达克宁在细胞克隆技术中的应用
作者：齐秀云 孙荣芳 孟滨
单位：齐秀云(150036 黑龙江省鹤岗市卫生防疫站)；孙荣芳 孟滨(黑龙江省卫生防疫站)
关键词：
中国煤炭工业医学杂志000478 能否有效地控制分泌特异性单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞的污染，是该项研究中常遇到的问题，由于细菌耐药性的产生，传统应用双抗处理的方法多难于奏效。在杂交瘤细胞融合培养过程中，有时会发生真菌污染的现象。为防止和清除真菌污染，除了严格控制操作，还可采用小鼠腹腔和使用抗真菌药物的方法。目前，国内抗真菌药物如制霉菌素对杂交瘤细胞的毒性较大，抑制真菌效果不理想。我们在实验研究过程中使用达克宁注射液(有效成份为咪康唑)挽救意外污染了真菌的杂交瘤细胞，取得了良好的效果。
1材料和方法
1.1真菌污染的杂交瘤细胞呼吸道合胞病毒(RSV)杂交瘤细胞14株，巨细胞病毒(CMV)杂交瘤细胞8株，柯萨奇B组病毒3型(CBV)杂交瘤细胞5株，污染真菌未鉴定。
1.2培养基RPMI-1640培养基(日本进口)常规配制，小牛血清含量为15%。
1.3抗真菌药①达克宁注射液，有效成份为咪康唑，每支20ml，浓度10mg/ml，批号为90L05。②399比利时杨森制药公司生产。
1.4达克宁对杂交瘤细胞毒性和抑制真菌试验将12株受真菌污染的RSV杂交瘤细胞接种于96孔板，加入含不同浓度的达克宁培养基每日观察达克宁对细胞的母性和对真菌抑制作用的情况。
1.5杂交细胞的挽救将上述所有受到污染的杂交瘤细胞株接种于玻璃方瓶(50ml)中，通过抑菌试验选择合适浓度的达克宁培养基对真菌污染杂交瘤进行挽救。杂交瘤细胞分泌的特异性单克隆抗体采用间接免疫荧光方法检测。(全文详见PDF)……
收稿日期：1999-10-20
修稿日期：2000-03-01, http://www.100md.com
单位：齐秀云(150036 黑龙江省鹤岗市卫生防疫站)；孙荣芳 孟滨(黑龙江省卫生防疫站)
关键词：
中国煤炭工业医学杂志000478 能否有效地控制分泌特异性单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞的污染，是该项研究中常遇到的问题，由于细菌耐药性的产生，传统应用双抗处理的方法多难于奏效。在杂交瘤细胞融合培养过程中，有时会发生真菌污染的现象。为防止和清除真菌污染，除了严格控制操作，还可采用小鼠腹腔和使用抗真菌药物的方法。目前，国内抗真菌药物如制霉菌素对杂交瘤细胞的毒性较大，抑制真菌效果不理想。我们在实验研究过程中使用达克宁注射液(有效成份为咪康唑)挽救意外污染了真菌的杂交瘤细胞，取得了良好的效果。
1材料和方法
1.1真菌污染的杂交瘤细胞呼吸道合胞病毒(RSV)杂交瘤细胞14株，巨细胞病毒(CMV)杂交瘤细胞8株，柯萨奇B组病毒3型(CBV)杂交瘤细胞5株，污染真菌未鉴定。
1.2培养基RPMI-1640培养基(日本进口)常规配制，小牛血清含量为15%。
1.3抗真菌药①达克宁注射液，有效成份为咪康唑，每支20ml，浓度10mg/ml，批号为90L05。②399比利时杨森制药公司生产。
1.4达克宁对杂交瘤细胞毒性和抑制真菌试验将12株受真菌污染的RSV杂交瘤细胞接种于96孔板，加入含不同浓度的达克宁培养基每日观察达克宁对细胞的母性和对真菌抑制作用的情况。
1.5杂交细胞的挽救将上述所有受到污染的杂交瘤细胞株接种于玻璃方瓶(50ml)中，通过抑菌试验选择合适浓度的达克宁培养基对真菌污染杂交瘤进行挽救。杂交瘤细胞分泌的特异性单克隆抗体采用间接免疫荧光方法检测。(全文详见PDF)……
收稿日期：1999-10-20
修稿日期：2000-03-01, http://www.100md.com