备用根大鼠脊髓后角组织神经营养活性物质的分离纯化和生物活性测定
作者：张缓缓 曾园山 顾熊飞 陈穗君
单位：张缓缓 曾园山 陈穗君(中山医科大学组织学胚胎学教研室神经科学研究室)；顾熊飞(生物化学教研室，广州 510089)
关键词：
解剖学报000228
【中图分类号】 D322.81 【文献标识码】D
【文章编号】 0529-1356(2000)02-123
我室新近的研究发现，部分去传入纤维支配的脊髓后角组织提取液含有神经营养活性组份，其分子量约在40kD～78kD之间，但尚不清楚是哪种分子量的蛋白质具有神经营养活性作用。为了寻找这种物质，本研究用Superdex G-75 prep grade凝胶层析、高效液相色谱(HPLC)层析和细胞培养等技术和方法，进一步分离纯化备用根大鼠部分去传入纤维支配(手术侧)的脊髓后角组织提取液，以期获得某种神经营养活性物质。
用SD雄性大鼠100只，切除其一侧L1～L3、L5和L6背根，仅保留L4背根(此动物为备用根模型大鼠)，术后5d处死动物。分别切取L1～L6节段的手术侧和非手术侧脊髓后角组织，制备成提取液、凝胶层析洗脱液和PHLC层析洗脱液。结果发现，手术侧脊髓后角组织提取液具有神经营养活性作用。将该提取液经Superdex G-75 prep grade凝胶层析和PHLC层析后，得到的A峰洗脱液具有促进体外培养鸡胚背根节(DRG)分离神经元存活及其神经突起生长的神经营养活性作用。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)显示，A峰洗脱液呈现1条分子量约为60kD的蛋白质主带。结合生物活性检测结果，我们推测分子量约60kD的蛋白质是神经营养活性物质。这可能是引起备用根大鼠初级传入纤维在脊髓后角内侧支出芽和突触重建的重要因素之一。【收稿日期】1999-08-10, 百拇医药
单位：张缓缓 曾园山 陈穗君(中山医科大学组织学胚胎学教研室神经科学研究室)；顾熊飞(生物化学教研室，广州 510089)
关键词：
解剖学报000228
【中图分类号】 D322.81 【文献标识码】D
【文章编号】 0529-1356(2000)02-123
我室新近的研究发现，部分去传入纤维支配的脊髓后角组织提取液含有神经营养活性组份，其分子量约在40kD～78kD之间，但尚不清楚是哪种分子量的蛋白质具有神经营养活性作用。为了寻找这种物质，本研究用Superdex G-75 prep grade凝胶层析、高效液相色谱(HPLC)层析和细胞培养等技术和方法，进一步分离纯化备用根大鼠部分去传入纤维支配(手术侧)的脊髓后角组织提取液，以期获得某种神经营养活性物质。
用SD雄性大鼠100只，切除其一侧L1～L3、L5和L6背根，仅保留L4背根(此动物为备用根模型大鼠)，术后5d处死动物。分别切取L1～L6节段的手术侧和非手术侧脊髓后角组织，制备成提取液、凝胶层析洗脱液和PHLC层析洗脱液。结果发现，手术侧脊髓后角组织提取液具有神经营养活性作用。将该提取液经Superdex G-75 prep grade凝胶层析和PHLC层析后，得到的A峰洗脱液具有促进体外培养鸡胚背根节(DRG)分离神经元存活及其神经突起生长的神经营养活性作用。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)显示，A峰洗脱液呈现1条分子量约为60kD的蛋白质主带。结合生物活性检测结果，我们推测分子量约60kD的蛋白质是神经营养活性物质。这可能是引起备用根大鼠初级传入纤维在脊髓后角内侧支出芽和突触重建的重要因素之一。【收稿日期】1999-08-10, 百拇医药