用高效液相色谱法测定中成药舒脑灵胶囊中葛根素的含量
作者：葛新 吕建民 连素萍
单位：葛新(山西医科大学药学院药检室，太原 030001)；吕建民(山西省太原市防疫站理化检验科)；连素萍(山西医科大学第二临床医学院药剂科)
关键词：葛根素；色谱法，高压液相；舒脑灵胶囊
山西医科大学学报000415 摘要：采用高效液相色谱法测定成药舒脑灵胶囊中葛根素的 含量，为控制其制剂的质量提供了可靠而简便的方法。经方法学考察，本法以甲醇-水(25 :75)为流动相、流速1.0 ml/min；UV检测波长250 nm；柱温40 ℃。结果葛根素在10～100 mg/L范围内呈良好线性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.98%, RSD=1.6%。
中图分类号：R286.0 文献标识码：A
文章编号：1007-6611(2000)04-0322-02
, 百拇医药
舒脑灵胶囊，由川芎、葛根、益母草等组方而成，具有活血 、祛风通络之功效，适用于缺血性脑中风及脑动脉硬化症的治疗。葛根素为中成药舒脑 灵中葛根的主要有效成分，本文用高效液相色谱法，对成药中的葛根素进行了含量 测定。
1 仪器、试剂、对照品和供试品
日本岛津LC-10A高效液相色谱仪，SPD-10A紫外检测器，C-RTA数据处理机。甲醇(优级纯) ，水(纯水)。葛根素对照品，由中国药品生物制品检定所出品。舒脑灵胶囊，由山西太 原生物化学制药厂提供。
2 对照品和供试品溶液的配制
2.1 对照品溶液的制备 精称取葛根素对照品5 mg置于50 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至 刻度，混匀备用，精量取该溶液2 ml置于10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，混匀即得20 mg /L葛根素对照品溶液。
, 百拇医药
2.2 供试品溶液的制备 精称取舒脑灵胶囊内容物20 mg置具塞锥形瓶中，精量取加 入甲醇2 5 ml密塞称定重量，超声振荡处理30 min，放冷，称定重量，用甲醇补足减失重量，混匀， 4 000 r/min离心5 min，取上清液，用0.45 μm的滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。
3 色谱条件和测定方法
3.1 色谱条件 色谱柱大连依特制YWG-C18柱150 mm×4.6 mm；流动相为甲醇-水(25∶75 )；流速为1.0 ml/min；检测波长250 nm;柱温40 ℃。
3.2 测定方法 精量取对照品和供试品溶液各5 μl，分别注入高效液相色谱仪测定，记录 色谱图，量取对应的峰面积值，用标准曲线法计算葛根素含量。色谱图见图1，2，3。
, 百拇医药
a: 葛根素
图1 葛根素对照品
表2 样品溶液中烟碱含量测定结果(n=3) 批号
烟碱含量(g/L)
RSD(%)
01
0.624 7
2.05
02
0.586 5
1.69
03
, 百拇医药
0.604 2
1.92
a: 葛根素
图2 供试品中葛根素的分离
a: 葛根素
图3 药材中葛根素的分离
4 测定方法考察
4.1 超声时间选择 供试品及葛根药材粉末经10，20，30，40和50 min超声振荡处理表明 ，超声处理30 min以后药材中的葛根素可提取完全，供试品超声10～50 min结果基本一致 ，故本法选用30 min作为超声提取时间。
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4.2 线性关系考察 精密吸取浓度为10，20，40，60，100 μg/ml的葛根素对照品溶液各5 μl，按上述色谱条件测定，以对照品溶液浓度为X，以对应峰面积值为Y,计算其回归方程，结果为：Y=8 341+
2 253.6 X ，r=0.999 9
说明葛根素进样量在10～100 mg/L的浓度范围内有良好的线性关系。
4.3 精密度和重现性试验 精密吸取对照品溶液重复进样5次，测定其5次葛根素峰面积值 的相对标准偏差RSD=1.52%。取同一批号980509样品6份，按上述方法分别进样，测得样品葛 根素含量分别为5.40%，5.68%，5.54%，5.49%，5.64%，5.43%，RSD＝1.98%。
5 回收率试验
