73例儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型特点
作者：陶慧 徐杰 何海龙
单位：苏州医学院附属儿童医院，苏州，215003
关键词：急性淋巴细胞白血病；单克隆抗体；免疫分型；流式细胞；仪(FCM)
苏州医学院学报000943 摘要 应用单抗及流式细胞仪间接荧光法检测73例初治儿童急性淋巴细胞 白血病(ALL)的免疫分型。其中T淋巴细胞型(T-ALL)26例(35.6%)，B淋巴细胞型(B-ALL)43 例(58.9%)，T/B混合型(T/B-ALL)4例(5.5%)。髓系抗原My+及CD+34表达率分别 为21.9%及65.75%。My+ALL中CD+34表达率为87.5%，显著高于My-ALL(59.65%)( P<0.01)；B细胞型ALLCD+34高表达(65.32%)，与T细胞型ALL(42.31%)有显著 差异(P<0.005)，T/B混合型 ALL CD+34高表达，与T-ALL比较，差异显著( P<0.05)，外周血幼稚细胞平均数B系显著高于T系(P<0.05)。
, 百拇医药
中图法分类号 R733.7
急性淋巴细胞白血病的免疫分型对其诊断、治疗及预后判断有重要意义。流式细胞仪因其灵 敏度高、快速、定量的特点而能精确检测白血病的免疫分型。本文总结了本院73例ALL患儿 免疫分型，结果报道如下。
1 临床资料
1.1 病例 73例均为本院患儿，男40例，女33例(男∶女=1.21∶1),其中1 例为M5b急淋变，72例为ALL初治患儿。年龄1岁4个月～13岁6个月。
1.2 方法 肝素抗凝骨髓，被检标本中原始+幼稚细胞≥70%。采用活细胞 间接免疫荧光标记，FCM(Epics XL型Coulter USA)检测分型，所用单抗包括T淋巴细胞系：C D2、CD3、CD5、CD7；B淋巴细胞系：CD10、CD19、CD20、CD 22；髓系：CD13、CD14、CD33；巨核系：CD42b、CD61 及干/祖系单抗CD34。荧光阳性细胞率>20%，CD34>10%为阳性指标。
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1.3 结果 见附表。
1.3.1 不同免疫亚型ALL的性别、My+、CD+34及外周血幼稚细胞百分数 分布 见附表。
附表 不同免疫亚型ALL的性别、My+、CD+34及外周 血幼稚细胞百分数分布〔例(%)〕
n
男∶女
My+
CD+34
外周血幼稚细胞百分数
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T-ALL
26
15∶11
5(19.2)Δ
11(42.3)
42.00%±30.6 2% (n=13)
B-ALL
43
22∶21
13(30.2)Δ
34(79.1)*
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66.53%±24.84% (n=19)*
T/B-ALL
4
3∶1
1(25.0)Δ
3(75.0)*
79.00%(n=1)
*与T-ALL组比，P<0.05；Δ与其它两组比，P>0.05
1.3.2 主要免疫标志在ALL中的表达 T-ALL中，CD7表达最高，为100% ，其次为CD3 88.46%(23/26)，及CD2 80.77%(21/26)，最低值为CD5 38.5%(1/26)；B -ALL中，以CD19表达最高100%，其次为CD10 95.35%(41/43)、CD22 66 .77%(30/43)，最低为CD20 13.95%(6/43)。B-ALL中有18.6%表达了CD2(8/43)，9. 30%表达了CD7(4/43)；T-ALL中，15.38%表达CD10(4/26)，7.69%表达CD19( 2/26)，3.84%表达CD20(1/26)。My+ALL中，CD+34表达最高，为68.42%(13 /39)。
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2 讨论
本组73例儿童急性淋巴细胞白血病各免疫亚型中，B-ALL最为多见，其次为T-ALL。与文献 〔1〕报道相似。
本组男40例，女33例，男∶女=1.21∶1，各型均男多于女。T系中，男性所占比例较高，符 合文献[1，2]报道，但与文献[1]男∶女=8～9∶1不相符。关于My+ALL 比例，一般报道为3.5%～20.0%[3]，本文结果与此基本相符。My+ALL在各免 疫 亚型中无明显区别。文献[4]认为，ALL伴髓系抗原(My+)表达对患者预后意义较小 。B-ALL CD+34表达明显高于T系，T/B及T系无显著差异。My+ALL其CD34 表达明显高于My-ALL，与Thomas[4]的研究结果一致，提示B-ALL及My+ALL，可能起源于早期的造血细胞恶性克隆。有文献[2]报道，T细胞抗原CD +34也与预后相关，在前前B及前B中高表达，此类患者常伴超二倍体>50，CNS白血病 发生率较低，早期复发者较少，无病生存率高，预后较好，值得临床医生注意。
