补气通络方对大鼠坐骨神经功能指数恢复的影响
作者：何振辉 劳镇国 姚珍松 晋大祥 杨俊兴 朱庆堂 朱苏滨 曾园山 梁颂名
单位：杨俊兴 朱苏滨(广州中医药大学第一附属医院，广州 510405)；朱庆堂 曾园山(中山医科大学，广州 510089)；梁颂名(广州中医药大学中药学院，广州 510405)
关键词：@补气通络方/药理学；坐骨神经/损伤；周围神经系统疾病/中药疗法；@坐骨神经功能指数
广州中医药大学学报000418摘要：目的：通过观察由黄芪、人参、当归、川芎、丹参等药组成的补气通络方对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的作用，为临床用药提供依据。用清洁级Wistar大鼠48只，行右坐骨神经切断后即刻行神经外膜缝合法造模，然后随机分成4组：补气通络胶囊剂组、补气通络注射剂组、维生素B1+B6组和空白对照组。以手术方式造成右侧坐骨神经损伤，并于手术后2周到12周期间，每2周进行1次足印测定，用测得的坐骨神经功能指数(ISFI)作为观测指标进行验证。结果：用了补气通络方的2个组的大鼠坐骨神经功能指数恢复均优于维生素B1+B6组及空白对照组(P<0.05或P<0.01)。提示补气通络方有助于周围神经损伤后神经功能的恢复。
, 百拇医药
中图分类号：R651.3 文献标识码：A
文章编号：1007-3213(2000)0348-03
Effect of Buqi Tongluo Formula on Rat Sciatic Nerve Function Index
HE Zhenhui,YAO Zhensong, JING Daxiang,YANG Junxing, ZHU Subin
(The First Affiliated Hospital, Guangzhou University of TCM, Guangzhou 510405,China)
LAO Zhenguo, , ZHU Qingtang, ZENG Yuanshan
, 百拇医药
(Sun Yat-sen University of Medical Sciences, Guangzhou,China)
Abstract: Buqi Tongluo Formula is composed of Radix Astragali seu Hedysari, Radix Ginseng, Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Radix Salviae Miltiorrhizae, etc., and is effective for the neural regeneration after peripheral nerve injury. Forty-eight clean-level Wistar rats receiving cutting of right sciatic nerve immediately followed by suture of neural adventitia served as nerve injury models. They were randomly allocated to 4 groups: Group 1 (treated with Buqi Tongluo Granule), Group 2 (treated with Buqi Tongluo Injection), Group 3 (treated with Vitamin B1and B6) and Group 4 (blank control). Sciatic nerve function index (SNFI) was determined every 2 weeks from 2 to 12 weeks after operation by checking rat footprint.The results showed that the restoration of SNFI in Group 1 and Group 2 was better than those in Group 3 and Group 4 (P<0.05 or 0.01). It is indicated that Buqi Tongluo Formula is beneficial to the recovery of peripheral nerve function after injury.
