Bactec 9120血培养仪的临床应用评价
作者:史伟峰 陈菊茂 姜庆波 徐法英
单位:苏州医学院附属三院检验科,江苏常州,213003
关键词:全自动血培养仪;病原菌;检出时间
苏州医学院学报000615 摘要 用Bactec 9120血培养仪检测1280份血标本,阳性率达15.5%,阳性检出时间最快仅需5.5h。与传统手工方法相比较,不仅检测速度快,灵敏度高,而且阳性率显著提高,对临床的抗感染治疗具有积极作用。
中图法分类号 R446
传统的手工血培养方法操作繁琐、费时,阳性率较低,难以满足临床的诊断、治疗需要。Bactec9120全自动血培养仪由计算机控制,对培养瓶中CO2浓度连续监测,检测技术灵敏、可靠,同时采用胰酶大豆汤等营养丰富培养基,使得病原菌检出时间明显缩短,阳性率显著上升[1]。1996~1998年我们用Bactec 9120血培养仪检测了1280份血标本,对其检出率、检出时间进行了统计,并与以往手工方法对比分析。结果报告于下。
, 百拇医药
1 材料、方法与结果
1.1 材料
1.1.1 标本来源 1996~1998年从门诊、病房采集1280份血标本。
1.1.2 仪器 Bactec 9120血培养仪、Sceptor细菌鉴定仪,均为美国Becton-Dickinson(BD)公司生产。
1.1.3 试剂 Bactec 9120血培养仪共配置3种血培养瓶:标准培养瓶、树脂型培养瓶、儿童型培养瓶。另外根据需要还可选择溶血素型及真菌型培养瓶。Sceptor鉴定仪配置6种类型细菌鉴定药敏板。
1.2 方法 抽取血样5ml(儿童3ml)加入血培养瓶中,放入培养箱内。当血液中含有病原菌时,微生物代谢过程中产生的CO2与培养瓶底感受器结合,pH值降低,促使感受器上的荧光物质发出荧光,光电比色计根据增加的荧光值即可判断出微生物的生长,并以声光报警。此时取出阳性瓶接种血平板置需氧或厌氧培养,孵育24~48h后挑取菌落接种细菌鉴定药敏板,温育后读板发出报告。超过培养周期的阴性瓶取出盲种后,再发出报告。
, 百拇医药
1.3 结果 从1280份血标本中,分离出198株病原菌,阳性率为15.5%。革兰阳性菌96株(48.5%),其中表皮葡萄球菌37株(38.5%)、金黄色葡萄球菌27株(28.1%)。革兰阴性菌82株(41.1%),以伤寒沙门菌27株(32.9%)为最多。阳性最早检出时间为5.5h,革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌和厌氧菌平均检出时间分别为34.3、16.9、22.4和36.1h。假阳性20例,占标本总数的1.6%。见附表。
附表 198株分离菌菌种分布及检出时间(h) 菌种
株数
(%)
平均检出时间
革兰阳性菌
96(48.5)
, 百拇医药
表皮葡萄球菌
37
28.7
(10.3~40.5)
金黄色葡萄球菌
27
26.5
(11.7~37.1)
其它葡萄球菌
12
29.4
(13.2~36.4)
, 百拇医药 草绿色链球菌
6
35.6
(31.3~43.7)
肠球菌
4
36.2
(32.3~41.6)
棒状杆菌
8
47.5
(42.4~54.1)
产单核李斯特菌
, 百拇医药
2
35.9
(32.2~39.6)
革兰阴性菌
82(41.4)
伤寒沙门菌
27
14.7
(5.5~24.7)
其它沙门菌
9
16.1
(8.7~22.2)
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大 肠 杆 菌
15
13.8
(6.4~18.3)
阴沟肠杆菌
8
17.6
(13.2~25.6)
肺炎克雷伯菌
12
17.2
(12.1~24.2)
绿 脓 杆 菌
, 百拇医药
6
15.9
(7.2~19.7)
其它假单胞菌
5
23.4
(10.3~29.5)
真 菌
11(5.6)
白色念珠菌
5
22.4
(12.7~28.5)
, 百拇医药
热带念珠菌
2
23.3
(15.4~31.2)
酵 母 菌
4
21.5
(14.1~27.5)
厌 氧 菌
9(4.5)
脆弱类杆菌
4
29.3
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(23.6~37.5)
消化链球菌
3
42.6
(32.4~47.3)
其它厌氧菌
2
35.2
(28.9~41.4)
1993~1996年3年间用手工血培养法检测标本975例,分离出74株细菌,阳性率为7.6%。与Bactec 9120法相比较,两种方法差别具有显著意义(P<0.001)。另外手工法对革兰阳性菌、革兰阴性菌和真菌的平均检出时间为67.2、43.8和76.5h。2 讨论