采用加样回收法，取已知含量的舒脑灵胶囊，分别加入葛根素对照品，按上述色谱条件 测定，计算回收率，结果见表1。
, 百拇医药
表1 舒脑灵胶囊葛根素回收率测定结果 序号
供试品葛根素
含量(mg)
对照品
加入量(mg)
测得葛根素
总量(mg)
回收率(%)
1
0.103
0.10
0.199
, 百拇医药
98.03
2
0.096
0.10
0.193
98.47
3
0.099
0.10
0.199
100.00
4
0.096
, 百拇医药
0.10
0.194
98.98
5
0.098
0.10
0.197
99.49
平均回收率98.98%
6 样品测定结果
精密吸取浓度为10，20，40，60和100 mg/L对照品溶液及供试品溶液各5 μl，按上述 色谱条件测定，3批样品测定结果见表2，对照品及样品测定HPLC图谱见图1、2。
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表2 样品葛根素含量测定结果 (n =3) 批号
葛根素含量(mg/粒)
CV(%)
980431
16.3
1.32
980509
16.4
1.25
980616
16.6
1.40
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7 讨论
关于葛根素分析方法报道有薄层扫描法[1，2]，高效液相 色谱法[3]，本实验方法应用超声提取高效液相色谱法测定复方制剂及药 材中的葛根素含量，具有简便、快速、结果准确可靠的特点，便于在实际生产质量 控制及科研单位中应用。
作者简介：葛新，女，1960年7月生，大专，高级实验师.
参考文献：
[1]王宝琴.中成药质量标准与标准的物质研究[M]. 北京： 中国医药科 技出版社， 1994. 313～314.
[2]梁文法，闭业范，简毓琴，等.薄层一紫外分光光度法测定葛根中葛根 素含量[J]. 中成药， 1991, 13 (12): 33.
[3]李光辉，李虹，侯晓明，等.HPLC测定御感袋泡茶中葛根素和黄芩苷的含 量[J]. 中国药杂志，1996. 31 (11): 680.
收稿日期：1999-01-11, 百拇医药
单位：葛新(山西医科大学药学院药检室，太原 030001)；吕建民(山西省太原市防疫站理化检验科)；连素萍(山西医科大学第二临床医学院药剂科)
关键词：葛根素；色谱法，高压液相；舒脑灵胶囊
山西医科大学学报000415 摘要：采用高效液相色谱法测定成药舒脑灵胶囊中葛根素的 含量，为控制其制剂的质量提供了可靠而简便的方法。经方法学考察，本法以甲醇-水(25 :75)为流动相、流速1.0 ml/min；UV检测波长250 nm；柱温40 ℃。结果葛根素在10～100 mg/L范围内呈良好线性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.98%, RSD=1.6%。
中图分类号：R286.0 文献标识码：A
文章编号：1007-6611(2000)04-0322-02
, 百拇医药
舒脑灵胶囊，由川芎、葛根、益母草等组方而成，具有活血 、祛风通络之功效，适用于缺血性脑中风及脑动脉硬化症的治疗。葛根素为中成药舒脑 灵中葛根的主要有效成分，本文用高效液相色谱法，对成药中的葛根素进行了含量 测定。
1 仪器、试剂、对照品和供试品
日本岛津LC-10A高效液相色谱仪，SPD-10A紫外检测器，C-RTA数据处理机。甲醇(优级纯) ，水(纯水)。葛根素对照品，由中国药品生物制品检定所出品。舒脑灵胶囊，由山西太 原生物化学制药厂提供。
2 对照品和供试品溶液的配制
2.1 对照品溶液的制备 精称取葛根素对照品5 mg置于50 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至 刻度，混匀备用，精量取该溶液2 ml置于10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，混匀即得20 mg /L葛根素对照品溶液。
, 百拇医药
2.2 供试品溶液的制备 精称取舒脑灵胶囊内容物20 mg置具塞锥形瓶中，精量取加 入甲醇2 5 ml密塞称定重量，超声振荡处理30 min，放冷，称定重量，用甲醇补足减失重量，混匀， 4 000 r/min离心5 min，取上清液，用0.45 μm的滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。