, 百拇医药
Key words:@BUQI TONGLUO FORMULA/pharmacology; SCIATIC NERVE/injuries;PERIPHERAL NERVE DISEASES/TCD therapy;@SCIATIC NERVE FUNCTION INDEX
周围神经损伤，是临床上的常见外伤，目前治疗方法很多，疗效却不甚理想。本院协定处方补气通络胶囊及注射剂，用于临床，疗效显著。为探讨其作用机制，特用大鼠坐骨神经功能指数(ISFI)测定法对该方进行验证，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 动物分组 封闭群清洁级雄性Wistar大鼠48只(由中山医科大学动物中心提供)，体重(250±20)g，随机分成4组：Ⅰ组为补气通络胶囊组，Ⅱ组为补气通络注射液组，Ⅲ组为维生素B1+B6组，Ⅳ组为空白组，每组12只。Ⅰ组和Ⅱ组为观察组，Ⅲ组和Ⅳ组分别为阳性和阴性对照组。
, 百拇医药
1.2 造模方法 无菌条件下沿大鼠右后肢后侧作纵形切口，显露坐骨神经，10倍手术显微镜下将梨状肌下缘下1cm范围内神经仔细游离后，在梨状肌下缘下0.5 cm处横形切断坐骨神经，并立即用10～0无损伤缝合线作原位神经外膜吻合术。先造模，后统一编号分组，以期保持组间均衡。
1.3 给药方法 Ⅰ组给补气通络胶囊(由黄芪、人参、当归、川芎、丹参等组成，由广州中医药大学第一附属医院药剂科制备、提供。规格：0.5 g/胶囊)，将药末取出，用生理盐水稀释成9%混悬液灌胃，每mL混悬液含生药0.09 g，按大鼠每100g体重1mL给药，每日给药1次(相当于生药 0.9 g.kg-1.d-1)；Ⅱ组给予补气通络注射剂(来源同Ⅰ组。规格：10mL/安瓿)，该注射剂每mL含生药0.45g，用无菌生理盐水稀释成9%溶液，即每mL溶液含生药0.09g，按大鼠每100g体重1mL腹腔注射，每日1次(相当于生药 0.9 g.kg-1.d-1)；Ⅲ组给予维生素B1加B6片剂(广州市桥制药厂出品，规格10mg/片)，研成粉末后用生理盐水制成0.15%混悬液灌胃，每mL含VitB1和VitB6各1.5 mg，按大鼠每100g体重1mL灌胃，每日1次(相当于成品药15mg.kg-1.d-1)[1]；Ⅳ组给予生理盐水按每100g体重1mL灌胃，每日1次。
, 百拇医药
1.4 足印观测 参照沈宁江、朱家恺的方法[2]，自制成一长60cm,宽10cm，高15cm的两端开口的木槽，将70g白纸裁成与木槽等长等宽后铺于槽底。大鼠双后肢用颜料浸至双踝关节着色后，将大鼠放于槽的一端，使其自行向木槽另一端行走，每侧后肢各留下4～5个足印，选择印迹清晰的足印分别测量正常足(N)和伤侧足(E)的3个指标：(1)lPL(足印长度)：即从足尖到足跟的最大距离；(2)lTS(足趾宽度)：第1趾到第5趾的距离；(3)lIT(中间足趾宽度)：第2趾到第4趾的距离。结果精确到0.1 mm。将上述数据代入Bain公式，即可计算出坐骨神经功能指数。Bain公式如下：ISFI=109.5(lE，TS-lN,TS)/lN,TS-38.3(lE,PL-lN,PL)/lN,PL+13.3(lE，IT-lN，IT/lN，IT)-8.8
, 百拇医药
坐骨神经功能指数以lSFI=0为正常，ISFI=-100为完全损伤。
2 结果
各组大鼠术后2周起每2周作1次足印测定，直到术后12周，各组大鼠ISFI的恢复过程与程度可以反映出坐骨神经恢复过程及程度[2]。ISFI测量结果显示：术后4周内各组大鼠均呈神经完全损伤表现，4周起开始恢复。经成组设计样本资料的t检验，其中Ⅰ组(补气通络胶囊组)和Ⅱ组(补气通络注射液组)恢复好于Ⅲ组(VitB1+B6组)(P<0.05)和Ⅳ组(空白组)(P<0.01)；Ⅲ组亦优于Ⅳ组(P<0.05)。Ⅳ组恢复最慢；而Ⅰ组和Ⅱ组间差异无显著性(P>0.05)。结果见表1。
表1 各组不同时段坐骨神经功能指数(ISFI)比较 (±s) 组 别
, 百拇医药
2周
4周
6周
8周
10周
12周
(Ⅰ)补气通络胶囊组
-95.65±1.42
-66.00±1.23*△
-60.70±2.14**△
-53.7±0.68**△
, 百拇医药 -49.80±0.88**△
-41.80±0.52**△
