妊娠期糖尿病胎盘微绒毛体视学初探
作者：徐丽珍 符玉亭
单位：510120 广州医学院第一附属医院妇产科
关键词：糖尿病，妊娠；胎盘；绒毛膜绒毛；显微镜检查，电子，扫描透射；体视学
实用医学杂志001014 摘 要 目的：探讨妊娠期糖尿病患者胎盘微绒毛的定量变化过程，进而解释其形态学改变的特征及围产儿患病率较高的原因。方法：取足月妊娠期糖尿病孕妇及正常孕妇胎盘各8例，常规制成超薄切片，电镜下观察合体细胞微绒毛，并进行体视学的测量。结果：妊娠期糖尿病组的胎盘合体细胞微绒毛疏密不均，排列紊乱。体视学测定发现妊娠期糖尿病微绒毛体积密度(Vv)、表面积密度(Sv)、数密度(Nv)小于对照组，差异均有显著性意义(P<0.05)。结论：妊娠期糖尿病胎盘功能及代偿能力较低，其改变与缺氧时胎盘变化相一致，反映了妊娠期糖尿病时有可能存在缺氧，妊娠晚期应适当增加对孕妇供氧及严密的监护，防止胎盘功能失代偿，造成胎儿宫内缺氧。
, 百拇医药
妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)是指妊娠期首次发现或发生的糖代谢异常。GDM发病率约占孕妇的1%～2%[1]，在妊娠期未能得到及时诊断或未经合理治疗，可严重危害母婴健康[2]。胎盘微绒毛是胎盘进行物质交换的场所，其含量和功能与胎儿生长密切相关。本研究通过对GDM胎盘微绒毛的电镜水平的形态学观察和体视学测定，探讨GDM胎盘组织结构的定量变化过程。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择本院1998年4月～1999年2月间住院分娩的GDM患者及正常孕妇各8例，分别作为GDM组和对照组。两组均要求无严重内科及孕期合并症。对照组要求孕期检查除外GDM，无胎儿畸形或死胎发生，近1周未用影响糖代谢的药物。GDM组产前检查诊断为GDM。GDM诊断标准：对所有孕妇于孕24～28周进行血糖初筛试验，阳性者行口服糖耐量(OGTT)试验，本院选用NDDG标准，即空腹口服100 g葡萄糖，若空腹血糖<5.8 mmol/L，服糖后1 h血糖≥10.6 mmol/L，2 h血糖≥9.2 mmol/L，3 h血糖≥8.1 mmol/L，三项中有两项或以上达到标准则诊断为GDM。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 标本处理 胎盘娩出后，立即在胎盘母体面底板区的中间带和中央带不同部位随机取5块组织，大小3 mm×3 mm×3 mm，固定、脱水、渗透、包埋后，用LKB Nova型超薄切片机切片，染色后用JEM-100CX Ⅱ型透射电镜进行观察。每张切片拍摄照片2张，要求随机拍摄，合体细胞游离面与平行线成30～35°角。
1.2.2 测量方法 使用自制的测试网，大小为80 mm×120 mm，点间距(每小格长度)为5 mm，测试网共有352个测试点，测试线总长为1 760 mm。测试时，将测试网覆盖在电镜照片上，测试内容以绒毛为参照系。按计算公式[3]计算测试微绒毛的密度参数：体积密度(Vv)、表面积密度(Sv)、数密度(Nv)。
1.2.3 统计方法 用t检验比较各项检测指标组间差异的显著性，P<0.05为差异有显著意义。
, 百拇医药
2 结果
2.1 一般情况比较 见表1。
表1 两组孕妇一般情况比较(±s) 组别
例数
年龄(岁)
孕周(周)
婴儿出生体重(g)
GDM组
8
30.1±6.1
39.3±6.6
3 577±142
, 百拇医药
对照组
8
27.8±5.5
39.5±7.3
3 278±153
注：两组比较均P>0.05
2.2 透射电镜下胎盘微绒毛形态学改变 正常足月妊娠胎盘绒毛合体细胞位于胎盘绒毛的表层，其表面的微绒毛形态规则，分布均匀，排列整齐，微绒毛长约1～1.85 μ m，直径相对一致，末端略有膨大(图1)。GDM组与对照组相比，合体细胞变异较大，微绒毛疏密不均，排列紊乱，局部见微绒毛增生，部分微绒毛稀疏，甚至缺失，变短、变细，扭曲变形，可见分支状微绒毛，部分微绒毛顶端膨大成球拍状，部分微绒毛表面可见絮状物附着(图2)。合体细胞游离面质膜常内陷，形成有质膜包裹的内含微绒毛的泡状结构。
