甘草酸及其脂质配位体的理化性质与抗肝损害作用的比较
作者：茹仁萍 吴锡铭 吕坚
单位：杭州 310014 杭州市肝病研究所，杭州市第六人民医院
关键词：甘草酸；配位体；理化性质；肝损害
摘要 目的摘要 目的：增加甘草酸的保肝作用。 方法：在隋性溶剂中将甘草酸与磷脂酰胆碱形成配位体口服。结果：甘草酸形成脂质配位体后从水溶性变为脂溶性，理化性质(红外、紫外光谱、高效液相 等)无明显改变，抗肝损作用明显增加。结论：口服甘草酸脂质配位体的 抗肝损作用明显优于甘草酸。
Study on the physico-chemicals and liver protective effect
of glycyrrhizinphosphatidylcho line complex
, http://www.100md.com
Ru Renping
(Six Ho spital of Hangzhou,Hangzhou 310014)
Wu Ximin
(Six Ho spital of Hangzhou,Hangzhou 310014)
Lü Jian
(Six Ho spital of Hangzhou,Hangzhou 310014)
ABSTRACT OBJECTIVE：in order fo raise the liver protecve activity of oral glycyrrhizin.METHOD:The lipophilic complexe of glycyrrhizin was preparated via glycyh rhizim and phospholipids in the presence of inert solvent.RESULTS:Th e increasing liposolubility of glycyrrhizicnphos-phatidylcho line comple and ph ysico-chemical proper ties(IR,UV,HPLC),no significane change was found in the a speet.Glycyrrhizicnphosphatidylcho line complex on Gal-induced hepatic injury i s suprior to glycyrrhicic.CONCLUSION:The results demonstrate that th e liver protecve action of glycyrrhizicnphosphatidylcho line complex on Gal-in duced hepatic injary is suprior to glycyrrhicic.
, 百拇医药
KEY WORDS glycrrihzin,compltx,physico-chemicals,liver danage
甘草酸静脉注射液是为治疗肝炎的有效药物[1，2]，但口服疗效低 ，究其原因为甘草酸是高极性，亲水性大分子，在胃肠道内吸收差所致，为提高其口服吸收 率，我们研制了甘草酸脂质配位体，旨在促进吸收，提高疗效[3]，在初步实验中 ，我们对甘草酸及其脂质配位体进行了理化性质和抗损害作用的比较。
1 材 料
1.1 仪器 WZX旋光仪；UV-2201紫外分光 光度仪(日本岛津)；高效液相色谱仪LC-9A(日本岛津)。
1.2 试药 甘草酸(GL，>96% HPLC)(本室自制)；磷脂酰胆碱(上海油脂 一厂)；试剂均为分析纯。
, http://www.100md.com
2 方法与结果
2.1 甘草酸脂质配位体(GPL)的制备 取GL(0.1mol/L)混悬于二氧六环中，在 室温、搅拌、充氮下，加入磷脂酰胆碱，反应3h,反应液澄清后，真空浓缩至小体积，冷却 至室温，加入n-己烷，过夜，过滤，沉淀用n-己烷洗3次，抽干，于40℃真空干燥，得黄 色粉末。
2.2 溶解度试验 精密称取GL,GPL分别用水和有机溶剂，按 中国药典凡例规定进行溶解度试验，结果见表1。
表1 Soubility of GL*1 and GPL*1
Solvent
18α-GL
GPL
, 百拇医药
25℃
reflux/℃
25℃
reflux/℃
water
frecly s*1
very S.
Sparingly S.
Sparingly S.
methanol
slightly S.
S.
, http://www.100md.com
S.
frecly S.
cthanol
slightly S.
S.
S.
frcely S.
aceton
very sligtly S.
S.
spaingly S.
S.
, http://www.100md.com
chloroform
practiclally
practically
Very S.
Very S.
in S.
in S.
1,4-dioxane
slightly S.
slightly S.
S.
frecly S.
, 百拇医药
cther
practically
practically
practically
practically
in S.
in S.
in S.
in S.
