硫酸氯吡格雷的药理作用研究
作者：杨熠 何小云 赵专友 刘厚孝
单位：国家药品监督管理局天津药物研究院，天津 300193
关键词：硫酸氯吡格雷；血小板聚集；血栓
中国新药杂志001021 [摘要] 目的：观察硫酸氯吡格雷对大鼠血小板聚集功能及动 静脉 血栓形成的影响。方法：大鼠腹主动脉取血观察硫酸氯吡格雷对ADP 、花生四烯酸及胶原诱导的大鼠血小板聚集功能的影响。采用电刺激大鼠颈动脉内膜法、动 静脉旁路丝线法及结扎大鼠下腔静脉造成静脉停滞法观察了该药对实验性动静脉血栓形成的 抑制作用。结果：大鼠灌服硫酸氯吡格雷1，3，10mg/kg后，明显抑 制ADP、花生四烯酸及胶原诱导的血小板聚集，明显延长电流损伤血管内膜所致实验性动脉 血栓形成时间，抑制动静脉旁路丝线上血栓的生成；0.3，1，3mg/kg时即能明显抑制静脉停 滞而致的静脉血栓形成。结论：氯吡格雷能明显抑制ADP、花生四烯 酸及胶原诱导的大鼠血小板聚集，对大鼠动静脉血栓形成具有明显的抑制作用。其抗血小板 聚集及抗血栓作用强于噻氯匹定。
, 百拇医药
[中图分类号]R972 [文献标识码] B
[文章编号]1003-3734(2000)10-0712-03
Pharmacology research of clopidogrel
YANG Yi HE Xiao-yun ZHAO Zhuan-you LIU Hou-xiao
(Tianjin Institute of Pharmaceutical Research State Drug
Administration,Tianjing 300193,China)
[Abstract] Objective:To study the effects of clopidogrel on antipla telet aggregation and antithrombotic in rats.Methods:Blood sample of e theranaesthetized rats were collected by puncture of the abdominal aorta,to dete rminate the antiaggregating activity of clopidogrel in ADP,AA,collageninduced ra t platelet aggregation,to study the effect of clopidogrel on antithrombosis in t he model that thrombosis induced by electrical stimulation of the rat carotid ar tery,a silk thread inserted into an arteriovenous shunt and ligature of the infe rior vena cava.Result:Clopidogrel significantly inhibit ADP,AA,collage n-induced platelet aggregation,prolong thrombus formation time induced by elect rical stimulation,reduced thrombus weight in arteriovenous shunt at oral doses 1 ,3,10mg/kg in rats;at oral doses 0.3,1,3mg/kg,clopidogrel significantly inhibit stasis-induced venous thrombosis formation.Concluston:Clopidogrel sig nificantly inhibit ADP,AA,collagen-induced rat platelet aggregation and reduce arterial and venous thrombosis formation.The effects of antiplatelet and antithr ombosis of clopidogrel better than that of ticlopidine.
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[Key words] clopidogrel;platelet aggregation;thrombosis