3 色谱条件和测定方法
3.1 色谱条件 色谱柱大连依特制YWG-C18柱150 mm×4.6 mm；流动相为甲醇-水(25∶75 )；流速为1.0 ml/min；检测波长250 nm;柱温40 ℃。
3.2 测定方法 精量取对照品和供试品溶液各5 μl，分别注入高效液相色谱仪测定，记录 色谱图，量取对应的峰面积值，用标准曲线法计算葛根素含量。色谱图见图1，2，3。
, 百拇医药
a: 葛根素
图1 葛根素对照品
表2 样品溶液中烟碱含量测定结果(n=3) 批号
烟碱含量(g/L)
RSD(%)
01
0.624 7
2.05
02
0.586 5
1.69
03
, 百拇医药
0.604 2
1.92
a: 葛根素
图2 供试品中葛根素的分离
a: 葛根素
图3 药材中葛根素的分离
4 测定方法考察
4.1 超声时间选择 供试品及葛根药材粉末经10，20，30，40和50 min超声振荡处理表明 ，超声处理30 min以后药材中的葛根素可提取完全，供试品超声10～50 min结果基本一致 ，故本法选用30 min作为超声提取时间。
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4.2 线性关系考察 精密吸取浓度为10，20，40，60，100 μg/ml的葛根素对照品溶液各5 μl，按上述色谱条件测定，以对照品溶液浓度为X，以对应峰面积值为Y,计算其回归方程，结果为：Y=8 341+
2 253.6 X ，r=0.999 9
说明葛根素进样量在10～100 mg/L的浓度范围内有良好的线性关系。
4.3 精密度和重现性试验 精密吸取对照品溶液重复进样5次，测定其5次葛根素峰面积值 的相对标准偏差RSD=1.52%。取同一批号980509样品6份，按上述方法分别进样，测得样品葛 根素含量分别为5.40%，5.68%，5.54%，5.49%，5.64%，5.43%，RSD＝1.98%。
5 回收率试验
采用加样回收法，取已知含量的舒脑灵胶囊，分别加入葛根素对照品，按上述色谱条件 测定，计算回收率，结果见表1。
, 百拇医药
表1 舒脑灵胶囊葛根素回收率测定结果 序号
供试品葛根素
含量(mg)
对照品
加入量(mg)
测得葛根素
总量(mg)
回收率(%)
1
0.103
0.10
0.199
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98.03
2
0.096
0.10
0.193
98.47
3
0.099
0.10
0.199
100.00
4
0.096
, 百拇医药
0.10
0.194
98.98
5
0.098
0.10
0.197
99.49
平均回收率98.98%
6 样品测定结果
精密吸取浓度为10，20，40，60和100 mg/L对照品溶液及供试品溶液各5 μl，按上述 色谱条件测定，3批样品测定结果见表2，对照品及样品测定HPLC图谱见图1、2。
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表2 样品葛根素含量测定结果 (n =3) 批号
葛根素含量(mg/粒)
CV(%)
980431
16.3
1.32
980509
16.4
1.25
980616
16.6
1.40
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7 讨论
关于葛根素分析方法报道有薄层扫描法[1，2]，高效液相 色谱法[3]，本实验方法应用超声提取高效液相色谱法测定复方制剂及药 材中的葛根素含量，具有简便、快速、结果准确可靠的特点，便于在实际生产质量 控制及科研单位中应用。
作者简介：葛新，女，1960年7月生，大专，高级实验师.
参考文献：
[1]王宝琴.中成药质量标准与标准的物质研究[M]. 北京： 中国医药科 技出版社， 1994. 313～314.
[2]梁文法，闭业范，简毓琴，等.薄层一紫外分光光度法测定葛根中葛根 素含量[J]. 中成药， 1991, 13 (12): 33.
[3]李光辉，李虹，侯晓明，等.HPLC测定御感袋泡茶中葛根素和黄芩苷的含 量[J]. 中国药杂志，1996. 31 (11): 680.
收稿日期：1999-01-11, 百拇医药