, 百拇医药
随着抗生素的广泛应用及不合理使用,细菌的耐药性日益增强,多重耐药菌株也不断出现,给治疗及预后带来极大困难[2]。过去血培养一直用手工法检测,不仅培养周期长,且操作繁琐,易污染,难以满足临床的需要。Bactec 9120利用荧光增强原理检测细菌代谢产物CO2,检出时间大为缩短,最快仅需数小时,而且阳性率明显提高,达15.5%。通过涂片染色即可向临床发出初步报告,并及时转种血平板,挑取菌落接种细菌鉴定药敏板,使临床能够迅速根据药敏报告结果给予合理治疗。
以往从血培养中分离出的凝固酶阴性葡萄球菌、棒状杆菌等细菌常被认为是污染菌。实际上,当人体免疫力降低或应用化疗、放疗所致机体防御功能低下时即可发生感染,本文80%以上的凝固酶阴性葡萄球菌等细菌来自血液科、儿科或老年病人。
Bactec 9120培养基采用胰酶大豆汤,并添加了其它营养成分,使得营养要求高,难以检出的细菌检出率也明显增加。如草绿色链球菌、产单核李斯特菌等。对于已接受过抗生素治疗的患者,可采用树脂型培养基。树脂不仅可以吸附抗生素,还能扩大细菌生长面积。儿童型培养基使标本用量大大减低,仅需1~3ml。而厌氧培养则可使手工法难以培养的厌氧菌也能得到分离,再加上仪器的灵敏性,使得Bactec 9120系统的阳性率明显高于手工法。另外血培养结果有明显的血容量依赖性,血液每增加1ml,阳性率约可提高3.2%,因此取血量一般不能低于5~10 ml[3]。
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1280例血培养中,有20例假阳性(占1.6%),其中16例为白血病患者,可能是大量白细胞呼吸代谢产生的CO2蓄积引起的干扰。
参考文献
[1] 周贵民,张军民.血培养方法研究进展.中华医学检验杂志,1996,19∶331
[2] 王枢群,张邦燮,主编.医院感染学.重庆∶科学技术文献出版社重庆分社,1990∶300
[3] Mermel LA,Maki DG.Detection of bacteriemia in adults∶consequences of culturing an inadequate volume of blood.Ann Intern Med,1993,119∶270
(1999年3月5日收稿), 百拇医药
单位:苏州医学院附属三院检验科,江苏常州,213003
关键词:全自动血培养仪;病原菌;检出时间
苏州医学院学报000615 摘要 用Bactec 9120血培养仪检测1280份血标本,阳性率达15.5%,阳性检出时间最快仅需5.5h。与传统手工方法相比较,不仅检测速度快,灵敏度高,而且阳性率显著提高,对临床的抗感染治疗具有积极作用。
中图法分类号 R446
传统的手工血培养方法操作繁琐、费时,阳性率较低,难以满足临床的诊断、治疗需要。Bactec9120全自动血培养仪由计算机控制,对培养瓶中CO2浓度连续监测,检测技术灵敏、可靠,同时采用胰酶大豆汤等营养丰富培养基,使得病原菌检出时间明显缩短,阳性率显著上升[1]。1996~1998年我们用Bactec 9120血培养仪检测了1280份血标本,对其检出率、检出时间进行了统计,并与以往手工方法对比分析。结果报告于下。
, 百拇医药
1 材料、方法与结果
1.1 材料
1.1.1 标本来源 1996~1998年从门诊、病房采集1280份血标本。
1.1.2 仪器 Bactec 9120血培养仪、Sceptor细菌鉴定仪,均为美国Becton-Dickinson(BD)公司生产。
1.1.3 试剂 Bactec 9120血培养仪共配置3种血培养瓶:标准培养瓶、树脂型培养瓶、儿童型培养瓶。另外根据需要还可选择溶血素型及真菌型培养瓶。Sceptor鉴定仪配置6种类型细菌鉴定药敏板。
1.2 方法 抽取血样5ml(儿童3ml)加入血培养瓶中,放入培养箱内。当血液中含有病原菌时,微生物代谢过程中产生的CO2与培养瓶底感受器结合,pH值降低,促使感受器上的荧光物质发出荧光,光电比色计根据增加的荧光值即可判断出微生物的生长,并以声光报警。此时取出阳性瓶接种血平板置需氧或厌氧培养,孵育24~48h后挑取菌落接种细菌鉴定药敏板,温育后读板发出报告。超过培养周期的阴性瓶取出盲种后,再发出报告。
, 百拇医药