硫酸氯吡格雷是继盐酸噻氯吡啶之后又一个抗血小板新药，主要用于治疗脑梗塞、心肌梗死 等动静脉血栓、以及与血小板集聚相关的疾病，其疗效及安全性均优于现有药物盐酸噻氯匹 定及阿司匹林。本研究旨在观察氯吡格雷对大鼠血小板聚集功能及对动静脉血栓形成的影响 。
1 实验材料
1.1 药物及试剂 硫酸氯吡格雷(简称氯吡格雷，白色粉末，由本院合成二室 提供，批号971004，含量98.63%)，临用前以蒸馏水配制成0.06，0.2，0.6，2，6m g/ml的药液供大鼠灌胃用；盐酸噻氯匹定(简称塞氯匹定，SIGMA公司，批号 6665A，含量 >99%)，临用前以蒸馏水配制成6mg/ml的药液供大鼠灌胃用；ADP、花生四烯酸(SIGMA公司) ； 胶原：称取大鼠腹部去毛皮肤1g，加入10ml生理盐水，于冰水浴中研磨，3 000 r/min离心1 0m in后取上清液，此上清液再以8 000r/min离心10min，第2次离心得的上清液制得100mg/ml母 液备用。
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1.2 动物 Wistar大鼠：天津药物研究院实验动物室提供。
2 方法与结果
2.1 对实验性动脉血栓形成的影响 雄性Wistar大鼠，体重(287±32)g，按 体重随机分为5组，每组10只。分别灌服蒸馏水(对照组)，氯吡格雷1，3，10mg/(kg.d)， 噻氯匹定30mg/(kg.d)×3d，给药体积均为0.5ml/100g，于末次给药后2h，以20%乌拉坦1g /kg腹腔麻醉，仰卧位固定，分离颈总动脉，并将BT87-2型实验性体内血栓形成仪的刺激电 极和温度探头钩上，刺激时间4min，刺激强度2mA，记录动脉血栓形成的时间。结果见表1。
表1 氯吡格雷对大鼠血栓形成及血小板聚集率的影响 (±s) 药物
剂量
, 百拇医药
mg/
( kg.d)
实验性
动脉血
栓形成
时间(s)
血小板聚集率
(%)
动静脉旁路血栓
(mg)
实验性静脉
血栓干重(mg)
, 百拇医药 ADP
花生四烯酸
胶原
湿重
干重
蒸馏水
-
710 ±95
61.2±13.2
71.7±10.3
63.5±8.0
28.3±8.7
8.1±1.6
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4.8±2 .0
氯吡格雷
0.3
2.0±0.6a
1
895±217a
36.3±18.8b
44.8±19.8b
36.9±21.3b
22.0±3.7a
7.6±0.9
, 百拇医药
1.7±1.0b
3
915±213a
27.4±12.2c
32.1±23.6c
36.2±17.9c
19.4±4.4b
6.4±1.5a
1.0±0.6c
10
, 百拇医药
1 184±477c
24.2±14.0c
33.3±19.9c
32.5±14.1c
17.3±4.8b
5.7±1.6b
30
13.4±6.1c
5.1±1.2c
噻氯匹定
, 百拇医药
30×3
1 159±365c
28.4±15.2c
50.5±20.1a
40 .8±11.5c
18.1±3.0b
5.6±1.4c
1.9±0.9c
与空白对照组相比，a：P<0.05，b：P<0.01，c：P<0.001
, 百拇医药
结果表明，大鼠灌服氯吡格雷1，3，10mg/(kg.d)后，与对照组比 较动脉血栓形成时间 分别推迟26%，29%，67%，呈一定的量效关系，表明氯吡格雷能明显延长大鼠实验性动脉血 栓形成时间。阳性药物噻氯匹定抗血栓形成作用亦较明显。氯吡格雷10mg/(kg.d)对血栓形 成时间的影响与噻氯匹定30mg/(kg.d)×3的作用相当(P>0.05)，而前者的剂量明显比 后者低，说明氯吡格雷的抗栓效力比噻氯匹定强。
2.2 抗血小板聚集作用 取上述体内血栓形成后的大鼠，腹主动脉取血，3.8 %枸橼酸钠与全血按1∶9混合，1 000r/m离心7min制备富血小板血浆(PRP)，3 000r/m离 心10min制备贫血小板血浆(PPP)，应用SPA-3型PPP自动平衡血小板聚集仪，将各诱导剂诱 导的血小板聚集百分数调至60%～70%。诱导剂ADP、花生四烯酸、胶原终浓度 分别为4μmol/L,2mmol/L,20mg/ml。结果见表1。
, 百拇医药
大鼠灌服氯吡格雷1，3，10mg/kg后，对ADP诱导的血小板聚集抑制百分率分别为41%，55% ，60%；对花生四烯酸诱导的血小板聚集抑制百分率分别为38%，55%，54%；对胶原诱导 的血小板聚集抑制百分率分别为42%，43%，49%。表明氯吡格雷能明显抑制ADP、花生四 烯酸及胶原诱导的血小板聚集。阳性药物噻氯匹定对ADP、花生四烯酸及胶原诱导的血小板 集聚抑制作用亦较明显，但其作用没有氯吡格雷强。