(Ⅱ)补气通络注射液组
-93.65±1.26
-65.40±1.06*△
-61.30±0.98**△
-53.00±1.47**△
-49.5±0.79**△
-40.83±0.56**△
, 百拇医药
(Ⅲ)维生素B1加B6组
-96.18±1.77
-78.90±0.81
-74.00±2.14*
-67.40±2.14*
-61.2±0.58*
-53.93±0.31*
(Ⅳ)空白组
-96.03±0.96
-84.60±0.59
, http://www.100md.com
-82.40±0.32
-69.24±0.43
-66.60±0.17
-60.88±0.44
*与Ⅳ组比较P<0.05，**P<0.01；△与Ⅲ组比较P<0.05
3 讨论
3.1 足印测定法对大鼠坐骨神经损伤的评价作用 周围神经损伤后，经过适当处理，神经会通过Wallerian变性、Schwann细胞增生等改变逐渐恢复。当然，不同类型的损伤，决定了其恢复程度不一样。Sunderland4级以上的损伤，即使进行了及时而准确的端端吻合，神经功能通常也不能完全恢复[3]。对于有手术指征者，应及时手术处理。目前的术后治疗，主要是促进神经恢复的速度，提高神经恢复的程度，以及防止或减少肌肉萎缩，保护关节功能等。对于神经恢复程度的评价，大致有组织学手段、神经电生理学方法、生理学方法等。沈宁江、朱家恺证明，坐骨神经功能指数(SFI)与上述指标之间呈正相关，认为SFI是观察和评价大鼠坐骨神经损伤恢复程度的可靠指标[2]。
, 百拇医药
3.2 补气通络方的作用机制 补气通络方由黄芪、人参(新开河参)、当归、川芎、丹参等中药组成。本方有补气行血、通络散结、生肌长肉的功效。周围神经损伤断裂后，其所支配的肌肉、皮肤的运动、感觉功能即发生障碍，甚至完全丧失而表现为瘫痪麻痹，随后便可见不同程度肌萎缩，属中医的经络伤、痿症范畴。因伤后经络不通，经气不续，气虚血滞，肢体皮、肉得不到正常气血的温养，以致痿软、麻木不仁。脾主肌肉，肺主皮毛，治法当补脾、补肺。所以治则为补气生肌，活血通络。方中重用黄芪，以补气生肌，人参大补元气，二药均入脾肺二经，共用则可使气旺而促血行，为君药；当归活血而补血，为臣药；丹参、川芎互配，增加活血祛瘀之功，共为佐使药。诸药配伍共奏补气生肌，活血通络之功效，可促进损伤局部血液循环，改善神经营养，从而促进周围神经轴突再生，促进神经传导功能恢复，让瘫痪萎软的肌肉、麻木失觉的皮肤逐渐恢复正常的神经营养及支配。既往有学者的研究证明，本方中各味中药可能分别通过促进机体蛋白质的合成，增加机体对各种有害刺激的防御能力，提高神经元的活性及其受伤后的再生能力，减轻神经水肿、炎症、出血、变性和脱髓鞘，减少线粒体损伤，增加线粒体的数量，改善血液循环等作用来促进周围神经的再生的作用[4]。其中黄芪是比较公认的对周围神经损伤有肯定疗效的中药，可能与其富含微量元素硒、提高机体的免疫功能、增加血浆cAMP含量、延长二倍体细胞的生长周期，促进蛋白质合成，从而增强修复能力有关[5]。本实验结果也显示本方有助于大鼠坐骨神经损伤后的恢复。提示在临床上对周围神经损伤的患者用补气通络的中药治疗可能会有一定的疗效。
, http://www.100md.com
基金项目：广东省中医药管理局资助项目(编号：97197)
作者简介：何振辉(1943-)，男，主任医师，硕士生导师；
参考文献：
[1] 邵水金，单宝枝，余安胜.电针对大鼠神经损伤后轴突转运的影响[J].针刺研究，1998，23(1)：66
[2] 沈宁江，朱家恺.坐骨神经功能指数在神经功能评价中的应用[J].中华显微外科杂志，1993，16(4)：284
[3] 陆裕朴，傅炳峨.周围神经损伤[M].见：涂通今主编.急症神经外科学.北京：人民军医出版社，1995.288-293
[4] 陈德松.五种药物对小鼠周围神经再生影响的实验研究[J].手外科杂志，1989，5：159
[5] 高飞，王明喜，李新沁.足印测定法评价补阳还五汤对周围神经再生的作用[J].中医正骨，1997，9(2)：20
收稿日期：2000-06-06, 百拇医药
单位：杨俊兴 朱苏滨(广州中医药大学第一附属医院，广州 510405)；朱庆堂 曾园山(中山医科大学，广州 510089)；梁颂名(广州中医药大学中药学院，广州 510405)
