海洋硫酸多糖916对实验性高脂血症大鼠血浆中含硫氨基酸的影响
作者：王远红 徐家敏 耿美玉 邓岗 管华诗
单位：王远红 徐家敏 耿美玉 邓岗 管华诗(青岛海洋大学，青岛 266003)
关键词：硫酸多糖“916”，含硫氨基酸，高脂血症，大鼠
中国海洋药物000406 摘要 观察了硫酸多糖916对实验性高脂血症大鼠血浆中游离含硫氨基酸水平的影响。结果表明：高脂血症大鼠血浆中含硫氨基酸均比对照组明显升高；916给药组能够明显降低血浆中含硫氨基酸的水平。
EFFECTS OF “916” ON PLASMA SULFATED AMINO ACIDS LEVEL IN EXPERIMENTAL HYPERCHOLESTEROMIC RATS
Wang Yuanhong，Xu Jiamin，Geng Meiyu，Deng Gang，Guan Huashi
, 百拇医药
(Institute of Marine Drugs and Foods of Qingdao Ocean University,Qingdao 266003)
ABSTRACT The effects of “916”,a kind of marine sulfated polysaccharides,on plasma free sulfated amino acid levels in experimental hypercholesteromic rats were studied.The resuts indicated that “916” could decrease the levels of sulfated amino acids in plasma of hypercholesteromic rats.
KEY WORDS “916” marine sulfated polysaccharides,sulfated amino acid,hypercholesteromic,rats
, 百拇医药
动脉粥样硬化是许多心脑血管疾病的主要病理基础，研究表明，血浆中同型半胱氨酸水平升高是导致冠状动脉、大动脉和下肢动脉闭塞以及周围末稍动脉粥样硬化的一个独立危险因素，它的存在与血浆中总胆固醇有着密切的关系[1～3]。“916”是一种新型海洋硫酸多糖物质，具有降低胆固醇作用[4]。关于“916”对含硫氨基酸(sulfur amino acid;SAA)影响未见报道。本文观察了“916”对高脂血症大鼠血浆游离氨基酸中SAA的影响。
1 材料和方法
1.1 实验动物 健康雄性Wistar大鼠30只，体重(180±20)g，由山东省医科大学动物中心提供。
1.2 药品 “916”批号：970420，由青岛海洋大学药物与食品研究所提供；总胆固醇试剂盒，批号：970510，北京中生生物工程高技术公司生产；生理体液氨基酸标准混合液，日本和光株式会社产品；同型半胱氨酸，分析纯，上海试剂厂分装；磺基水扬酸、乙二胺四乙酸二钠，分析纯，上海化学试剂厂。
, 百拇医药
1.3 仪器 日立835-50型氨基酸自动分析仪，CTE-240型冷却器，LXJ-Ⅱ型离心机。
1.4 动物分组与给药 饲养一周的大鼠，随机分成4组，每组6只。正常对照组(N)，喂以普通饲料；高脂对照组(H)，喂以高脂饲料；“916”给药分为低剂量(Ⅰ)和高剂量(Ⅱ)组，喂以高脂饲料的同时，每日灌服“916”为25、50mg.kg-1。饲料配方见文献[5]。连续喂养10d，禁食12h，心脏取血。
1.5 样品制备 1mL血液加上0.1mL 0.38mol.L-1 Na2EDTA作抗凝剂，3000r.min-1离心10min，制备血浆，加入10%磺基水杨酸0.7mL，室温静止30min，3000r.min-1离心10min，取上清液上机，测定血浆中游离氨基酸含量。应用CHOD-PAP法测定血浆中总胆固醇的含量。
, 百拇医药
2 结果
2.1 “916”对高脂血症大鼠血浆中SAA总量和总胆固醇含量的影响
高脂血症大鼠血浆中SAA总量和总胆固醇含量(TC)与正常对照组比较有明显升高(P<0.01)。“916”高、低剂量组，均能明显降低SAA总量和总胆固醇含量(见表1)。
表1 “916”对高脂血症大鼠血浆SAA和总胆固醇
含量的影响(±s，n=6) 组 别
“916”剂量
mg.kg-1
SAA总量
mmol.L-1
, http://www.100md.com
TC
mmol.L-1
正常组(N)
高脂组(H)
“916”Ⅰ
“916”Ⅱ
/
/
25
50
0.055±0.004
1.670±0.144ΔΔ
, 百拇医药
0.525±0.024▲▲
0.340±0.027▲▲
1.84±0.21
6.71±1.40△△
4.30±0.71▲▲
4.21±0.61▲▲
△△P<0.01 vs 正常组 ▲▲P<0.01 vs 高脂组
2.2 “916”对高脂血症大鼠血浆SAA中胱氨酸(Cys)、蛋氨酸(Met)、胱硫醚(Cysthi)同型半胱氨酸(Hcys)含量的影响
, 百拇医药
高脂饲料喂养大鼠血浆同型半胱氨酸、胱硫醚、蛋氨酸含量明显升高，但胱氨酸含量却显著降低。“916”高、低剂量都能明显降低同型半胱氨酸、胱硫醚、蛋氨酸的含量，升高胱氨酸含量(见表2)。
表2 “916”对高脂血症大鼠血浆SAA中Cys、Met、Cysthi、Hcys含量的影响(mmol/L,±s,n=6)
Cys
Met
Cysthi
Hcys
正常组(N)
高脂组(H)