2.3 对大鼠动静脉旁路血栓的抑制作用 健康雄性Wistar大 鼠50只，体重(347±16)g，按体重随机分为6组，每组10只，分别灌服蒸馏水，氯吡格雷1， 3，10，30mg/(kg.d)，噻氯匹定30mg/(kg.d)×3d，给药体积均为0.5ml/100g，于末次给 药后2h戊巴比妥钠40mg/kg腹腔麻醉，仰卧位固定，气管插管。分离右颈总动脉和左颈外静 脉。取内径约1.5mm,长约25cm 3段套连的弧形聚乙烯插管，中段内置一根长6cm的4号手 术线 ，以肝素生理盐水溶液(25U/ml)充满聚乙烯管腔，将管的一端插入左颈外静脉，另一端插入 右颈总动脉，然后开放血流，并记录时间，血液从动脉流经聚乙烯管，返回静脉。15min血 栓形成后阻断血流，迅速取出手术线，称血栓湿重。血栓于室温下放置24h后，称其干重。 结果见表1。
, 百拇医药
大鼠灌服给予氯吡格雷1，3，10，30mg/kg后，产生剂量相关的抗栓作用，与对照组比较血 栓形成抑制百分数分别为22%，31%，39%，53%。表明氯吡格雷能明显抑制动静脉旁路血 栓的生成。阳性药物噻氯匹定抗血栓作用亦明显，但不如氯吡格雷强。
2.4 抗实验性静脉血栓形成作用 健康雄性Wistar大鼠50只 ，体重(303±37)g，按体重随机分为5组，每组10只，分别灌服蒸馏水，氯吡格雷0.3，1，3 mg/kg，噻氯匹定30mg/(kg.d)×3d，给药体积均为0.5ml/100g，于末次给药后2h戊巴比妥 钠40mg/kg腹腔麻醉，仰卧位固定，打开腹腔，分离下腔静脉，结扎左肾静脉分支下方下腔 静脉，并同时结扎两侧腰髂静脉及精索静脉，随后缝合腹壁。3h后，再次打开腹腔，在下腔 静脉结扎处下方1.5cm处穿线结扎，取下该段血管，纵向切开，取出血栓，于室温下放置24h 后，称取血栓干重。结果见表1。
大鼠灌服给予氯吡格雷0.3，1，3mg/kg后，产生剂量相关的抗静脉血栓作用，与对照组比较 抑制血栓形成百分数分别为58%，64%，79%。表明氯吡格雷对大鼠静脉血栓的形成具有明 显的抑制作用。阳性药物噻氯匹定抗静脉血栓作用亦明显，但不如氯吡格雷强。
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3 讨论
大鼠单次静注及口服给予相同剂量(10mg/kg)的硫酸氯吡格雷后，其时效曲线几乎平行，口 服2h时抗聚集作用达峰值，并维持稳态1～2d。随后抑制作用下降，但维持显著性至少5天 。由于氯吡格雷的抗聚集作用主要是直接抗ADP，因此口服氯吡格雷后同样可以抑制高浓度A DP、低浓度胶原(1μg/ml)及凝血酶(0.1U/ml)诱导的血小板聚集，而不能抑制较高浓度的 凝血酶诱导的血小板聚集，却仍能抑制较高浓度的胶原诱导的血小板聚集[1]。
雄性SD大鼠，静注组织促凝血酶原激酶(7μl/kg)，造成静脉停滞(10min)，再结扎下腔 静脉，于血栓形成前2h，口服氯吡格雷呈剂量依赖性的抑制血栓形成[ED50=(12.2± 1.3)μg/kg]。当仅结扎下腔静脉而不静注组织促凝血酶原激酶时，静注或口服给予氯吡 格雷能明显减少静脉血栓，ED50＝(1.0±0.6)和(2.1±0.75)mg/kg。这些 结果 表明，低血栓形成的条件下，ADP调解的血小板活性在静脉血栓形成中起重要作用，氯吡格 雷对 静脉血栓所产生的病理学变化具有治疗作用[2,3]。
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以电刺激大鼠颈动脉血管，引起刺激部位广泛的血管壁血栓形成。管壁血栓主要由血小板和 纤维组成，也伴有一些白细胞。于电刺激大鼠颈动脉前2h口服给予氯吡格雷，能够较强的抑 制血栓形成。呈明显的量效关系，ED50＝(1.0±0.2)mg/kg(n=10)。受损动脉 血管镜检结果表明：口服氯吡格雷大鼠在deendothelialized区出现血小板沉积[4] 。
大鼠单次口服氯吡格雷5mg/kg后3h明显减少动静脉旁路的血栓形成(减少33%，P <0.01)。抑肽酶对氯吡格雷抗聚集和抗血栓的作用无影响[5]。
大鼠注射四碘四氯荧光素后造成大脑中动脉阻塞(MCA)，口服氯吡格雷3，5mg/kg后，呈剂量 依赖性的增加MCA开放率，减少静注四碘四氯荧光素至MCA血流停止时间，缩小大脑梗塞范围 [6]。
氯吡格雷对ADP作用的抑制，能够阻断内皮损伤处和冠状动脉狭窄处由于血小板聚集而导致 的冠脉循环血流量变化[3,7]。
