呼和浩特等三地区性病患者解脲脲原体、人型支原体及生殖支原体的检测
王晓彦 王涛 周向昭 贺伟 王泽民
关键词：呼和浩特 性病 解脲脲原体 人型支原体 生殖支原体 Uu、Mh是引起人类泌尿生殖道感染的常见病原体，而Mg在泌尿生殖道的感染则是近年来仍在探讨的问题。我们建立了3种支原体的聚合酶链式反应(PCR)检测方法，对不同地区性病患者的泌尿生殖道标本进行了检测，报道如下。
1 材料和方法
1.1 标本来源 采集1997年3～10月内蒙古医学院一附院皮肤科STD门诊患者，张家口医学院一附院皮肤科STD门诊患者，北京医科大学第一医院皮肤科门诊患者经临床及实验室确诊的现患性病病人150例，其中男性108例，女性42例，年龄在15～63岁，患者中淋病120例(病程3天～6个月，平均20天)，尖锐湿疣30例(病程20天～15个月，平均90天)。
1.2 方法
, http://www.100md.com
1.2.1 标本采集 用棉拭子采集尿道(男性)或宫颈(女性)分泌物标本置于1.5ml Ependorf管中，在-20℃保存备用。呼和浩特、张家口标本用冰壶运送到北京医科大学第一医院皮肤科性病实验室在-20℃保存备用。
1.2.2 标准菌株 Uu14个血清型标准株，Mh(PG21)及Mg(G37)均来自首都儿科研究所。
1.2.3 DNA模板制备 按北京医科大学第一医院皮肤性病实验室常规进行[1]。
1.2.4 PCR 参照文献[2～4]设计合成3对引物，分别用于检测3种支原体的MB抗原基因、16S rRNA基因及粘附蛋白基因，预期扩增片段长度分别为403bp、448bp、170bp及281bp，复性温度分别为60℃、52℃、60℃。
采用25μl反应体系，共进行40个循环，取10μl扩增产物在2.0%琼脂糖凝胶中进行电泳，在透过式紫外灯上观察结果。
, http://www.100md.com
2 结果
3对引物均在各自的阳性对照模板中扩增出特异性扩增条带，而在其它阴性对照模板中无特异扩增条带，图1～2。
内蒙古、张家口市、北京市3所医院STD门诊患者泌尿生殖道3种支原体的检出情况见表1。各种性病患者3种支原体的检测情况见表2。
图1 Uu14个血清型MBA基因5’端PCR扩增结果。
M：分子量标记，1：Uu14血清型ATCC标准株，2～14：Uu阳性标本
图2 Mh和Mg PCR检测结果。
M、m：分子量标记N、n：阴性对照 P’：Mh PG21 P：Mg G37 1～5：Mh阳性标本 a-e：Mg阳性标本
, http://www.100md.com
表1 三个地区STD门诊患者泌尿生殖道标本3种支原体检出情况
地区
总例数
Uu
Mh
Mg
阳性数
阳性率(%)
阳性数
阳性率(%)
阳性数
阳性率(%)
, http://www.100md.com 呼和浩特
50
16
32
8
16
4
8
张家口
50
14
28
8
16
, 百拇医药
2
4
北京
50
11
22
6
12
3
6
表2 STD患者3种支原体检测结果
地区
总例数
, http://www.100md.com
Uu
Mh
Mg
阳性数
阳性率(%)
阳性数
阳性率(%)
阳性数
阳性率(%)
淋病
120
35
29.2
, http://www.100md.com
15
12.5
9
7.5
尖锐湿疣
30
6
20
7
23.3
2
6.7
3 讨论
, 百拇医药 近年来，STD的发病率呈明显上升趋势，已成为我国的第三大传染病。国内学者对支原体感染在STD中的重要性日渐重视。
国内学者孔繁荣等[5]采用PCR法检测了北京市、武汉市、汕头市3所医院STD门诊患者泌尿生殖道中的3种支原体，结果发现3个城市的性病高危人群中均存在这3种支原体的流行，从西北至东部逐渐减少。
从本文中可以看出，Uu阳性率以呼和浩特最高(32%)，北京较低(22%)，张家口居中(28%)，Mh阳性率以呼和浩特及张家口最高(16%)，北京稍低(12%)，Mg三个地区差别不大。Uu(32%)和Mh(16%)的检出率明显高于Mg(8%)，并且可以看到淋病支原体检出率(Uu 29.2%，Mh 12.5%，Mg 7.6%)和尖锐湿疣(Uu 20%，Mh 23.3%，Mg 6.7%)患者均有不同程度的伴发这3种支原体的感染，并以Uu、Mh感染的情况居多，因此在临床上在治疗性病的同时需注意治疗支原体的感染。
, 百拇医药
王晓彦(内蒙古医学院附属医院 呼和浩特，010050)
王涛(内蒙古医学院附属医院 呼和浩特，010050)
周向昭(张家口医学院第一附属医院)
贺伟(内蒙古医学院附属医院 呼和浩特，010050)
王泽民(内蒙古医学院附属医院 呼和浩特，010050)
参考文献
1，孔繁荣，朱学骏，陈洪，等.尖锐湿疣人乳头瘤病毒的检测—聚合酶链反应与组织病理的比较研究〔J〕.中华皮肤科杂志,1993，26(6)∶340.
