我国真江蓠生物活性物质PG的检出
作者：华玉琴 孙健华 李会轻 王友兰 高青芝
单位：孙健华(山东省海洋药物研究所，青岛 266003) 华玉琴 李会轻 王友兰 高青芝(青岛市药品检验所，青岛 266071)
关键词：真江蓠，前列腺素，化学成分，提取分离
中国海洋药物000310摘要 以青岛沿海产海藻真江蓠(Gracilaria asiatica Zhang et Xia)为原料，从中提取计划生育用药——前列腺素类活性物质，经与对照品的薄层层析及高压液相图谱对照分析，初步鉴定为前腺素E2(PGE2)。
STUDIES ON BIOLOGIC ACTIVE MATERIAL OF RED MARINE ALGAE GRACILARIA ASIATICA
, 百拇医药
Hua yuqin
(Qingdao Institute of Drug Control,Qingdao 266071)
Sun Jianhua
(Qingdao Institute of Drug Control,Qingdao 266071)
Li Huiqing
(Qingdao Institute of Drug Control,Qingdao 266071)
ABSTRACT An principles-drug on birth control was isolated from red marine algae G.asiatica collected from coast of Qingdao.It was identified to be prostaglandin E2 by atlas data of TLC and HPLC and direct comparison with anthentic specimens.
, 百拇医药
KEY WORDS Gracilaria,asiatica prostaglandin chemical composition isolation
前列腺素(Prostaglandin，PG)类成分最初是从羊精囊中得到的一类具有兴奋子宫、肠管和降低血压等作用的物质[1]，是与生命活动密切相关的体内激素，用于催产和人工流产成功后，引起国内外医药界的广泛重视。由于此类药物全合成或人工半合成步骤多、工艺复杂，再加上羊储精囊来源缺乏，使其成本很高，本研究使用的真江蓠[2]资源丰富，分布广泛，已人工养殖成功[3]，由此可解决此类药物的来源，降低成本，满足临床研究、开发需要，并将产生显著经济效益和社会效益。
1 材料与方法
1.1 试剂
乙酸乙酯(A.R淄博化学试剂厂)；硫酸钠(C.P上海化学试剂四厂)；二氯甲烷(A.R上海试剂厂)；甲醇(A.R上海化学试剂总厂)；氯仿(A.R上海试剂厂)；PGE2(Sigma公司提供)；硅胶F254预制板(青岛海洋化工厂)
, http://www.100md.com
1.2 仪器
UV-1型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)；岛津LC-10AD型高效液相色谱仪；旋转蒸发器(上海医械专机厂)
1.3 原料
青岛近海采集成熟期[4]真江蓠(Gracilaria asiatica Zhang et Xia)，去除杂藻和泥沙，低温(-20℃)贮藏备用。
1.4 方法
称取低温贮藏的真江蓠5500g，加蒸馏水20L，室温浸渍24h，取出江蓠，切细，用乙醇回流1h，冷却后，过滤，滤渣用乙醇按同样的方法回流2次，提取物浓缩后，用乙酸乙酯-水萃取，乙酸乙酯部分真空干燥，得深绿色油状物，然后在干装的硅胶柱上用二氯甲烷-甲醇系统进行柱层析，分段收集，并用薄层层析追踪检验，活性部分浓缩得黄绿色油状物，再用甲醇-水-醋酸系统在硅胶柱进行反相层析，得淡黄色粉末，以PGE2作对照进行高效液相分析。
, 百拇医药
1.5 薄层层析追踪检验
载体：硅胶F254预制板(5×20cm)
展开剂：氯仿：甲醇(9：1)
对照品：PGE2乙酸乙酯溶液
样品：提取物乙酸乙酯溶液
显色剂：30%硫酸乙醇溶液
观察：UV-1型三用紫外分析仪
结果：见图1
图1 样品与对照品薄层层析色谱图
Rfa1=0.33 A:PGE2对照品 B：样品
, 百拇医药
Rfb1=0.24 Rfb2=0.33 Rfb3=0.42
Rfb4=0.56
1.6 高效液相分析
色谱柱：Hypersi IODS(5μm,4mm×125mm)
流动相：乙腈-水-三乙胺(45：55：1)
流速：1mL.min-1
柱温：室温
检测波长：210nm
结果：见图2与图3
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图2 对照品高效液相色谱图
图3 样品高效液相色谱图
2 结果与讨论：
在薄层层析中，用PGE2作对照，可以看到Rf值与对照品相同的点，同时在HPLC分析中，样品图谱中出现与对照品保留时间一致的峰，我们认为被蒸馏水浸渍过的红藻真江蓠含PG类化合物，一部分化合物可能在提取过程中转化为结构相似的产物，需通过进一步分离，进行鉴别。在此项研究中，我们曾用过G.asiatica的干燥品及幼苗期的G.asiatica作原料进行提取、分离，未检出PGE2。
参考文献：
(1)中国药物大全.人民卫生出版社.P250
(2)李修良，李美真.江蓠筏式人工育苗技术的研究.中国海洋药物，1990，35(3)：45
(3)张峻甫，夏邦美.中国江蓠属海藻的分类研究，海洋科学集刊Vol.16：125
(4)任国忠，陈美琴.温度对真江蓠生长发育的影响.海洋与湖沼，1986，17(4)：283, 百拇医药
单位：孙健华(山东省海洋药物研究所，青岛 266003) 华玉琴 李会轻 王友兰 高青芝(青岛市药品检验所，青岛 266071)
关键词：真江蓠，前列腺素，化学成分，提取分离
中国海洋药物000310摘要 以青岛沿海产海藻真江蓠(Gracilaria asiatica Zhang et Xia)为原料，从中提取计划生育用药——前列腺素类活性物质，经与对照品的薄层层析及高压液相图谱对照分析，初步鉴定为前腺素E2(PGE2)。
STUDIES ON BIOLOGIC ACTIVE MATERIAL OF RED MARINE ALGAE GRACILARIA ASIATICA
, 百拇医药
Hua yuqin
(Qingdao Institute of Drug Control,Qingdao 266071)
Sun Jianhua
(Qingdao Institute of Drug Control,Qingdao 266071)
Li Huiqing
(Qingdao Institute of Drug Control,Qingdao 266071)
ABSTRACT An principles-drug on birth control was isolated from red marine algae G.asiatica collected from coast of Qingdao.It was identified to be prostaglandin E2 by atlas data of TLC and HPLC and direct comparison with anthentic specimens.