, http://www.100md.com
2.3 两组胎盘绒毛微绒毛体视学参数变化 见表2。GDM组与对照组相比，Vv，Sv，Nv均小于对照组，差异有显著意义。
图1 正常足月妊娠盘合体细胞微绒毛(MV)形态规则，排列整齐×2000
图2 妊娠期糖尿病胎盘合体细胞微绒毛(MV)排列紊乱，局部缺失，可见絮状物沉积(↑)×2000
3 讨论
3.1 关于胎盘体视学结果的影响因素 体视学是由二维结构信息定量推论三维结构信息的科学，在研究的过程中有很多因素都可能影响到结果。体视学的结论与样品数、取材方法和部位、固定方式和制片过程等因素有关。由于胎盘体积大，自胎盘的胎儿面至母体面的不同层次内，绒毛干一再分支，各层次内母血流量分布亦不完全一致，而测试部位又仅是其中极小一部分，故想从所得参数中推算整个胎盘的各项指标，必须考虑如何科学地取材和测试。对于胎盘的取材部位是否具有代表性尚有争议。国内刘伯宁[4]近年应用图像分析仪对足月妊娠胎盘不同平面的体视学研究结果显示，底板区与中间区绒毛总数、绒毛Vv、绒毛Sv无显著差异，而与绒毛板区相比有显著差异。因此，本研究严格在中央带、中间带的底板区取材。
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表2 两组胎盘绒毛合成区微绒毛体视学参数比较(±s) 组别
例数
Vv
Sv
Nv
对照组
8
0.1527±0.0169
2.4878±0.4254
15.2699±2.3687
GDM组
8
, 百拇医药
0.1287±0.0215
2.3986±0.3674
13.1291±2.7695
注：两组间参数比较均P<0.05
3.2 电镜下GDM胎盘绒毛的特点及其意义 微绒毛的存在，主要是扩大了细胞作用的表面积，有利于细胞进行物质交换。正常足月胎盘中约88%的绒毛合体滋养细胞表面均有发育良好的微绒毛覆盖。微绒毛的各种运输系统如微丝和特殊受体等超微结构，有利于小泡的形成，故微绒毛的出现，不仅增加了合体滋养细胞与母血接触的面积，且可促进微绒毛间腔的微胞饮作用。人类胎盘合体滋养细胞中营养物质的转运，包括微绒毛和胞饮作用的特殊运输系统，其功能与微绒毛及其所含微丝的密度和合体滋养细胞表面的微绒毛间腔密度直接相关。这些结构是胎盘功能的形态学基础。电镜下对绒毛的体视学研究，重点是微绒毛的测量。本组资料显示GDM组微绒毛的Vv，Sv，Nv均小于对照组，与国内报道相符[5～6]。由于GDM组绒毛Vv，Sv的下降，绒毛成熟不良，使物质交换的面积减少，会导致胎盘功能下降，甚至失代偿，其表现类似于妊娠合并糖尿病胎盘的微绒毛改变，也就是微绒毛数量的减少及形态的改变。GDM胎盘的改变与缺氧时胎盘变化相一致，反应了GDM时有可能缺氧，妊娠晚期应适当增加对孕妇供氧及严密的监护，防止胎盘功能失代偿，造成胎儿宫内缺氧。
, 百拇医药
参考文献
1，董砚虎，主编. 糖尿病及其并发症当代治疗. 济南：山东科学技术出版社，1994. 231～232.
2，Persson B,Hanson U. Neonatal morbidities in gestational diabetes mellitus. Diabetes Care.1998，21(suppl 2)：B79～84.
3，申洪，沈忠英，编著. 实用生物体视学技术. 广州：中山大学出版社，1991. 64～89.
4，刘伯宁. 应用图像分析仪对足月妊娠胎盘不同平面的体视学研究. 上海医学，1994，17(1)：14～16.
5，杨慧霞，周世梅，沈祝萱. 妊娠期糖尿病胎盘病理分析. 中华妇产科杂志，1993，28(12)：714～716.
6，杨慧霞，周世梅，严仁英. 妊娠期糖尿病患者胎盘免疫组织化学超微结构及其功能研究. 北京医科大学学报，1994，26(5)：335～337.