“916”Ⅰ
, 百拇医药
“916”Ⅱ
0.012±0.003
0.005±0.001ΔΔ
0.010±0.002▲▲
0.011±0.003▲▲
0.043±0.003
0.059±0.010Δ
0.038±0.005▲▲
0.047±0.008▲
0.000±0.00
, http://www.100md.com
0.039±0.009
0.027±0.006
0.010±0.002▲
0.000±0.00
1.616±0.139ΔΔ
0.398±0.093▲▲
0.285±0.033▲▲
ΔΔP<0.01 ΔP<0.05 vs正常组
▲▲P<0.01 ▲P<0.05 vs高脂组
, 百拇医药
蛋氨酸是必须氨基酸，蛋氨酸含量由表2可知，高脂组明显高于正常组，结合表1和表2，可以看出高脂组，蛋氨酸与SAA的比值，明显降低，而同型半胱氨酸与SAA的比值却明显升高。
3 讨论
体内同型半胱氨酸只来源于蛋氨酸的分解代谢，途径之一是胱硫醚代谢，胱硫醚-β-合成酶和胱硫醚-γ-裂合酶是胱硫醚代谢的关键酶。在正常生理条件下，通过硫的转移，营养成分蛋氨酸变成同型半胱氨酸，而同型半胱氨酸本身变成半胱氨酸或者重新酸化变成蛋氨酸，但当蛋氨酸代谢减弱和β-合成酶不足时，可导致血浆同型半胱氨酸大量积累[6]。
作者发现“916”能够明显升高胱氨酸、蛋氨酸与SAA的比值，降低同型半胱氨酸、胱硫醚含量。提示“916”是通过改善蛋氨酸的代谢途径来降低同型半胱氨酸含量。
前期研究发现“916”能够明显降低大鼠、鹌鹑血浆中总胆固醇和低密度脂蛋白含量，进而抑制总胆固醇在动脉壁中的沉积[4、7]。本文发现“916”在降低同型半胱氨酸含量同时，能明显降低总胆固醇含量。因此推测“916”可能是通过降低同型半胱氨酸含量，改善SAA代谢来发挥其调动血脂的作用。关于同型半胱氨酸与高脂血症之间相互关系还有待于进一步研究。
, 百拇医药
国家"863"课题资助项目(编号819-07-03)
参考文献
[1]MoCully KS.Chemical pathology of homocysteine I.Atherogenesis.AnnClin LabSci,1993,23(6):93
[2]Clarke R,Fitzgerald D,O′Briew C,et al.Hyperhomocysteinaemia:a risk factor for extracranial carotid artery atherosclerosis.Ir J Med Sci,1992,161(3):5
[3]Taylor LMJ,Defrang RD,Harris EJJ,et al.The association of elevated plasma homocyst(e)ine with progression of symptomatic peripheral arterial disease.J VascSurg,1991,13(1):36
, 百拇医药
[4]耿美玉.类肝素新药“916”对高脂血症大鼠血清蛋白及过氧化脂质产物含量的影响青岛海洋大学学报，1992，《海洋药物》专辑：14
[5]耿美玉.超氧化物歧化酶对实验性动脉粥样硬化的预防作用.山东医科大学学报，1991，29(2)：123
[6]Daroon D,Barlatier A,Charpiot P,et al.The homocysteinemia vascular risk factor Methodolgies and application to a clinical case.J Mal Vasc,1991,16(4):66
[7]邓岗.“916”对鹌鹑实用性动脉粥样硬化的预防作用.青岛海洋大学学报，1992，《海洋药物》专辑：6
(收稿日期：2000-05-16), 百拇医药
单位：王远红 徐家敏 耿美玉 邓岗 管华诗(青岛海洋大学，青岛 266003)
关键词：硫酸多糖“916”，含硫氨基酸，高脂血症，大鼠
中国海洋药物000406 摘要 观察了硫酸多糖916对实验性高脂血症大鼠血浆中游离含硫氨基酸水平的影响。结果表明：高脂血症大鼠血浆中含硫氨基酸均比对照组明显升高；916给药组能够明显降低血浆中含硫氨基酸的水平。
EFFECTS OF “916” ON PLASMA SULFATED AMINO ACIDS LEVEL IN EXPERIMENTAL HYPERCHOLESTEROMIC RATS
Wang Yuanhong，Xu Jiamin，Geng Meiyu，Deng Gang，Guan Huashi
, 百拇医药
(Institute of Marine Drugs and Foods of Qingdao Ocean University,Qingdao 266003)
ABSTRACT The effects of “916”,a kind of marine sulfated polysaccharides,on plasma free sulfated amino acid levels in experimental hypercholesteromic rats were studied.The resuts indicated that “916” could decrease the levels of sulfated amino acids in plasma of hypercholesteromic rats.