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KEY WORDS Gracilaria,asiatica prostaglandin chemical composition isolation
前列腺素(Prostaglandin，PG)类成分最初是从羊精囊中得到的一类具有兴奋子宫、肠管和降低血压等作用的物质[1]，是与生命活动密切相关的体内激素，用于催产和人工流产成功后，引起国内外医药界的广泛重视。由于此类药物全合成或人工半合成步骤多、工艺复杂，再加上羊储精囊来源缺乏，使其成本很高，本研究使用的真江蓠[2]资源丰富，分布广泛，已人工养殖成功[3]，由此可解决此类药物的来源，降低成本，满足临床研究、开发需要，并将产生显著经济效益和社会效益。
1 材料与方法
1.1 试剂
乙酸乙酯(A.R淄博化学试剂厂)；硫酸钠(C.P上海化学试剂四厂)；二氯甲烷(A.R上海试剂厂)；甲醇(A.R上海化学试剂总厂)；氯仿(A.R上海试剂厂)；PGE2(Sigma公司提供)；硅胶F254预制板(青岛海洋化工厂)
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1.2 仪器
UV-1型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)；岛津LC-10AD型高效液相色谱仪；旋转蒸发器(上海医械专机厂)
1.3 原料
青岛近海采集成熟期[4]真江蓠(Gracilaria asiatica Zhang et Xia)，去除杂藻和泥沙，低温(-20℃)贮藏备用。
1.4 方法
称取低温贮藏的真江蓠5500g，加蒸馏水20L，室温浸渍24h，取出江蓠，切细，用乙醇回流1h，冷却后，过滤，滤渣用乙醇按同样的方法回流2次，提取物浓缩后，用乙酸乙酯-水萃取，乙酸乙酯部分真空干燥，得深绿色油状物，然后在干装的硅胶柱上用二氯甲烷-甲醇系统进行柱层析，分段收集，并用薄层层析追踪检验，活性部分浓缩得黄绿色油状物，再用甲醇-水-醋酸系统在硅胶柱进行反相层析，得淡黄色粉末，以PGE2作对照进行高效液相分析。
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1.5 薄层层析追踪检验
载体：硅胶F254预制板(5×20cm)
展开剂：氯仿：甲醇(9：1)
对照品：PGE2乙酸乙酯溶液
样品：提取物乙酸乙酯溶液
显色剂：30%硫酸乙醇溶液
观察：UV-1型三用紫外分析仪
结果：见图1
图1 样品与对照品薄层层析色谱图
Rfa1=0.33 A:PGE2对照品 B：样品
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Rfb1=0.24 Rfb2=0.33 Rfb3=0.42
Rfb4=0.56
1.6 高效液相分析
色谱柱：Hypersi IODS(5μm,4mm×125mm)
流动相：乙腈-水-三乙胺(45：55：1)
流速：1mL.min-1
柱温：室温
检测波长：210nm
结果：见图2与图3
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图2 对照品高效液相色谱图
图3 样品高效液相色谱图
2 结果与讨论：
在薄层层析中，用PGE2作对照，可以看到Rf值与对照品相同的点，同时在HPLC分析中，样品图谱中出现与对照品保留时间一致的峰，我们认为被蒸馏水浸渍过的红藻真江蓠含PG类化合物，一部分化合物可能在提取过程中转化为结构相似的产物，需通过进一步分离，进行鉴别。在此项研究中，我们曾用过G.asiatica的干燥品及幼苗期的G.asiatica作原料进行提取、分离，未检出PGE2。
参考文献：
(1)中国药物大全.人民卫生出版社.P250
(2)李修良，李美真.江蓠筏式人工育苗技术的研究.中国海洋药物，1990，35(3)：45
(3)张峻甫，夏邦美.中国江蓠属海藻的分类研究，海洋科学集刊Vol.16：125
(4)任国忠，陈美琴.温度对真江蓠生长发育的影响.海洋与湖沼，1986，17(4)：283, 百拇医药