(修回日期：2000-05-07), http://www.100md.com
单位：510120 广州医学院第一附属医院妇产科
关键词：糖尿病，妊娠；胎盘；绒毛膜绒毛；显微镜检查，电子，扫描透射；体视学
实用医学杂志001014 摘 要 目的：探讨妊娠期糖尿病患者胎盘微绒毛的定量变化过程，进而解释其形态学改变的特征及围产儿患病率较高的原因。方法：取足月妊娠期糖尿病孕妇及正常孕妇胎盘各8例，常规制成超薄切片，电镜下观察合体细胞微绒毛，并进行体视学的测量。结果：妊娠期糖尿病组的胎盘合体细胞微绒毛疏密不均，排列紊乱。体视学测定发现妊娠期糖尿病微绒毛体积密度(Vv)、表面积密度(Sv)、数密度(Nv)小于对照组，差异均有显著性意义(P<0.05)。结论：妊娠期糖尿病胎盘功能及代偿能力较低，其改变与缺氧时胎盘变化相一致，反映了妊娠期糖尿病时有可能存在缺氧，妊娠晚期应适当增加对孕妇供氧及严密的监护，防止胎盘功能失代偿，造成胎儿宫内缺氧。
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妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)是指妊娠期首次发现或发生的糖代谢异常。GDM发病率约占孕妇的1%～2%[1]，在妊娠期未能得到及时诊断或未经合理治疗，可严重危害母婴健康[2]。胎盘微绒毛是胎盘进行物质交换的场所，其含量和功能与胎儿生长密切相关。本研究通过对GDM胎盘微绒毛的电镜水平的形态学观察和体视学测定，探讨GDM胎盘组织结构的定量变化过程。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择本院1998年4月～1999年2月间住院分娩的GDM患者及正常孕妇各8例，分别作为GDM组和对照组。两组均要求无严重内科及孕期合并症。对照组要求孕期检查除外GDM，无胎儿畸形或死胎发生，近1周未用影响糖代谢的药物。GDM组产前检查诊断为GDM。GDM诊断标准：对所有孕妇于孕24～28周进行血糖初筛试验，阳性者行口服糖耐量(OGTT)试验，本院选用NDDG标准，即空腹口服100 g葡萄糖，若空腹血糖<5.8 mmol/L，服糖后1 h血糖≥10.6 mmol/L，2 h血糖≥9.2 mmol/L，3 h血糖≥8.1 mmol/L，三项中有两项或以上达到标准则诊断为GDM。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 标本处理 胎盘娩出后，立即在胎盘母体面底板区的中间带和中央带不同部位随机取5块组织，大小3 mm×3 mm×3 mm，固定、脱水、渗透、包埋后，用LKB Nova型超薄切片机切片，染色后用JEM-100CX Ⅱ型透射电镜进行观察。每张切片拍摄照片2张，要求随机拍摄，合体细胞游离面与平行线成30～35°角。
1.2.2 测量方法 使用自制的测试网，大小为80 mm×120 mm，点间距(每小格长度)为5 mm，测试网共有352个测试点，测试线总长为1 760 mm。测试时，将测试网覆盖在电镜照片上，测试内容以绒毛为参照系。按计算公式[3]计算测试微绒毛的密度参数：体积密度(Vv)、表面积密度(Sv)、数密度(Nv)。
1.2.3 统计方法 用t检验比较各项检测指标组间差异的显著性，P<0.05为差异有显著意义。
, 百拇医药
2 结果
2.1 一般情况比较 见表1。
表1 两组孕妇一般情况比较(±s) 组别
例数
年龄(岁)
孕周(周)
婴儿出生体重(g)
GDM组
8
30.1±6.1
39.3±6.6
3 577±142
, 百拇医药
对照组
8
27.8±5.5
39.5±7.3
3 278±153
注：两组比较均P>0.05
2.2 透射电镜下胎盘微绒毛形态学改变 正常足月妊娠胎盘绒毛合体细胞位于胎盘绒毛的表层，其表面的微绒毛形态规则，分布均匀，排列整齐，微绒毛长约1～1.85 μ m，直径相对一致，末端略有膨大(图1)。GDM组与对照组相比，合体细胞变异较大，微绒毛疏密不均，排列紊乱，局部见微绒毛增生，部分微绒毛稀疏，甚至缺失，变短、变细，扭曲变形，可见分支状微绒毛，部分微绒毛顶端膨大成球拍状，部分微绒毛表面可见絮状物附着(图2)。合体细胞游离面质膜常内陷，形成有质膜包裹的内含微绒毛的泡状结构。