注：*1samplc 0.2g/10ml;*2solublc
2.3 比旋光度[α]20D测定 精密称取干燥 样品用水溶解制成1%(W/V)溶液，按中国药典附录测定旋光度，结果GL为+17.5°,GPL为+11. 0°。
, 百拇医药
2.4 紫外光谱分析 取GPL及GL用紫外190～900nm间进行扫描， 结果GPL及对照品GL在水、甲醇中λmax、logε无明显差异，它们在极性较小的甲醇 中λmax较小，在水中λmax较大；GPL在200nm近旁有一吸收峰。
2.5 红外光谱 取上述样品，经溴化钾压片IR分析结果，两者的特征区 峰位有明显差异。GPL中甘草酸的特征峰3400cm-1、3250cm-1(O-H)强度明显减 弱;1720cm-1(C=O),1660cm-1(C=O),由于前者为一COOH偶极矩变化大于后者(-C H=CH-CO),故1720cm-1明显增高;1460cm-1(C-O)也由于偶极矩变化由弱变强。 此外，GPL中磷脂酰胆碱分子中极性部位P=O在1250cm-1处吸收峰由于和甘草酸分子配 位而消失。
, 百拇医药
2.6 高效液相分析 取GL和GPL分别用甲醇溶介制成40μg/ ml溶液，取10μl注入高效液相色谱仪，结果表明，样品与对照品的保留值分别为9.067和 8.971min,两者无明显差异，色谱图也一致。
高效液相条件:LC 9A-HPLC;SPD-6AV;波 长254nm;柱Zorbax ODS(15cm×4.6mm ID);流动相76%(CH2OH/20% H2O/4% AcoH;流速1.2 ml/min;柱温20℃;进样量10μl。
2.7 对半乳糖胺损害肝脏的治疗作用
取雄性大鼠分4组。3组动物同时ip 10% GalN 450mg/kg,其中两组给药组于中毒2,24和48h 后分别ig 18α-GL与GPL 300mg/kg(预先制成3%和6%的磷酸盐缓冲溶液， 每鼠ig约1.2～1.5ml),正常对照组ig同剂量的GPL，肝损害对照组ig同体积生理盐水。然后 于24和48h从尾静脉取血，分离血清测定ALT、AST值。由GalN引起大鼠血清ALT增高，在中毒 24和48h后，两给药组均明显低于肝损害对照组；而GPL组中毒24和48h后的ALT、AST均明显 低于GL组，两组间有显著性差异(见表2)，说明脂质配位体的抗肝损伤作用优于未经脂质配 位的GL。
, 百拇医药
3 讨 论
表2 Effects of GPL and 18α-GL 3 00mg/kg on serum ALT、AST of rats given galactosamine 450mg/kg ip/±s
Experimental
group
n
ALT/IU.L-1
AST/IU .L-1
24h
48h
, 百拇医药
24h
48h
control
11
409.2±148.7
146.0±46.27
2540±915.2
447.8±13.1
GL
11
277.3±102.4**
97.70±24.80*3
, 百拇医药
1775±62 5.4*3
342.8±102.9*3
GPL
11
205.0±86.01*3
71 .50±11.40*2
1315±839.7*3
216.8±77.20*3
Normal
3
, http://www.100md.com
-
58.30±17.60
-
143.7±97.70
注：*1P<0.05,*2P<0.05,*3P<0.01 GL vs co ntrol(GalN plus saline),GPL vs GL
甘草酸制成脂质配位体后，使分子极性，降 低脂溶性(溶于甲醇、乙醇、氯仿等有机溶剂)增加，从而提高了甘草酸在小肠的吸收率及血 药浓度。实验证明，甘草酸脂质配位体的抗肝损害作用明显优于甘草酸。
参考文献
1，张本根，等.甘草酸注射液对慢性肝炎的疗效观察.肝脏 病杂志，1993，(2)∶112.
2，贾辅忠，等.强力新 用于肝病研究近况.中华传染病杂志，1988，(1)∶39.