关键词：@补气通络方/药理学；坐骨神经/损伤；周围神经系统疾病/中药疗法；@坐骨神经功能指数
广州中医药大学学报000418摘要：目的：通过观察由黄芪、人参、当归、川芎、丹参等药组成的补气通络方对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的作用，为临床用药提供依据。用清洁级Wistar大鼠48只，行右坐骨神经切断后即刻行神经外膜缝合法造模，然后随机分成4组：补气通络胶囊剂组、补气通络注射剂组、维生素B1+B6组和空白对照组。以手术方式造成右侧坐骨神经损伤，并于手术后2周到12周期间，每2周进行1次足印测定，用测得的坐骨神经功能指数(ISFI)作为观测指标进行验证。结果：用了补气通络方的2个组的大鼠坐骨神经功能指数恢复均优于维生素B1+B6组及空白对照组(P<0.05或P<0.01)。提示补气通络方有助于周围神经损伤后神经功能的恢复。
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中图分类号：R651.3 文献标识码：A
文章编号：1007-3213(2000)0348-03
Effect of Buqi Tongluo Formula on Rat Sciatic Nerve Function Index
HE Zhenhui,YAO Zhensong, JING Daxiang,YANG Junxing, ZHU Subin
(The First Affiliated Hospital, Guangzhou University of TCM, Guangzhou 510405,China)
LAO Zhenguo, , ZHU Qingtang, ZENG Yuanshan
, 百拇医药
(Sun Yat-sen University of Medical Sciences, Guangzhou,China)
Abstract: Buqi Tongluo Formula is composed of Radix Astragali seu Hedysari, Radix Ginseng, Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Radix Salviae Miltiorrhizae, etc., and is effective for the neural regeneration after peripheral nerve injury. Forty-eight clean-level Wistar rats receiving cutting of right sciatic nerve immediately followed by suture of neural adventitia served as nerve injury models. They were randomly allocated to 4 groups: Group 1 (treated with Buqi Tongluo Granule), Group 2 (treated with Buqi Tongluo Injection), Group 3 (treated with Vitamin B1and B6) and Group 4 (blank control). Sciatic nerve function index (SNFI) was determined every 2 weeks from 2 to 12 weeks after operation by checking rat footprint.The results showed that the restoration of SNFI in Group 1 and Group 2 was better than those in Group 3 and Group 4 (P<0.05 or 0.01). It is indicated that Buqi Tongluo Formula is beneficial to the recovery of peripheral nerve function after injury.