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关于T-ALL及B-ALL外周血幼稚细胞数的关系，文献[2]报道T-ALL高于B-ALL， 本文结果与此不相符，考虑与检测病例数少有关。
ALL各主要免疫标志的表达，T-ALL中，CD7表达100%，B-ALL中只见9.39%。虽近几年研究 发现，CD7与10%左右AML有交叉反应，仍说明CD7是识别T-ALL的敏感指标；CD+3在T -ALL中表达为88.46%，B-ALL未见表达，提示CD3是一个敏感性及特异性较高的指标。CD 5在T-ALL中表达很低，但B-ALL未见表达，提示为一个特异性高、敏感性低的指标。CD3、 CD5、CD7协同使用是诊断T-ALL敏感指标，而CD2则是敏感性较高、特异性较差的标志 。B-ALL中，CD19表达为100%，陈璋[1]结果为39%，Nadler等则认为，95%以 上的T-ALL表达CD+19，本文结果符合后者。考虑CD19在细胞膜表面表达弱， 且有时不稳定，而 我们采用流式细胞仪，其灵敏度高，更能精确检测免疫亚型的表达。CD19在T-ALL有7 .69%表达，而CD22在B-ALL中表达为69.77%，T-ALL中未见表达。CD20在B-ALL 中为13.95%，T-ALL中为3.84%；CD10在B-ALL中为95.35%，T-ALL中为15.38%，说明B- ALL各指标中，CD19敏感性最高，依次为CD10、CD22、CD20，而 特异性最高为CD22，其余依次CD20、CD19、CD10，CD22用 于检测B-ALL是相当特异的。文献[4]结果T-ALL及AML中未见CD22表达，B系 来源的ALL有98.7%表达CD22，而我们的结果低于此值，与此不相符，有待探讨。 参考文献
1，陈 璋.200例急性淋巴细胞白血病免疫表型特点.中华血液学杂志，1991，1 2(7)∶358
2，陶元黎.急性白血病免疫学表型的预后意义.医学输学及血液学分册，1997，20(2 )∶102
3，肖志坚，赫玉书.免疫表型分析与急性白血病诊断.中华血液学杂志，1997，18(1 )∶53
4，艾辉胜主编.现代白血病学.北京∶人民军医出版社，1997∶164，152
1999年11月1日收稿, http://www.100md.com
单位：苏州医学院附属儿童医院，苏州，215003
关键词：急性淋巴细胞白血病；单克隆抗体；免疫分型；流式细胞；仪(FCM)
苏州医学院学报000943 摘要 应用单抗及流式细胞仪间接荧光法检测73例初治儿童急性淋巴细胞 白血病(ALL)的免疫分型。其中T淋巴细胞型(T-ALL)26例(35.6%)，B淋巴细胞型(B-ALL)43 例(58.9%)，T/B混合型(T/B-ALL)4例(5.5%)。髓系抗原My+及CD+34表达率分别 为21.9%及65.75%。My+ALL中CD+34表达率为87.5%，显著高于My-ALL(59.65%)( P<0.01)；B细胞型ALLCD+34高表达(65.32%)，与T细胞型ALL(42.31%)有显著 差异(P<0.005)，T/B混合型 ALL CD+34高表达，与T-ALL比较，差异显著( P<0.05)，外周血幼稚细胞平均数B系显著高于T系(P<0.05)。
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中图法分类号 R733.7
急性淋巴细胞白血病的免疫分型对其诊断、治疗及预后判断有重要意义。流式细胞仪因其灵 敏度高、快速、定量的特点而能精确检测白血病的免疫分型。本文总结了本院73例ALL患儿 免疫分型，结果报道如下。
1 临床资料
1.1 病例 73例均为本院患儿，男40例，女33例(男∶女=1.21∶1),其中1 例为M5b急淋变，72例为ALL初治患儿。年龄1岁4个月～13岁6个月。
1.2 方法 肝素抗凝骨髓，被检标本中原始+幼稚细胞≥70%。采用活细胞 间接免疫荧光标记，FCM(Epics XL型Coulter USA)检测分型，所用单抗包括T淋巴细胞系：C D2、CD3、CD5、CD7；B淋巴细胞系：CD10、CD19、CD20、CD 22；髓系：CD13、CD14、CD33；巨核系：CD42b、CD61 及干/祖系单抗CD34。荧光阳性细胞率>20%，CD34>10%为阳性指标。
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1.3 结果 见附表。
1.3.1 不同免疫亚型ALL的性别、My+、CD+34及外周血幼稚细胞百分数 分布 见附表。
附表 不同免疫亚型ALL的性别、My+、CD+34及外周 血幼稚细胞百分数分布〔例(%)〕
n
男∶女
My+
CD+34