3，Papahad jopoules D:proc,Natl Acda Sci,USA,1978,75 (9)∶4194.
收稿日期：1998-08-10, 百拇医药
单位：杭州 310014 杭州市肝病研究所，杭州市第六人民医院
关键词：甘草酸；配位体；理化性质；肝损害
摘要 目的摘要 目的：增加甘草酸的保肝作用。 方法：在隋性溶剂中将甘草酸与磷脂酰胆碱形成配位体口服。结果：甘草酸形成脂质配位体后从水溶性变为脂溶性，理化性质(红外、紫外光谱、高效液相 等)无明显改变，抗肝损作用明显增加。结论：口服甘草酸脂质配位体的 抗肝损作用明显优于甘草酸。
Study on the physico-chemicals and liver protective effect
of glycyrrhizinphosphatidylcho line complex
, http://www.100md.com
Ru Renping
(Six Ho spital of Hangzhou,Hangzhou 310014)
Wu Ximin
(Six Ho spital of Hangzhou,Hangzhou 310014)
Lü Jian
(Six Ho spital of Hangzhou,Hangzhou 310014)
ABSTRACT OBJECTIVE：in order fo raise the liver protecve activity of oral glycyrrhizin.METHOD:The lipophilic complexe of glycyrrhizin was preparated via glycyh rhizim and phospholipids in the presence of inert solvent.RESULTS:Th e increasing liposolubility of glycyrrhizicnphos-phatidylcho line comple and ph ysico-chemical proper ties(IR,UV,HPLC),no significane change was found in the a speet.Glycyrrhizicnphosphatidylcho line complex on Gal-induced hepatic injury i s suprior to glycyrrhicic.CONCLUSION:The results demonstrate that th e liver protecve action of glycyrrhizicnphosphatidylcho line complex on Gal-in duced hepatic injary is suprior to glycyrrhicic.
, 百拇医药
KEY WORDS glycrrihzin,compltx,physico-chemicals,liver danage
甘草酸静脉注射液是为治疗肝炎的有效药物[1，2]，但口服疗效低 ，究其原因为甘草酸是高极性，亲水性大分子，在胃肠道内吸收差所致，为提高其口服吸收 率，我们研制了甘草酸脂质配位体，旨在促进吸收，提高疗效[3]，在初步实验中 ，我们对甘草酸及其脂质配位体进行了理化性质和抗损害作用的比较。
1 材 料
1.1 仪器 WZX旋光仪；UV-2201紫外分光 光度仪(日本岛津)；高效液相色谱仪LC-9A(日本岛津)。
1.2 试药 甘草酸(GL，>96% HPLC)(本室自制)；磷脂酰胆碱(上海油脂 一厂)；试剂均为分析纯。
, http://www.100md.com
2 方法与结果
2.1 甘草酸脂质配位体(GPL)的制备 取GL(0.1mol/L)混悬于二氧六环中，在 室温、搅拌、充氮下，加入磷脂酰胆碱，反应3h,反应液澄清后，真空浓缩至小体积，冷却 至室温，加入n-己烷，过夜，过滤，沉淀用n-己烷洗3次，抽干，于40℃真空干燥，得黄 色粉末。
2.2 溶解度试验 精密称取GL,GPL分别用水和有机溶剂，按 中国药典凡例规定进行溶解度试验，结果见表1。
表1 Soubility of GL*1 and GPL*1
Solvent
18α-GL
GPL
, 百拇医药
25℃
reflux/℃
25℃
reflux/℃
water
frecly s*1
very S.
Sparingly S.
Sparingly S.
methanol
slightly S.
S.
, http://www.100md.com
S.
frecly S.
cthanol
slightly S.
S.
S.
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S.
spaingly S.
S.
, http://www.100md.com
chloroform
practiclally
practically
Very S.
Very S.
in S.
in S.
1,4-dioxane
slightly S.
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S.
frecly S.
, 百拇医药
cther
practically
practically
practically
practically
in S.