1.3 结果 从1280份血标本中,分离出198株病原菌,阳性率为15.5%。革兰阳性菌96株(48.5%),其中表皮葡萄球菌37株(38.5%)、金黄色葡萄球菌27株(28.1%)。革兰阴性菌82株(41.1%),以伤寒沙门菌27株(32.9%)为最多。阳性最早检出时间为5.5h,革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌和厌氧菌平均检出时间分别为34.3、16.9、22.4和36.1h。假阳性20例,占标本总数的1.6%。见附表。
附表 198株分离菌菌种分布及检出时间(h) 菌种
株数
(%)
平均检出时间
革兰阳性菌
96(48.5)
, 百拇医药
表皮葡萄球菌
37
28.7
(10.3~40.5)
金黄色葡萄球菌
27
26.5
(11.7~37.1)
其它葡萄球菌
12
29.4
(13.2~36.4)
, 百拇医药 草绿色链球菌
6
35.6
(31.3~43.7)
肠球菌
4
36.2
(32.3~41.6)
棒状杆菌
8
47.5
(42.4~54.1)
产单核李斯特菌
, 百拇医药
2
35.9
(32.2~39.6)
革兰阴性菌
82(41.4)
伤寒沙门菌
27
14.7
(5.5~24.7)
其它沙门菌
9
16.1
(8.7~22.2)
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大 肠 杆 菌
15
13.8
(6.4~18.3)
阴沟肠杆菌
8
17.6
(13.2~25.6)
肺炎克雷伯菌
12
17.2
(12.1~24.2)
绿 脓 杆 菌
, 百拇医药
6
15.9
(7.2~19.7)
其它假单胞菌
5
23.4
(10.3~29.5)
真 菌
11(5.6)
白色念珠菌
5
22.4
(12.7~28.5)
, 百拇医药
热带念珠菌
2
23.3
(15.4~31.2)
酵 母 菌
4
21.5
(14.1~27.5)
厌 氧 菌
9(4.5)
脆弱类杆菌
4
29.3
, http://www.100md.com
(23.6~37.5)
消化链球菌
3
42.6
(32.4~47.3)
其它厌氧菌
2
35.2
(28.9~41.4)
1993~1996年3年间用手工血培养法检测标本975例,分离出74株细菌,阳性率为7.6%。与Bactec 9120法相比较,两种方法差别具有显著意义(P<0.001)。另外手工法对革兰阳性菌、革兰阴性菌和真菌的平均检出时间为67.2、43.8和76.5h。2 讨论
, 百拇医药
随着抗生素的广泛应用及不合理使用,细菌的耐药性日益增强,多重耐药菌株也不断出现,给治疗及预后带来极大困难[2]。过去血培养一直用手工法检测,不仅培养周期长,且操作繁琐,易污染,难以满足临床的需要。Bactec 9120利用荧光增强原理检测细菌代谢产物CO2,检出时间大为缩短,最快仅需数小时,而且阳性率明显提高,达15.5%。通过涂片染色即可向临床发出初步报告,并及时转种血平板,挑取菌落接种细菌鉴定药敏板,使临床能够迅速根据药敏报告结果给予合理治疗。
以往从血培养中分离出的凝固酶阴性葡萄球菌、棒状杆菌等细菌常被认为是污染菌。实际上,当人体免疫力降低或应用化疗、放疗所致机体防御功能低下时即可发生感染,本文80%以上的凝固酶阴性葡萄球菌等细菌来自血液科、儿科或老年病人。
Bactec 9120培养基采用胰酶大豆汤,并添加了其它营养成分,使得营养要求高,难以检出的细菌检出率也明显增加。如草绿色链球菌、产单核李斯特菌等。对于已接受过抗生素治疗的患者,可采用树脂型培养基。树脂不仅可以吸附抗生素,还能扩大细菌生长面积。儿童型培养基使标本用量大大减低,仅需1~3ml。而厌氧培养则可使手工法难以培养的厌氧菌也能得到分离,再加上仪器的灵敏性,使得Bactec 9120系统的阳性率明显高于手工法。另外血培养结果有明显的血容量依赖性,血液每增加1ml,阳性率约可提高3.2%,因此取血量一般不能低于5~10 ml[3]。
, http://www.100md.com
1280例血培养中,有20例假阳性(占1.6%),其中16例为白血病患者,可能是大量白细胞呼吸代谢产生的CO2蓄积引起的干扰。
参考文献
[1] 周贵民,张军民.血培养方法研究进展.中华医学检验杂志,1996,19∶331
[2] 王枢群,张邦燮,主编.医院感染学.重庆∶科学技术文献出版社重庆分社,1990∶300
[3] Mermel LA,Maki DG.Detection of bacteriemia in adults∶consequences of culturing an inadequate volume of blood.Ann Intern Med,1993,119∶270
(1999年3月5日收稿), 百拇医药