KEY WORDS “916” marine sulfated polysaccharides,sulfated amino acid,hypercholesteromic,rats
, 百拇医药
动脉粥样硬化是许多心脑血管疾病的主要病理基础，研究表明，血浆中同型半胱氨酸水平升高是导致冠状动脉、大动脉和下肢动脉闭塞以及周围末稍动脉粥样硬化的一个独立危险因素，它的存在与血浆中总胆固醇有着密切的关系[1～3]。“916”是一种新型海洋硫酸多糖物质，具有降低胆固醇作用[4]。关于“916”对含硫氨基酸(sulfur amino acid;SAA)影响未见报道。本文观察了“916”对高脂血症大鼠血浆游离氨基酸中SAA的影响。
1 材料和方法
1.1 实验动物 健康雄性Wistar大鼠30只，体重(180±20)g，由山东省医科大学动物中心提供。
1.2 药品 “916”批号：970420，由青岛海洋大学药物与食品研究所提供；总胆固醇试剂盒，批号：970510，北京中生生物工程高技术公司生产；生理体液氨基酸标准混合液，日本和光株式会社产品；同型半胱氨酸，分析纯，上海试剂厂分装；磺基水扬酸、乙二胺四乙酸二钠，分析纯，上海化学试剂厂。
, 百拇医药
1.3 仪器 日立835-50型氨基酸自动分析仪，CTE-240型冷却器，LXJ-Ⅱ型离心机。
1.4 动物分组与给药 饲养一周的大鼠，随机分成4组，每组6只。正常对照组(N)，喂以普通饲料；高脂对照组(H)，喂以高脂饲料；“916”给药分为低剂量(Ⅰ)和高剂量(Ⅱ)组，喂以高脂饲料的同时，每日灌服“916”为25、50mg.kg-1。饲料配方见文献[5]。连续喂养10d，禁食12h，心脏取血。
1.5 样品制备 1mL血液加上0.1mL 0.38mol.L-1 Na2EDTA作抗凝剂，3000r.min-1离心10min，制备血浆，加入10%磺基水杨酸0.7mL，室温静止30min，3000r.min-1离心10min，取上清液上机，测定血浆中游离氨基酸含量。应用CHOD-PAP法测定血浆中总胆固醇的含量。
, 百拇医药
2 结果
2.1 “916”对高脂血症大鼠血浆中SAA总量和总胆固醇含量的影响
高脂血症大鼠血浆中SAA总量和总胆固醇含量(TC)与正常对照组比较有明显升高(P<0.01)。“916”高、低剂量组，均能明显降低SAA总量和总胆固醇含量(见表1)。
表1 “916”对高脂血症大鼠血浆SAA和总胆固醇
含量的影响(±s，n=6) 组 别
“916”剂量
mg.kg-1
SAA总量
mmol.L-1
, http://www.100md.com
TC
mmol.L-1
正常组(N)
高脂组(H)
“916”Ⅰ
“916”Ⅱ
/
/
25
50
0.055±0.004
1.670±0.144ΔΔ
, 百拇医药
0.525±0.024▲▲
0.340±0.027▲▲
1.84±0.21
6.71±1.40△△
4.30±0.71▲▲
4.21±0.61▲▲
△△P<0.01 vs 正常组 ▲▲P<0.01 vs 高脂组
2.2 “916”对高脂血症大鼠血浆SAA中胱氨酸(Cys)、蛋氨酸(Met)、胱硫醚(Cysthi)同型半胱氨酸(Hcys)含量的影响
, 百拇医药
高脂饲料喂养大鼠血浆同型半胱氨酸、胱硫醚、蛋氨酸含量明显升高，但胱氨酸含量却显著降低。“916”高、低剂量都能明显降低同型半胱氨酸、胱硫醚、蛋氨酸的含量，升高胱氨酸含量(见表2)。
表2 “916”对高脂血症大鼠血浆SAA中Cys、Met、Cysthi、Hcys含量的影响(mmol/L,±s,n=6)
Cys
Met
Cysthi
Hcys
正常组(N)
高脂组(H)
“916”Ⅰ
, 百拇医药
“916”Ⅱ
0.012±0.003