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Key words:@BUQI TONGLUO FORMULA/pharmacology; SCIATIC NERVE/injuries;PERIPHERAL NERVE DISEASES/TCD therapy;@SCIATIC NERVE FUNCTION INDEX
周围神经损伤，是临床上的常见外伤，目前治疗方法很多，疗效却不甚理想。本院协定处方补气通络胶囊及注射剂，用于临床，疗效显著。为探讨其作用机制，特用大鼠坐骨神经功能指数(ISFI)测定法对该方进行验证，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 动物分组 封闭群清洁级雄性Wistar大鼠48只(由中山医科大学动物中心提供)，体重(250±20)g，随机分成4组：Ⅰ组为补气通络胶囊组，Ⅱ组为补气通络注射液组，Ⅲ组为维生素B1+B6组，Ⅳ组为空白组，每组12只。Ⅰ组和Ⅱ组为观察组，Ⅲ组和Ⅳ组分别为阳性和阴性对照组。
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1.2 造模方法 无菌条件下沿大鼠右后肢后侧作纵形切口，显露坐骨神经，10倍手术显微镜下将梨状肌下缘下1cm范围内神经仔细游离后，在梨状肌下缘下0.5 cm处横形切断坐骨神经，并立即用10～0无损伤缝合线作原位神经外膜吻合术。先造模，后统一编号分组，以期保持组间均衡。
1.3 给药方法 Ⅰ组给补气通络胶囊(由黄芪、人参、当归、川芎、丹参等组成，由广州中医药大学第一附属医院药剂科制备、提供。规格：0.5 g/胶囊)，将药末取出，用生理盐水稀释成9%混悬液灌胃，每mL混悬液含生药0.09 g，按大鼠每100g体重1mL给药，每日给药1次(相当于生药 0.9 g.kg-1.d-1)；Ⅱ组给予补气通络注射剂(来源同Ⅰ组。规格：10mL/安瓿)，该注射剂每mL含生药0.45g，用无菌生理盐水稀释成9%溶液，即每mL溶液含生药0.09g，按大鼠每100g体重1mL腹腔注射，每日1次(相当于生药 0.9 g.kg-1.d-1)；Ⅲ组给予维生素B1加B6片剂(广州市桥制药厂出品，规格10mg/片)，研成粉末后用生理盐水制成0.15%混悬液灌胃，每mL含VitB1和VitB6各1.5 mg，按大鼠每100g体重1mL灌胃，每日1次(相当于成品药15mg.kg-1.d-1)[1]；Ⅳ组给予生理盐水按每100g体重1mL灌胃，每日1次。
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1.4 足印观测 参照沈宁江、朱家恺的方法[2]，自制成一长60cm,宽10cm，高15cm的两端开口的木槽，将70g白纸裁成与木槽等长等宽后铺于槽底。大鼠双后肢用颜料浸至双踝关节着色后，将大鼠放于槽的一端，使其自行向木槽另一端行走，每侧后肢各留下4～5个足印，选择印迹清晰的足印分别测量正常足(N)和伤侧足(E)的3个指标：(1)lPL(足印长度)：即从足尖到足跟的最大距离；(2)lTS(足趾宽度)：第1趾到第5趾的距离；(3)lIT(中间足趾宽度)：第2趾到第4趾的距离。结果精确到0.1 mm。将上述数据代入Bain公式，即可计算出坐骨神经功能指数。Bain公式如下：ISFI=109.5(lE，TS-lN,TS)/lN,TS-38.3(lE,PL-lN,PL)/lN,PL+13.3(lE，IT-lN，IT/lN，IT)-8.8
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坐骨神经功能指数以lSFI=0为正常，ISFI=-100为完全损伤。
2 结果
各组大鼠术后2周起每2周作1次足印测定，直到术后12周，各组大鼠ISFI的恢复过程与程度可以反映出坐骨神经恢复过程及程度[2]。ISFI测量结果显示：术后4周内各组大鼠均呈神经完全损伤表现，4周起开始恢复。经成组设计样本资料的t检验，其中Ⅰ组(补气通络胶囊组)和Ⅱ组(补气通络注射液组)恢复好于Ⅲ组(VitB1+B6组)(P<0.05)和Ⅳ组(空白组)(P<0.01)；Ⅲ组亦优于Ⅳ组(P<0.05)。Ⅳ组恢复最慢；而Ⅰ组和Ⅱ组间差异无显著性(P>0.05)。结果见表1。
表1 各组不同时段坐骨神经功能指数(ISFI)比较 (±s) 组 别
, 百拇医药
2周
4周
6周
8周
10周
12周
(Ⅰ)补气通络胶囊组
-95.65±1.42
-66.00±1.23*△