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2.3 两组胎盘绒毛微绒毛体视学参数变化 见表2。GDM组与对照组相比，Vv，Sv，Nv均小于对照组，差异有显著意义。
图1 正常足月妊娠盘合体细胞微绒毛(MV)形态规则，排列整齐×2000
图2 妊娠期糖尿病胎盘合体细胞微绒毛(MV)排列紊乱，局部缺失，可见絮状物沉积(↑)×2000
3 讨论
3.1 关于胎盘体视学结果的影响因素 体视学是由二维结构信息定量推论三维结构信息的科学，在研究的过程中有很多因素都可能影响到结果。体视学的结论与样品数、取材方法和部位、固定方式和制片过程等因素有关。由于胎盘体积大，自胎盘的胎儿面至母体面的不同层次内，绒毛干一再分支，各层次内母血流量分布亦不完全一致，而测试部位又仅是其中极小一部分，故想从所得参数中推算整个胎盘的各项指标，必须考虑如何科学地取材和测试。对于胎盘的取材部位是否具有代表性尚有争议。国内刘伯宁[4]近年应用图像分析仪对足月妊娠胎盘不同平面的体视学研究结果显示，底板区与中间区绒毛总数、绒毛Vv、绒毛Sv无显著差异，而与绒毛板区相比有显著差异。因此，本研究严格在中央带、中间带的底板区取材。
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表2 两组胎盘绒毛合成区微绒毛体视学参数比较(±s) 组别
例数
Vv
Sv
Nv
对照组
8
0.1527±0.0169
2.4878±0.4254
15.2699±2.3687
GDM组
8
, 百拇医药
0.1287±0.0215
2.3986±0.3674
13.1291±2.7695
注：两组间参数比较均P<0.05
3.2 电镜下GDM胎盘绒毛的特点及其意义 微绒毛的存在，主要是扩大了细胞作用的表面积，有利于细胞进行物质交换。正常足月胎盘中约88%的绒毛合体滋养细胞表面均有发育良好的微绒毛覆盖。微绒毛的各种运输系统如微丝和特殊受体等超微结构，有利于小泡的形成，故微绒毛的出现，不仅增加了合体滋养细胞与母血接触的面积，且可促进微绒毛间腔的微胞饮作用。人类胎盘合体滋养细胞中营养物质的转运，包括微绒毛和胞饮作用的特殊运输系统，其功能与微绒毛及其所含微丝的密度和合体滋养细胞表面的微绒毛间腔密度直接相关。这些结构是胎盘功能的形态学基础。电镜下对绒毛的体视学研究，重点是微绒毛的测量。本组资料显示GDM组微绒毛的Vv，Sv，Nv均小于对照组，与国内报道相符[5～6]。由于GDM组绒毛Vv，Sv的下降，绒毛成熟不良，使物质交换的面积减少，会导致胎盘功能下降，甚至失代偿，其表现类似于妊娠合并糖尿病胎盘的微绒毛改变，也就是微绒毛数量的减少及形态的改变。GDM胎盘的改变与缺氧时胎盘变化相一致，反应了GDM时有可能缺氧，妊娠晚期应适当增加对孕妇供氧及严密的监护，防止胎盘功能失代偿，造成胎儿宫内缺氧。
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参考文献
1，董砚虎，主编. 糖尿病及其并发症当代治疗. 济南：山东科学技术出版社，1994. 231～232.
2，Persson B,Hanson U. Neonatal morbidities in gestational diabetes mellitus. Diabetes Care.1998，21(suppl 2)：B79～84.
3，申洪，沈忠英，编著. 实用生物体视学技术. 广州：中山大学出版社，1991. 64～89.
4，刘伯宁. 应用图像分析仪对足月妊娠胎盘不同平面的体视学研究. 上海医学，1994，17(1)：14～16.
5，杨慧霞，周世梅，沈祝萱. 妊娠期糖尿病胎盘病理分析. 中华妇产科杂志，1993，28(12)：714～716.
6，杨慧霞，周世梅，严仁英. 妊娠期糖尿病患者胎盘免疫组织化学超微结构及其功能研究. 北京医科大学学报，1994，26(5)：335～337.
(修回日期：2000-05-07), http://www.100md.com