0.005±0.001ΔΔ
0.010±0.002▲▲
0.011±0.003▲▲
0.043±0.003
0.059±0.010Δ
0.038±0.005▲▲
0.047±0.008▲
0.000±0.00
, http://www.100md.com
0.039±0.009
0.027±0.006
0.010±0.002▲
0.000±0.00
1.616±0.139ΔΔ
0.398±0.093▲▲
0.285±0.033▲▲
ΔΔP<0.01 ΔP<0.05 vs正常组
▲▲P<0.01 ▲P<0.05 vs高脂组
, 百拇医药
蛋氨酸是必须氨基酸，蛋氨酸含量由表2可知，高脂组明显高于正常组，结合表1和表2，可以看出高脂组，蛋氨酸与SAA的比值，明显降低，而同型半胱氨酸与SAA的比值却明显升高。
3 讨论
体内同型半胱氨酸只来源于蛋氨酸的分解代谢，途径之一是胱硫醚代谢，胱硫醚-β-合成酶和胱硫醚-γ-裂合酶是胱硫醚代谢的关键酶。在正常生理条件下，通过硫的转移，营养成分蛋氨酸变成同型半胱氨酸，而同型半胱氨酸本身变成半胱氨酸或者重新酸化变成蛋氨酸，但当蛋氨酸代谢减弱和β-合成酶不足时，可导致血浆同型半胱氨酸大量积累[6]。
作者发现“916”能够明显升高胱氨酸、蛋氨酸与SAA的比值，降低同型半胱氨酸、胱硫醚含量。提示“916”是通过改善蛋氨酸的代谢途径来降低同型半胱氨酸含量。
前期研究发现“916”能够明显降低大鼠、鹌鹑血浆中总胆固醇和低密度脂蛋白含量，进而抑制总胆固醇在动脉壁中的沉积[4、7]。本文发现“916”在降低同型半胱氨酸含量同时，能明显降低总胆固醇含量。因此推测“916”可能是通过降低同型半胱氨酸含量，改善SAA代谢来发挥其调动血脂的作用。关于同型半胱氨酸与高脂血症之间相互关系还有待于进一步研究。
, 百拇医药
国家"863"课题资助项目(编号819-07-03)
参考文献
[1]MoCully KS.Chemical pathology of homocysteine I.Atherogenesis.AnnClin LabSci,1993,23(6):93
[2]Clarke R,Fitzgerald D,O′Briew C,et al.Hyperhomocysteinaemia:a risk factor for extracranial carotid artery atherosclerosis.Ir J Med Sci,1992,161(3):5
[3]Taylor LMJ,Defrang RD,Harris EJJ,et al.The association of elevated plasma homocyst(e)ine with progression of symptomatic peripheral arterial disease.J VascSurg,1991,13(1):36
, 百拇医药
[4]耿美玉.类肝素新药“916”对高脂血症大鼠血清蛋白及过氧化脂质产物含量的影响青岛海洋大学学报，1992，《海洋药物》专辑：14
[5]耿美玉.超氧化物歧化酶对实验性动脉粥样硬化的预防作用.山东医科大学学报，1991，29(2)：123
[6]Daroon D,Barlatier A,Charpiot P,et al.The homocysteinemia vascular risk factor Methodolgies and application to a clinical case.J Mal Vasc,1991,16(4):66
[7]邓岗.“916”对鹌鹑实用性动脉粥样硬化的预防作用.青岛海洋大学学报，1992，《海洋药物》专辑：6
(收稿日期：2000-05-16), 百拇医药