外周血幼稚细胞百分数
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T-ALL
26
15∶11
5(19.2)Δ
11(42.3)
42.00%±30.6 2% (n=13)
B-ALL
43
22∶21
13(30.2)Δ
34(79.1)*
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66.53%±24.84% (n=19)*
T/B-ALL
4
3∶1
1(25.0)Δ
3(75.0)*
79.00%(n=1)
*与T-ALL组比，P<0.05；Δ与其它两组比，P>0.05
1.3.2 主要免疫标志在ALL中的表达 T-ALL中，CD7表达最高，为100% ，其次为CD3 88.46%(23/26)，及CD2 80.77%(21/26)，最低值为CD5 38.5%(1/26)；B -ALL中，以CD19表达最高100%，其次为CD10 95.35%(41/43)、CD22 66 .77%(30/43)，最低为CD20 13.95%(6/43)。B-ALL中有18.6%表达了CD2(8/43)，9. 30%表达了CD7(4/43)；T-ALL中，15.38%表达CD10(4/26)，7.69%表达CD19( 2/26)，3.84%表达CD20(1/26)。My+ALL中，CD+34表达最高，为68.42%(13 /39)。
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2 讨论
本组73例儿童急性淋巴细胞白血病各免疫亚型中，B-ALL最为多见，其次为T-ALL。与文献 〔1〕报道相似。
本组男40例，女33例，男∶女=1.21∶1，各型均男多于女。T系中，男性所占比例较高，符 合文献[1，2]报道，但与文献[1]男∶女=8～9∶1不相符。关于My+ALL 比例，一般报道为3.5%～20.0%[3]，本文结果与此基本相符。My+ALL在各免 疫 亚型中无明显区别。文献[4]认为，ALL伴髓系抗原(My+)表达对患者预后意义较小 。B-ALL CD+34表达明显高于T系，T/B及T系无显著差异。My+ALL其CD34 表达明显高于My-ALL，与Thomas[4]的研究结果一致，提示B-ALL及My+ALL，可能起源于早期的造血细胞恶性克隆。有文献[2]报道，T细胞抗原CD +34也与预后相关，在前前B及前B中高表达，此类患者常伴超二倍体>50，CNS白血病 发生率较低，早期复发者较少，无病生存率高，预后较好，值得临床医生注意。
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关于T-ALL及B-ALL外周血幼稚细胞数的关系，文献[2]报道T-ALL高于B-ALL， 本文结果与此不相符，考虑与检测病例数少有关。
ALL各主要免疫标志的表达，T-ALL中，CD7表达100%，B-ALL中只见9.39%。虽近几年研究 发现，CD7与10%左右AML有交叉反应，仍说明CD7是识别T-ALL的敏感指标；CD+3在T -ALL中表达为88.46%，B-ALL未见表达，提示CD3是一个敏感性及特异性较高的指标。CD 5在T-ALL中表达很低，但B-ALL未见表达，提示为一个特异性高、敏感性低的指标。CD3、 CD5、CD7协同使用是诊断T-ALL敏感指标，而CD2则是敏感性较高、特异性较差的标志 。B-ALL中，CD19表达为100%，陈璋[1]结果为39%，Nadler等则认为，95%以 上的T-ALL表达CD+19，本文结果符合后者。考虑CD19在细胞膜表面表达弱， 且有时不稳定，而 我们采用流式细胞仪，其灵敏度高，更能精确检测免疫亚型的表达。CD19在T-ALL有7 .69%表达，而CD22在B-ALL中表达为69.77%，T-ALL中未见表达。CD20在B-ALL 中为13.95%，T-ALL中为3.84%；CD10在B-ALL中为95.35%，T-ALL中为15.38%，说明B- ALL各指标中，CD19敏感性最高，依次为CD10、CD22、CD20，而 特异性最高为CD22，其余依次CD20、CD19、CD10，CD22用 于检测B-ALL是相当特异的。文献[4]结果T-ALL及AML中未见CD22表达，B系 来源的ALL有98.7%表达CD22，而我们的结果低于此值，与此不相符，有待探讨。 参考文献
1，陈 璋.200例急性淋巴细胞白血病免疫表型特点.中华血液学杂志，1991，1 2(7)∶358
2，陶元黎.急性白血病免疫学表型的预后意义.医学输学及血液学分册，1997，20(2 )∶102
3，肖志坚，赫玉书.免疫表型分析与急性白血病诊断.中华血液学杂志，1997，18(1 )∶53
4，艾辉胜主编.现代白血病学.北京∶人民军医出版社，1997∶164，152
1999年11月1日收稿, http://www.100md.com