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静注或口服氯吡格雷延长大鼠断尾出血时间，且呈剂量依赖性，此作用与该药对抗ADP诱导 的血小板聚集作用有关。抑肽酶能较强的减少与氯吡格雷有关的出血时间的延长，且呈剂量 依赖性。据此，抑肽酶被选为拮抗与氯吡格雷和噻氯吡啶治疗有关的出血危险的药物[ 3,5]。
总之，氯吡格雷的药理研究结果表明，氯吡格雷具有较噻氯吡啶和阿司匹林更优异的药理活 性，其活性强而持久。因其很强的抗ADP诱导的血小板聚集作用及对静、动脉血栓形成的抑 制，使它能治疗和预防动脉粥样硬化、动静脉狭窄、损伤、手术等各种因素引起的血小板聚 集性血栓，预防和治疗中风、心梗等心脑血管及外周动脉血管疾病。有更好的应用前景。
[作者简介] 杨熠(1966-)，女，助理研究员。主要从事心血管药 理方面的研究。联系电话：(022)27474912。
[参考文献]
, 百拇医药
[1] Savi P,Herbert JM,Pflieger AM,et al.Importance of hepatic m etablism in the antiaggregating activity of the thienopyridine cloidogrel[J]. Biochem Pharmacol,1992,44(3)∶527-532.
[2] Herbert JM,Bernat A,Maffrand JP.Importance of platelets in experimental v enous thrombosis in the rat[J].Blood,1992，80(9)∶2281-2286.
[3] Herbert JM,Frehel D,Vallee E,et al.A novel antiplatelet and antithrom botic agent.Cardiovasc Drug Reviews,1993,11(2)∶180-198.
, 百拇医药
[4] Bernat A,Mares AM,Defreyn G,et al,Effect of various antiplatelet agen ts on acute arterial thrombosis in the rat.Thromb Haemost,1993.812-816.
[5] Jean-Marc Herbet,Andre Bernat ,Jean-Pierre.Apritin in reduce clopidogre l-induced prolongation of the bleeding time in the rat.Thromb Res,1993,71 ∶433-441.
[6] Umemura K,Ishihara H,Nakashima M.Anti-platelet effects of clopidogrel in rat middle cerebral artery thrombosis modle.Thromb Res,1995,80(3)∶209-21 6.
[7] Sheng-KunYaosk,Ober JC,Janice McNatt.ADP plays an important rol e in mediating platelet aggregation and cyclic flow variation in vivo in stenose d and endothe;ium-injured canine coronary arteries.Circ Res，1992,70(1)∶41 -46.
(收稿：2000-09-15), 百拇医药
单位：国家药品监督管理局天津药物研究院，天津 300193
关键词：硫酸氯吡格雷；血小板聚集；血栓
中国新药杂志001021 [摘要] 目的：观察硫酸氯吡格雷对大鼠血小板聚集功能及动 静脉 血栓形成的影响。方法：大鼠腹主动脉取血观察硫酸氯吡格雷对ADP 、花生四烯酸及胶原诱导的大鼠血小板聚集功能的影响。采用电刺激大鼠颈动脉内膜法、动 静脉旁路丝线法及结扎大鼠下腔静脉造成静脉停滞法观察了该药对实验性动静脉血栓形成的 抑制作用。结果：大鼠灌服硫酸氯吡格雷1，3，10mg/kg后，明显抑 制ADP、花生四烯酸及胶原诱导的血小板聚集，明显延长电流损伤血管内膜所致实验性动脉 血栓形成时间，抑制动静脉旁路丝线上血栓的生成；0.3，1，3mg/kg时即能明显抑制静脉停 滞而致的静脉血栓形成。结论：氯吡格雷能明显抑制ADP、花生四烯 酸及胶原诱导的大鼠血小板聚集，对大鼠动静脉血栓形成具有明显的抑制作用。其抗血小板 聚集及抗血栓作用强于噻氯匹定。
, 百拇医药
[中图分类号]R972 [文献标识码] B
[文章编号]1003-3734(2000)10-0712-03
