HLA-DR4亚型及其分子三维结构模拟分析在骨髓移植中的应用研究
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中国病理生理杂志 2000年第10期第16卷 第七届肿瘤和第
作者：孙玉英 孔繁华 奚永志
单位：军事医学科学院附属医院， 北京 100039
关键词：
中国病理生理杂志0010235
目的：建立HLA-DR4亚型的套式PCR-SSP分型方法，为临床骨髓移植提供可靠依据，并寻找HLA-DR4亚型与各种白血病之间的联系。探讨HLA三维构象模拟分析在预测GVHD中的作用，以及寻找HLA移植可容许抗原。方法：盐析法提取75例人外周血标本DNA。建立并使用套式PCR-SSP分型方法。使用MLR实验对1例无血缘关系骨髓移植供、受体进行GVHD发病风险分析。通过INTERNET进入EXPACY-SWISSMODELLING分子模拟服务器，对有关HLA-DR4基因亚型进行HLA三维结构的分析比较。结果：共鉴定出8个DR4亚型，即HLA-DRB10401，0402，0403，0404，0405，0406，0410，0411。对41例无血缘关系供髓者的HLA-DR4亚型进行了基因频率的分析，上述基因亚型的频率依次为：0.10,0.02,0.12,0.05,0.39,0.27,0.07,0.02。对1家中出现的不同DR4亚型，以及2例DR4表型纯合而等位基因为杂合态的标本进行了正确分型，这对临床移植起到了指导作用。由于HLA-DR4基因亚型在中国正常无关人群与白血病人群中的频率均为最高，本文首次对HLA-DRB10405在这种两人群中的分布进行了比较，发现HLA-DRB10405亚型与白血病发病之间并无内在联系。本文检测到的一例无血缘关系供、受体，除HLA-DR4外，其Ⅰ、Ⅱ类型别均相合。供体为HLA-DRB10401，受体为HLA-DRB10405，其混合淋巴细胞结果为：双向SI=7.50,GVH的发病风险为RR=16.60%，可见体外预测GVHD的发病风险是很高的。0401及0405仅在蛋白质一级序列的第57位(D→S)上有一个氨基酸的差别，但两者的空间结构却因此有了明显差异，这些差异可能是GVHD发生的分子生物学基础。对文献报道的两例仅DR4亚型不合，BMT后发生GVHD的供、受体病例进行了HLA-DR4亚型分子三维结构分析，发现它们空间结构上的差异大小与BMT后GVHD的发生及其程度密切相关。结论：HLA-DR4亚型的套式PCR-SSP分型方法分辨率高、特异性强，可为临床骨髓移植及基础研究提供科学依据，尤其对疑难病例及无血缘关系的供、受体骨髓移植有重要意义。HLA分子三维结构模拟分析可以预测HLA不完全相配的个体BMT后GVHD的发生情况，可以作为筛选HLA移植可容许抗原的简易方法，但其科学性及实用性有待于更多的临床标本进行证实。, http://www.100md.com
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中国病理生理杂志0010235
目的：建立HLA-DR4亚型的套式PCR-SSP分型方法，为临床骨髓移植提供可靠依据，并寻找HLA-DR4亚型与各种白血病之间的联系。探讨HLA三维构象模拟分析在预测GVHD中的作用，以及寻找HLA移植可容许抗原。方法：盐析法提取75例人外周血标本DNA。建立并使用套式PCR-SSP分型方法。使用MLR实验对1例无血缘关系骨髓移植供、受体进行GVHD发病风险分析。通过INTERNET进入EXPACY-SWISSMODELLING分子模拟服务器，对有关HLA-DR4基因亚型进行HLA三维结构的分析比较。结果：共鉴定出8个DR4亚型，即HLA-DRB10401，0402，0403，0404，0405，0406，0410，0411。对41例无血缘关系供髓者的HLA-DR4亚型进行了基因频率的分析，上述基因亚型的频率依次为：0.10,0.02,0.12,0.05,0.39,0.27,0.07,0.02。对1家中出现的不同DR4亚型，以及2例DR4表型纯合而等位基因为杂合态的标本进行了正确分型，这对临床移植起到了指导作用。由于HLA-DR4基因亚型在中国正常无关人群与白血病人群中的频率均为最高，本文首次对HLA-DRB10405在这种两人群中的分布进行了比较，发现HLA-DRB10405亚型与白血病发病之间并无内在联系。本文检测到的一例无血缘关系供、受体，除HLA-DR4外，其Ⅰ、Ⅱ类型别均相合。供体为HLA-DRB10401，受体为HLA-DRB10405，其混合淋巴细胞结果为：双向SI=7.50,GVH的发病风险为RR=16.60%，可见体外预测GVHD的发病风险是很高的。0401及0405仅在蛋白质一级序列的第57位(D→S)上有一个氨基酸的差别，但两者的空间结构却因此有了明显差异，这些差异可能是GVHD发生的分子生物学基础。对文献报道的两例仅DR4亚型不合，BMT后发生GVHD的供、受体病例进行了HLA-DR4亚型分子三维结构分析，发现它们空间结构上的差异大小与BMT后GVHD的发生及其程度密切相关。结论：HLA-DR4亚型的套式PCR-SSP分型方法分辨率高、特异性强，可为临床骨髓移植及基础研究提供科学依据，尤其对疑难病例及无血缘关系的供、受体骨髓移植有重要意义。HLA分子三维结构模拟分析可以预测HLA不完全相配的个体BMT后GVHD的发生情况，可以作为筛选HLA移植可容许抗原的简易方法，但其科学性及实用性有待于更多的临床标本进行证实。, http://www.100md.com