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注：*1samplc 0.2g/10ml;*2solublc
2.3 比旋光度[α]20D测定 精密称取干燥 样品用水溶解制成1%(W/V)溶液，按中国药典附录测定旋光度，结果GL为+17.5°,GPL为+11. 0°。
, 百拇医药
2.4 紫外光谱分析 取GPL及GL用紫外190～900nm间进行扫描， 结果GPL及对照品GL在水、甲醇中λmax、logε无明显差异，它们在极性较小的甲醇 中λmax较小，在水中λmax较大；GPL在200nm近旁有一吸收峰。
2.5 红外光谱 取上述样品，经溴化钾压片IR分析结果，两者的特征区 峰位有明显差异。GPL中甘草酸的特征峰3400cm-1、3250cm-1(O-H)强度明显减 弱;1720cm-1(C=O),1660cm-1(C=O),由于前者为一COOH偶极矩变化大于后者(-C H=CH-CO),故1720cm-1明显增高;1460cm-1(C-O)也由于偶极矩变化由弱变强。 此外，GPL中磷脂酰胆碱分子中极性部位P=O在1250cm-1处吸收峰由于和甘草酸分子配 位而消失。
, 百拇医药
2.6 高效液相分析 取GL和GPL分别用甲醇溶介制成40μg/ ml溶液，取10μl注入高效液相色谱仪，结果表明，样品与对照品的保留值分别为9.067和 8.971min,两者无明显差异，色谱图也一致。
高效液相条件:LC 9A-HPLC;SPD-6AV;波 长254nm;柱Zorbax ODS(15cm×4.6mm ID);流动相76%(CH2OH/20% H2O/4% AcoH;流速1.2 ml/min;柱温20℃;进样量10μl。
2.7 对半乳糖胺损害肝脏的治疗作用
取雄性大鼠分4组。3组动物同时ip 10% GalN 450mg/kg,其中两组给药组于中毒2,24和48h 后分别ig 18α-GL与GPL 300mg/kg(预先制成3%和6%的磷酸盐缓冲溶液， 每鼠ig约1.2～1.5ml),正常对照组ig同剂量的GPL，肝损害对照组ig同体积生理盐水。然后 于24和48h从尾静脉取血，分离血清测定ALT、AST值。由GalN引起大鼠血清ALT增高，在中毒 24和48h后，两给药组均明显低于肝损害对照组；而GPL组中毒24和48h后的ALT、AST均明显 低于GL组，两组间有显著性差异(见表2)，说明脂质配位体的抗肝损伤作用优于未经脂质配 位的GL。
, 百拇医药
3 讨 论
表2 Effects of GPL and 18α-GL 3 00mg/kg on serum ALT、AST of rats given galactosamine 450mg/kg ip/±s
Experimental
group
n
ALT/IU.L-1
AST/IU .L-1
24h
48h
, 百拇医药
24h
48h
control
11
409.2±148.7
146.0±46.27
2540±915.2
447.8±13.1
GL
11
277.3±102.4**
97.70±24.80*3
, 百拇医药
1775±62 5.4*3
342.8±102.9*3
GPL
11
205.0±86.01*3
71 .50±11.40*2
1315±839.7*3
216.8±77.20*3
Normal
3
, http://www.100md.com
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58.30±17.60
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注：*1P<0.05,*2P<0.05,*3P<0.01 GL vs co ntrol(GalN plus saline),GPL vs GL
甘草酸制成脂质配位体后，使分子极性，降 低脂溶性(溶于甲醇、乙醇、氯仿等有机溶剂)增加，从而提高了甘草酸在小肠的吸收率及血 药浓度。实验证明，甘草酸脂质配位体的抗肝损害作用明显优于甘草酸。
参考文献
1，张本根，等.甘草酸注射液对慢性肝炎的疗效观察.肝脏 病杂志，1993，(2)∶112.
2，贾辅忠，等.强力新 用于肝病研究近况.中华传染病杂志，1988，(1)∶39.
3，Papahad jopoules D:proc,Natl Acda Sci,USA,1978,75 (9)∶4194.
收稿日期：1998-08-10, 百拇医药