Pharmacology research of clopidogrel
YANG Yi HE Xiao-yun ZHAO Zhuan-you LIU Hou-xiao
(Tianjin Institute of Pharmaceutical Research State Drug
Administration,Tianjing 300193,China)
[Abstract] Objective:To study the effects of clopidogrel on antipla telet aggregation and antithrombotic in rats.Methods:Blood sample of e theranaesthetized rats were collected by puncture of the abdominal aorta,to dete rminate the antiaggregating activity of clopidogrel in ADP,AA,collageninduced ra t platelet aggregation,to study the effect of clopidogrel on antithrombosis in t he model that thrombosis induced by electrical stimulation of the rat carotid ar tery,a silk thread inserted into an arteriovenous shunt and ligature of the infe rior vena cava.Result:Clopidogrel significantly inhibit ADP,AA,collage n-induced platelet aggregation,prolong thrombus formation time induced by elect rical stimulation,reduced thrombus weight in arteriovenous shunt at oral doses 1 ,3,10mg/kg in rats;at oral doses 0.3,1,3mg/kg,clopidogrel significantly inhibit stasis-induced venous thrombosis formation.Concluston:Clopidogrel sig nificantly inhibit ADP,AA,collagen-induced rat platelet aggregation and reduce arterial and venous thrombosis formation.The effects of antiplatelet and antithr ombosis of clopidogrel better than that of ticlopidine.
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[Key words] clopidogrel;platelet aggregation;thrombosis
硫酸氯吡格雷是继盐酸噻氯吡啶之后又一个抗血小板新药，主要用于治疗脑梗塞、心肌梗死 等动静脉血栓、以及与血小板集聚相关的疾病，其疗效及安全性均优于现有药物盐酸噻氯匹 定及阿司匹林。本研究旨在观察氯吡格雷对大鼠血小板聚集功能及对动静脉血栓形成的影响 。
1 实验材料
1.1 药物及试剂 硫酸氯吡格雷(简称氯吡格雷，白色粉末，由本院合成二室 提供，批号971004，含量98.63%)，临用前以蒸馏水配制成0.06，0.2，0.6，2，6m g/ml的药液供大鼠灌胃用；盐酸噻氯匹定(简称塞氯匹定，SIGMA公司，批号 6665A，含量 >99%)，临用前以蒸馏水配制成6mg/ml的药液供大鼠灌胃用；ADP、花生四烯酸(SIGMA公司) ； 胶原：称取大鼠腹部去毛皮肤1g，加入10ml生理盐水，于冰水浴中研磨，3 000 r/min离心1 0m in后取上清液，此上清液再以8 000r/min离心10min，第2次离心得的上清液制得100mg/ml母 液备用。
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1.2 动物 Wistar大鼠：天津药物研究院实验动物室提供。
2 方法与结果
