医科大学宣武医院药理研究室(北京 100053))
关键词：中药复方；老年；过氧化脂质；胸腺指数；脾指数
中国中西医结合杂志000216 内容提要 目的：研究中药复方962胶囊对老年雌、雄性大鼠肝脏过氧化脂质及胸腺指数和脾指数的影响，从而观察中药复方962胶囊的抗氧化作用和对免疫功能的影响作用。方法：将雌、雄两种性别的大鼠分别设青年对照、老年模型、阳性对照脑复康、962小剂量(0.9g/kg)、962大剂量(1.8g/kg)5个组，其中，各给药组均为老年大鼠，采用灌胃给药途径，给药1个月。采用硫代巴比妥酸比色法进行肝脏脂质过氧化测定。用称重法对胸腺指数及脾指数进行测定。结果：962小、大剂量组大鼠的肝脏过氧化脂质(MDA)均低于老年模型组，其中962大剂量组与老年雌性组比较有显著性差异(P<0.01)；962小、大剂量组的胸腺指数均高于老年模型组，其中962大剂量组对老年雌性大鼠胸腺指数的升高作用趋势较大；各给药组与老年模型组脾指数比较均无显著性差异。结论：中药复方962胶囊能减少肝脏脂质过氧化物，增加胸腺指数，有助于延缓衰老过程。
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Effect of 962 Capsule on Liver Peroxidation, Thymus and Spleen Index
CHU Jin LI Bin LI Lin et al
(Xuanwu Hospital, Capital University of Medical Sciences, Beijing (100053))
Objective: To investigate the effect of 962 capsule, a TCM compound recipe, on liver peroxidation and weight of thymus and spleen (thymus index, spleen index) in aged rats, and observe the anti-oxidation effect and the influence on immunological function in rats. Methods: Rats were divided into young control, aged model, positive control (piracetam), 962 middle (0.9g/kg) dose and high dose (1.8g/kg) groups, and the medicated rats used in each group were aged rats. All tested drugs were administered for 1 month by gastrogavage. The liver peroxidation was determined by thiobarbituric acid method. The thymus index and spleen index were determined by weighing method. Results: Middle and high dose of 962 capsule attenuated liver peroxidation, their liver MDA lowered, increased the thymus index of aged rats. There was no effect on spleen index in all medicated groups. Conclusions: 962 capsule could reduce liver lipid peroxidation and increase thymus index. It is suggested that 962 capsule might be beneficial in retarding aging process.
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Key words traditional Chinese medicine compound recipe, aging, lipid peroxidation, thymus index, spleen index.
衰老的自由基学说认为自由基能引发脂质过氧化，产生丙二醛(MDA)等代谢产物，从而形成脂褐质沉积于脑、肝等脏器中，并最终导致正常细胞结构和功能的损伤(1～3)；随着增龄，机体对自由基损害的防御能力逐渐下降，加速了机体的衰老进程。同时，免疫学说认为，胸腺和脾脏为机体主要免疫器官，而免疫系统结构老化与功能下降是衰老的主要原因与标志。笔者在总结本院防治老年性痴呆经验的基础上，结合现代药理研究成果，组成含何首乌等6味中药的复方制剂962胶囊(4，5)，采用多项抗衰老药效学指标对其进行评价，现报道如下。
材料与方法
1 动物 Wistar大鼠，老年雄性为24月龄(第一批33只，体重515.55g；第二批18只，体重516.60g)，青年雄性为2～5月龄(第一批8只，体重122.15g；第二批3只，体重386.68g)，老年雌性为22月龄(33只，体重320.35g)，青年雌性为5月龄(9只，体重334.28g)，均购自卫生部药品和生物制品检定所，批准号：京动管制字Wistar082。
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2 药物与试剂 中药复方962胶囊，主要成分为何首乌、石菖蒲、黄芩、三七等，由本院药理研究室与北京第四制药厂共同研制，批号：980515，剂量为每粒0.4g干粉，其中每克干粉含生药量8.163g，用水溶解，小剂量为每毫升0.09g干粉，大剂量为每毫升0.18g干粉，动物灌胃量10ml/kg。脑复康(Piracetam)，即乙酰胺吡咯烷酮，含量为每粒0.4g，由北京市曙光制药厂提供，批号：970618，实验时用水溶解配成0.056g/ml。硫代巴比妥酸(TBA)，四乙氧基丙烷(Sigma公司)；磷钨酸(北京市化学试剂公司提供)。
3 主要仪器 853型紫外分光光度计(美国惠普公司)。
4 方法
4.1 动物分组及给药方法 将雌、雄两种性别的大鼠分别设青年对照、老年模型、脑复康(0.56g/kg)、962小剂量(0.9g/kg)、962大剂量(1.8g/kg)5个组，其中给药组均为老年大鼠，给药组每日灌胃给药6次，连续灌胃1个月，处死，取出大鼠肝脏、胸腺及脾脏。