-60.70±2.14**△
-53.7±0.68**△
, 百拇医药 -49.80±0.88**△
-41.80±0.52**△
(Ⅱ)补气通络注射液组
-93.65±1.26
-65.40±1.06*△
-61.30±0.98**△
-53.00±1.47**△
-49.5±0.79**△
-40.83±0.56**△
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(Ⅲ)维生素B1加B6组
-96.18±1.77
-78.90±0.81
-74.00±2.14*
-67.40±2.14*
-61.2±0.58*
-53.93±0.31*
(Ⅳ)空白组
-96.03±0.96
-84.60±0.59
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-82.40±0.32
-69.24±0.43
-66.60±0.17
-60.88±0.44
*与Ⅳ组比较P<0.05，**P<0.01；△与Ⅲ组比较P<0.05
3 讨论
3.1 足印测定法对大鼠坐骨神经损伤的评价作用 周围神经损伤后，经过适当处理，神经会通过Wallerian变性、Schwann细胞增生等改变逐渐恢复。当然，不同类型的损伤，决定了其恢复程度不一样。Sunderland4级以上的损伤，即使进行了及时而准确的端端吻合，神经功能通常也不能完全恢复[3]。对于有手术指征者，应及时手术处理。目前的术后治疗，主要是促进神经恢复的速度，提高神经恢复的程度，以及防止或减少肌肉萎缩，保护关节功能等。对于神经恢复程度的评价，大致有组织学手段、神经电生理学方法、生理学方法等。沈宁江、朱家恺证明，坐骨神经功能指数(SFI)与上述指标之间呈正相关，认为SFI是观察和评价大鼠坐骨神经损伤恢复程度的可靠指标[2]。
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3.2 补气通络方的作用机制 补气通络方由黄芪、人参(新开河参)、当归、川芎、丹参等中药组成。本方有补气行血、通络散结、生肌长肉的功效。周围神经损伤断裂后，其所支配的肌肉、皮肤的运动、感觉功能即发生障碍，甚至完全丧失而表现为瘫痪麻痹，随后便可见不同程度肌萎缩，属中医的经络伤、痿症范畴。因伤后经络不通，经气不续，气虚血滞，肢体皮、肉得不到正常气血的温养，以致痿软、麻木不仁。脾主肌肉，肺主皮毛，治法当补脾、补肺。所以治则为补气生肌，活血通络。方中重用黄芪，以补气生肌，人参大补元气，二药均入脾肺二经，共用则可使气旺而促血行，为君药；当归活血而补血，为臣药；丹参、川芎互配，增加活血祛瘀之功，共为佐使药。诸药配伍共奏补气生肌，活血通络之功效，可促进损伤局部血液循环，改善神经营养，从而促进周围神经轴突再生，促进神经传导功能恢复，让瘫痪萎软的肌肉、麻木失觉的皮肤逐渐恢复正常的神经营养及支配。既往有学者的研究证明，本方中各味中药可能分别通过促进机体蛋白质的合成，增加机体对各种有害刺激的防御能力，提高神经元的活性及其受伤后的再生能力，减轻神经水肿、炎症、出血、变性和脱髓鞘，减少线粒体损伤，增加线粒体的数量，改善血液循环等作用来促进周围神经的再生的作用[4]。其中黄芪是比较公认的对周围神经损伤有肯定疗效的中药，可能与其富含微量元素硒、提高机体的免疫功能、增加血浆cAMP含量、延长二倍体细胞的生长周期，促进蛋白质合成，从而增强修复能力有关[5]。本实验结果也显示本方有助于大鼠坐骨神经损伤后的恢复。提示在临床上对周围神经损伤的患者用补气通络的中药治疗可能会有一定的疗效。
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基金项目：广东省中医药管理局资助项目(编号：97197)
作者简介：何振辉(1943-)，男，主任医师，硕士生导师；
参考文献：
[1] 邵水金，单宝枝，余安胜.电针对大鼠神经损伤后轴突转运的影响[J].针刺研究，1998，23(1)：66
[2] 沈宁江，朱家恺.坐骨神经功能指数在神经功能评价中的应用[J].中华显微外科杂志，1993，16(4)：284
[3] 陆裕朴，傅炳峨.周围神经损伤[M].见：涂通今主编.急症神经外科学.北京：人民军医出版社，1995.288-293
[4] 陈德松.五种药物对小鼠周围神经再生影响的实验研究[J].手外科杂志，1989，5：159
[5] 高飞，王明喜，李新沁.足印测定法评价补阳还五汤对周围神经再生的作用[J].中医正骨，1997，9(2)：20
收稿日期：2000-06-06, 百拇医药