2.1 对实验性动脉血栓形成的影响 雄性Wistar大鼠，体重(287±32)g，按 体重随机分为5组，每组10只。分别灌服蒸馏水(对照组)，氯吡格雷1，3，10mg/(kg.d)， 噻氯匹定30mg/(kg.d)×3d，给药体积均为0.5ml/100g，于末次给药后2h，以20%乌拉坦1g /kg腹腔麻醉，仰卧位固定，分离颈总动脉，并将BT87-2型实验性体内血栓形成仪的刺激电 极和温度探头钩上，刺激时间4min，刺激强度2mA，记录动脉血栓形成的时间。结果见表1。
表1 氯吡格雷对大鼠血栓形成及血小板聚集率的影响 (±s) 药物
剂量
, 百拇医药
mg/
( kg.d)
实验性
动脉血
栓形成
时间(s)
血小板聚集率
(%)
动静脉旁路血栓
(mg)
实验性静脉
血栓干重(mg)
, 百拇医药 ADP
花生四烯酸
胶原
湿重
干重
蒸馏水
-
710 ±95
61.2±13.2
71.7±10.3
63.5±8.0
28.3±8.7
8.1±1.6
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4.8±2 .0
氯吡格雷
0.3
2.0±0.6a
1
895±217a
36.3±18.8b
44.8±19.8b
36.9±21.3b
22.0±3.7a
7.6±0.9
, 百拇医药
1.7±1.0b
3
915±213a
27.4±12.2c
32.1±23.6c
36.2±17.9c
19.4±4.4b
6.4±1.5a
1.0±0.6c
10
, 百拇医药
1 184±477c
24.2±14.0c
33.3±19.9c
32.5±14.1c
17.3±4.8b
5.7±1.6b
30
13.4±6.1c
5.1±1.2c
噻氯匹定
, 百拇医药
30×3
1 159±365c
28.4±15.2c
50.5±20.1a
40 .8±11.5c
18.1±3.0b
5.6±1.4c
1.9±0.9c
与空白对照组相比，a：P<0.05，b：P<0.01，c：P<0.001
, 百拇医药
结果表明，大鼠灌服氯吡格雷1，3，10mg/(kg.d)后，与对照组比 较动脉血栓形成时间 分别推迟26%，29%，67%，呈一定的量效关系，表明氯吡格雷能明显延长大鼠实验性动脉血 栓形成时间。阳性药物噻氯匹定抗血栓形成作用亦较明显。氯吡格雷10mg/(kg.d)对血栓形 成时间的影响与噻氯匹定30mg/(kg.d)×3的作用相当(P>0.05)，而前者的剂量明显比 后者低，说明氯吡格雷的抗栓效力比噻氯匹定强。
2.2 抗血小板聚集作用 取上述体内血栓形成后的大鼠，腹主动脉取血，3.8 %枸橼酸钠与全血按1∶9混合，1 000r/m离心7min制备富血小板血浆(PRP)，3 000r/m离 心10min制备贫血小板血浆(PPP)，应用SPA-3型PPP自动平衡血小板聚集仪，将各诱导剂诱 导的血小板聚集百分数调至60%～70%。诱导剂ADP、花生四烯酸、胶原终浓度 分别为4μmol/L,2mmol/L,20mg/ml。结果见表1。
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大鼠灌服氯吡格雷1，3，10mg/kg后，对ADP诱导的血小板聚集抑制百分率分别为41%，55% ，60%；对花生四烯酸诱导的血小板聚集抑制百分率分别为38%，55%，54%；对胶原诱导 的血小板聚集抑制百分率分别为42%，43%，49%。表明氯吡格雷能明显抑制ADP、花生四 烯酸及胶原诱导的血小板聚集。阳性药物噻氯匹定对ADP、花生四烯酸及胶原诱导的血小板 集聚抑制作用亦较明显，但其作用没有氯吡格雷强。
2.3 对大鼠动静脉旁路血栓的抑制作用 健康雄性Wistar大 鼠50只，体重(347±16)g，按体重随机分为6组，每组10只，分别灌服蒸馏水，氯吡格雷1， 3，10，30mg/(kg.d)，噻氯匹定30mg/(kg.d)×3d，给药体积均为0.5ml/100g，于末次给 药后2h戊巴比妥钠40mg/kg腹腔麻醉，仰卧位固定，气管插管。分离右颈总动脉和左颈外静 脉。取内径约1.5mm,长约25cm 3段套连的弧形聚乙烯插管，中段内置一根长6cm的4号手 术线 ，以肝素生理盐水溶液(25U/ml)充满聚乙烯管腔，将管的一端插入左颈外静脉，另一端插入 右颈总动脉，然后开放血流，并记录时间，血液从动脉流经聚乙烯管，返回静脉。15min血 栓形成后阻断血流，迅速取出手术线，称血栓湿重。血栓于室温下放置24h后，称其干重。 结果见表1。