2，Blanchard A,Hentschel J,Duffyl,et al. Detection of ureaplasma urealyticum by polymerase chain reaction in the urogenital tract of adults,in amniotic fluid and in the respiratory tract of newborns〔J〕. Clin Infect Dis,1993,17(suppl(1)∶s148.
, 百拇医药
3，Grau O,Kovacic R,launay V, et al. Development of PCR-based assays for the detection of human mollicute species using primers determined from ribosomal RNA genes:a general approach. Abstracts for 10th international congress of the international organization for mycoplasmology〔J〕.Bordeaux,France.1994,330.
4，Fensen JS,Uldum SA,Anelerson JS,et al.Polymerase chain reaction for detection of mycoplasma genitalicum in clinical samples〔J〕.J Clin Microbiol,1991,29(1)∶46.
5，孔繁荣，朱学骏，张秀英，等.泌尿生殖道解脲脲原体、人型支原体及生殖支原体的检测〔J〕.中华医学杂志,1997，77(2)∶94., http://www.100md.com
关键词：呼和浩特 性病 解脲脲原体 人型支原体 生殖支原体 Uu、Mh是引起人类泌尿生殖道感染的常见病原体，而Mg在泌尿生殖道的感染则是近年来仍在探讨的问题。我们建立了3种支原体的聚合酶链式反应(PCR)检测方法，对不同地区性病患者的泌尿生殖道标本进行了检测，报道如下。
1 材料和方法
1.1 标本来源 采集1997年3～10月内蒙古医学院一附院皮肤科STD门诊患者，张家口医学院一附院皮肤科STD门诊患者，北京医科大学第一医院皮肤科门诊患者经临床及实验室确诊的现患性病病人150例，其中男性108例，女性42例，年龄在15～63岁，患者中淋病120例(病程3天～6个月，平均20天)，尖锐湿疣30例(病程20天～15个月，平均90天)。
1.2 方法
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1.2.1 标本采集 用棉拭子采集尿道(男性)或宫颈(女性)分泌物标本置于1.5ml Ependorf管中，在-20℃保存备用。呼和浩特、张家口标本用冰壶运送到北京医科大学第一医院皮肤科性病实验室在-20℃保存备用。
1.2.2 标准菌株 Uu14个血清型标准株，Mh(PG21)及Mg(G37)均来自首都儿科研究所。
1.2.3 DNA模板制备 按北京医科大学第一医院皮肤性病实验室常规进行[1]。
1.2.4 PCR 参照文献[2～4]设计合成3对引物，分别用于检测3种支原体的MB抗原基因、16S rRNA基因及粘附蛋白基因，预期扩增片段长度分别为403bp、448bp、170bp及281bp，复性温度分别为60℃、52℃、60℃。
采用25μl反应体系，共进行40个循环，取10μl扩增产物在2.0%琼脂糖凝胶中进行电泳，在透过式紫外灯上观察结果。
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2 结果
3对引物均在各自的阳性对照模板中扩增出特异性扩增条带，而在其它阴性对照模板中无特异扩增条带，图1～2。
内蒙古、张家口市、北京市3所医院STD门诊患者泌尿生殖道3种支原体的检出情况见表1。各种性病患者3种支原体的检测情况见表2。
图1 Uu14个血清型MBA基因5’端PCR扩增结果。
M：分子量标记，1：Uu14血清型ATCC标准株，2～14：Uu阳性标本
图2 Mh和Mg PCR检测结果。