, 百拇医药
4.2 肝脏MDA含量的测定：采用张其兰等(6)的方法。
4.3 胸腺指数及脾指数的测定：采用杭秉茜等(7)的方法，取出大鼠胸腺及脾脏后分别称重，并分别除以大鼠体重，得到胸腺指数(100×胸腺重量/体重)及脾指数(100×脾脏重量/体重)。
4.4 统计学方法 采用统计学软件SPSS8.0对实验数据分别进行t检验。
结果
1 中药复方962胶囊对老年雌、雄性大鼠肝脏MDA的影响 见表1。雌性及雄性老年大鼠肝脏MDA较青年对照组高，但无显著性差异；962小、大剂量组均低于老年模型组，其中962大剂量组与老年模型组同性别鼠比较，有显著性差异(P<0.01)；脑复康组低于老年模型组，但无显著性差异。
表1 各组大鼠MDA含量、胸腺及脾指数的比较 (±s) 组别
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MDA
(×10-2nmol/mg pro)
胸腺指数
脾指数
青年对照
雄性
1.86±0.50(11)
1.25±0.39(9)*
2.44±0.40(10)
雌性
2.78±0.98(9)
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0.31±0.09(8)*
0.79±0.10(9)
老年模型
雄性
2.22±0.62(8)
0.50±0.16(8)
2.42±0.77(8)
雌性
3.26±0.84(5)
0.11±0.06(5)
1.04±0.36(8)
, 百拇医药
脑复康
雄性
1.89±0.26(9)
0.46±0.09(9)
2.29±0.51(9)
雌性
2.79±0.86(7)
0.13±0.03(7)
0.77±0.10(9)
962
雄性
2.07±0.63(7)
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0.58±0.19(6)
2.17±0.49(7)
小剂量
雌性
3.19±0.43(5)
0.17±0.09(5)
0.88±0.22(7)
962
雄性
1.73±0.33(7)
0.58±0.16(8)
1.99±0.26(8)
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大剂量
雌性
2.26±0.31(8)
0.17±0.06(7)
0.90±0.23(8)
注：与老年模型组同性别鼠比较，*P<0.01；( )内为鼠数
2 中药复方962胶囊对老年雌、雄性大鼠胸腺、脾指数的影响 见表1。雌性及雄性老年大鼠胸腺指数均显著低于青年对照组(P<0.01)；962小、大剂量组均高于老年模型组，其中962大剂量组对老年雌性大鼠胸腺指数的升高作用趋势较大，脑复康组与老年模型组比较无显著性差异。老年模型组与青年对照组的脾指数无显著性差异；各给药组与老年模型组比较亦无显著性差异。
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讨论
近年来研究认为，氧自由基能导致核酸、蛋白质、脂质膜的损伤，是衰老过程中生成过氧化脂质(LPO)的主要诱因之一。MDA是自由基对不饱和脂肪酸引发的脂质过氧化作用的中间产物，它进一步与蛋白质反应生成LPO。MDA和LPO含量能直接反映体内自由基水平和脂质过氧化速度或强度。实验表明，LPO逐龄增加(1)。因此可选用常用的肝脏过氧化脂质作为评价中药复方962胶囊抗衰老药效的指标之一。同时机体免疫功能在老年期是降低的。免疫组织与器官的功能状态与衰老的发生、发展有着极为密切的关系(8)。机体免疫防御功能的健全与抗衰老作用有密切关系。胸腺和脾脏为机体主要免疫器官，一些免疫抑制剂可使胸腺、脾脏萎缩；免疫增强剂可使胸腺、脾脏增重。因此，胸腺和脾脏可作为观察药物对免疫影响的指标之一(9)。中药复方962胶囊是以何首乌、石菖蒲为主组成的复方，具有补肾益智、祛痰开窍的功效。本研究结果表明，962大剂量组有降低老年大鼠肝脏过氧化脂质的作用，提示中药复方962胶囊能抑制老化引起的活性氧自由基反应的加速，可能主要是通过抑制氧自由基对脂类的氧化而保护与脂类相关联的结构免受破坏，而且，962小、大剂量组均有增加免疫器官胸腺指数的趋势，说明中药复方962胶囊具有延缓胸腺退化与萎缩或增加其重量的作用，这可能是由于它通过抗氧化而抑制自由基对免疫器官的损害，使由老化引起的机体功能减退得到恢复，延缓免疫功能的下降，显示其延缓衰老的作用。
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本课题为北京市科委资助北京市重点科技实验室项目(No.951890600)；国家人事部资助优秀留学回国人员科研项目(No.1998)
参考文献
1.孟庆礼.过氧化脂质与老化的关系.中华老年医学杂志 1987；6(4)∶242—243.
2.Halliwell B. Lipid peroxidation, Oxygen radicals, cell damage and antioxdant therapy. Lancet 1984；(1)∶1396—1397.
3.陈 瑗，周 玫.脂质过氧化作用与疾病.中华医学杂志 1985；65(11)∶704—706.
4.李 斌，李 林，李宗信，等.补肾健脑1号合剂对小鼠学习记忆及抗疲劳能力的影响.中国中药杂志 1999；24(2)∶104—106.
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5.刘汇波，李 林，李 斌，等.正交t值法在中药方剂961的主药分析中的应用.中国临床药理与治疗学杂志 1998；3(2)∶89—91.
6.张其兰，于庆梅.复方何首乌对大鼠血浆过氧化脂质的影响.见陈 奇主编.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993∶940—943.
7.杭秉茜，戴 岳.女贞子对小鼠免疫器官胸腺脾脏重量的影响.见李仪奎主编.中药药理实验方法学.上海：上海科技出版社，1994∶779—780.
8.钱玉昆，张国玺.衰老的免疫学研究.见邝安坤主编.老年医学在中国.长沙：湖南科学技术出版社，1989∶116—121.
9.周 勇.补益药药理研究方法.见陈 奇主编.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993∶712—713.
(收稿：1999-09-13 修回：1999-10-28), 百拇医药