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大鼠灌服给予氯吡格雷1，3，10，30mg/kg后，产生剂量相关的抗栓作用，与对照组比较血 栓形成抑制百分数分别为22%，31%，39%，53%。表明氯吡格雷能明显抑制动静脉旁路血 栓的生成。阳性药物噻氯匹定抗血栓作用亦明显，但不如氯吡格雷强。
2.4 抗实验性静脉血栓形成作用 健康雄性Wistar大鼠50只 ，体重(303±37)g，按体重随机分为5组，每组10只，分别灌服蒸馏水，氯吡格雷0.3，1，3 mg/kg，噻氯匹定30mg/(kg.d)×3d，给药体积均为0.5ml/100g，于末次给药后2h戊巴比妥 钠40mg/kg腹腔麻醉，仰卧位固定，打开腹腔，分离下腔静脉，结扎左肾静脉分支下方下腔 静脉，并同时结扎两侧腰髂静脉及精索静脉，随后缝合腹壁。3h后，再次打开腹腔，在下腔 静脉结扎处下方1.5cm处穿线结扎，取下该段血管，纵向切开，取出血栓，于室温下放置24h 后，称取血栓干重。结果见表1。
大鼠灌服给予氯吡格雷0.3，1，3mg/kg后，产生剂量相关的抗静脉血栓作用，与对照组比较 抑制血栓形成百分数分别为58%，64%，79%。表明氯吡格雷对大鼠静脉血栓的形成具有明 显的抑制作用。阳性药物噻氯匹定抗静脉血栓作用亦明显，但不如氯吡格雷强。
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3 讨论
大鼠单次静注及口服给予相同剂量(10mg/kg)的硫酸氯吡格雷后，其时效曲线几乎平行，口 服2h时抗聚集作用达峰值，并维持稳态1～2d。随后抑制作用下降，但维持显著性至少5天 。由于氯吡格雷的抗聚集作用主要是直接抗ADP，因此口服氯吡格雷后同样可以抑制高浓度A DP、低浓度胶原(1μg/ml)及凝血酶(0.1U/ml)诱导的血小板聚集，而不能抑制较高浓度的 凝血酶诱导的血小板聚集，却仍能抑制较高浓度的胶原诱导的血小板聚集[1]。
雄性SD大鼠，静注组织促凝血酶原激酶(7μl/kg)，造成静脉停滞(10min)，再结扎下腔 静脉，于血栓形成前2h，口服氯吡格雷呈剂量依赖性的抑制血栓形成[ED50=(12.2± 1.3)μg/kg]。当仅结扎下腔静脉而不静注组织促凝血酶原激酶时，静注或口服给予氯吡 格雷能明显减少静脉血栓，ED50＝(1.0±0.6)和(2.1±0.75)mg/kg。这些 结果 表明，低血栓形成的条件下，ADP调解的血小板活性在静脉血栓形成中起重要作用，氯吡格 雷对 静脉血栓所产生的病理学变化具有治疗作用[2,3]。
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以电刺激大鼠颈动脉血管，引起刺激部位广泛的血管壁血栓形成。管壁血栓主要由血小板和 纤维组成，也伴有一些白细胞。于电刺激大鼠颈动脉前2h口服给予氯吡格雷，能够较强的抑 制血栓形成。呈明显的量效关系，ED50＝(1.0±0.2)mg/kg(n=10)。受损动脉 血管镜检结果表明：口服氯吡格雷大鼠在deendothelialized区出现血小板沉积[4] 。
大鼠单次口服氯吡格雷5mg/kg后3h明显减少动静脉旁路的血栓形成(减少33%，P <0.01)。抑肽酶对氯吡格雷抗聚集和抗血栓的作用无影响[5]。
大鼠注射四碘四氯荧光素后造成大脑中动脉阻塞(MCA)，口服氯吡格雷3，5mg/kg后，呈剂量 依赖性的增加MCA开放率，减少静注四碘四氯荧光素至MCA血流停止时间，缩小大脑梗塞范围 [6]。
氯吡格雷对ADP作用的抑制，能够阻断内皮损伤处和冠状动脉狭窄处由于血小板聚集而导致 的冠脉循环血流量变化[3,7]。
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静注或口服氯吡格雷延长大鼠断尾出血时间，且呈剂量依赖性，此作用与该药对抗ADP诱导 的血小板聚集作用有关。抑肽酶能较强的减少与氯吡格雷有关的出血时间的延长，且呈剂量 依赖性。据此，抑肽酶被选为拮抗与氯吡格雷和噻氯吡啶治疗有关的出血危险的药物[ 3,5]。
总之，氯吡格雷的药理研究结果表明，氯吡格雷具有较噻氯吡啶和阿司匹林更优异的药理活 性，其活性强而持久。因其很强的抗ADP诱导的血小板聚集作用及对静、动脉血栓形成的抑 制，使它能治疗和预防动脉粥样硬化、动静脉狭窄、损伤、手术等各种因素引起的血小板聚 集性血栓，预防和治疗中风、心梗等心脑血管及外周动脉血管疾病。有更好的应用前景。
[作者简介] 杨熠(1966-)，女，助理研究员。主要从事心血管药 理方面的研究。联系电话：(022)27474912。
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(收稿：2000-09-15), 百拇医药