M、m：分子量标记N、n：阴性对照 P’：Mh PG21 P：Mg G37 1～5：Mh阳性标本 a-e：Mg阳性标本
, http://www.100md.com
表1 三个地区STD门诊患者泌尿生殖道标本3种支原体检出情况
地区
总例数
Uu
Mh
Mg
阳性数
阳性率(%)
阳性数
阳性率(%)
阳性数
阳性率(%)
, http://www.100md.com 呼和浩特
50
16
32
8
16
4
8
张家口
50
14
28
8
16
, 百拇医药
2
4
北京
50
11
22
6
12
3
6
表2 STD患者3种支原体检测结果
地区
总例数
, http://www.100md.com
Uu
Mh
Mg
阳性数
阳性率(%)
阳性数
阳性率(%)
阳性数
阳性率(%)
淋病
120
35
29.2
, http://www.100md.com
15
12.5
9
7.5
尖锐湿疣
30
6
20
7
23.3
2
6.7
3 讨论
, 百拇医药 近年来，STD的发病率呈明显上升趋势，已成为我国的第三大传染病。国内学者对支原体感染在STD中的重要性日渐重视。
国内学者孔繁荣等[5]采用PCR法检测了北京市、武汉市、汕头市3所医院STD门诊患者泌尿生殖道中的3种支原体，结果发现3个城市的性病高危人群中均存在这3种支原体的流行，从西北至东部逐渐减少。
从本文中可以看出，Uu阳性率以呼和浩特最高(32%)，北京较低(22%)，张家口居中(28%)，Mh阳性率以呼和浩特及张家口最高(16%)，北京稍低(12%)，Mg三个地区差别不大。Uu(32%)和Mh(16%)的检出率明显高于Mg(8%)，并且可以看到淋病支原体检出率(Uu 29.2%，Mh 12.5%，Mg 7.6%)和尖锐湿疣(Uu 20%，Mh 23.3%，Mg 6.7%)患者均有不同程度的伴发这3种支原体的感染，并以Uu、Mh感染的情况居多，因此在临床上在治疗性病的同时需注意治疗支原体的感染。
, 百拇医药
王晓彦(内蒙古医学院附属医院 呼和浩特，010050)
王涛(内蒙古医学院附属医院 呼和浩特，010050)
周向昭(张家口医学院第一附属医院)
贺伟(内蒙古医学院附属医院 呼和浩特，010050)
王泽民(内蒙古医学院附属医院 呼和浩特，010050)
参考文献
1，孔繁荣，朱学骏，陈洪，等.尖锐湿疣人乳头瘤病毒的检测—聚合酶链反应与组织病理的比较研究〔J〕.中华皮肤科杂志,1993，26(6)∶340.
2，Blanchard A,Hentschel J,Duffyl,et al. Detection of ureaplasma urealyticum by polymerase chain reaction in the urogenital tract of adults,in amniotic fluid and in the respiratory tract of newborns〔J〕. Clin Infect Dis,1993,17(suppl(1)∶s148.
, 百拇医药
3，Grau O,Kovacic R,launay V, et al. Development of PCR-based assays for the detection of human mollicute species using primers determined from ribosomal RNA genes:a general approach. Abstracts for 10th international congress of the international organization for mycoplasmology〔J〕.Bordeaux,France.1994,330.
4，Fensen JS,Uldum SA,Anelerson JS,et al.Polymerase chain reaction for detection of mycoplasma genitalicum in clinical samples〔J〕.J Clin Microbiol,1991,29(1)∶46.
5，孔繁荣，朱学骏，张秀英，等.泌尿生殖道解脲脲原体、人型支原体及生殖支原体的检测〔J〕.中华医学杂志,1997，77(2)∶94., http://www.100md.com