缺氧对星形胶质细胞表达P450 2c11表达mRNA的影响
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中国病理生理杂志 2000年第10期第16卷 第三届消化专业
作者：范有明 高钰琪
单位：第三军医大学病理生理学教研室 高原医学研究室，重庆 400038
关键词：
应用细胞培养
应用细胞培养、免疫组化、逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术，观察缺氧和/或谷氨酸对体外培养的星形胶质细胞表达细胞色素P450 2c11mRNA的影响，探讨大脑星形胶质细胞在缺氧性脑血管扩张反应中的作用。实验用新生2-3 d Wistar大鼠，取双侧大脑皮层组织进行星形胶质细胞原代培养。细胞长成单层后，传代，将第二代细胞经抗GFAP免疫组化鉴定后，随机分为4组：①对照组；②谷氨酸组；③缺氧组；④缺氧+谷氨酸组。每一组包括5个时相点：0h、3h、6h、12h、24h(以缺氧后开始记时)。于②和④组加入100μmol/L的L-谷氨酸。③和④组用95%N2/5%CO2进行缺氧。到规定时间后，提取细胞总RNA，进行TR-PCR扩增，电泳，凝胶扫描，测定产物积分光密度。结果：1.对照组和缺氧组各时相点星形胶质细胞P450 2c11 mRNA的表达量无显著差异。2.谷氨酸组P450 2c11 mRNA 6h开始显著增高，以后更为显著(24h内)。3.缺氧+谷氨酸组P450 2c11 3h开始显著增高，以后更为显著(24h内)。4.缺氧+谷氨酸组增高的幅度显著高于谷氨酸组。结论：谷氨酸可促使体外培养的星形胶质细胞P450 2c11 mRNA表达增多。单纯缺氧对体外培养的星形胶质细胞P450 2c11 mRNA表达无显著影响，但可使谷氨酸对星形胶质细胞P450 2c11 mRNA表达的上调作用增强。这一结果提示，缺氧和谷氨酸协同作用，使P450 2c11 mRNA表达增强，后者催化化生四烯酸生成环氧二十三烯酸，这可能是缺氧性脑血管扩张的重要机制之一。, 百拇医药
单位：第三军医大学病理生理学教研室 高原医学研究室，重庆 400038
关键词：
应用细胞培养
应用细胞培养、免疫组化、逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术，观察缺氧和/或谷氨酸对体外培养的星形胶质细胞表达细胞色素P450 2c11mRNA的影响，探讨大脑星形胶质细胞在缺氧性脑血管扩张反应中的作用。实验用新生2-3 d Wistar大鼠，取双侧大脑皮层组织进行星形胶质细胞原代培养。细胞长成单层后，传代，将第二代细胞经抗GFAP免疫组化鉴定后，随机分为4组：①对照组；②谷氨酸组；③缺氧组；④缺氧+谷氨酸组。每一组包括5个时相点：0h、3h、6h、12h、24h(以缺氧后开始记时)。于②和④组加入100μmol/L的L-谷氨酸。③和④组用95%N2/5%CO2进行缺氧。到规定时间后，提取细胞总RNA，进行TR-PCR扩增，电泳，凝胶扫描，测定产物积分光密度。结果：1.对照组和缺氧组各时相点星形胶质细胞P450 2c11 mRNA的表达量无显著差异。2.谷氨酸组P450 2c11 mRNA 6h开始显著增高，以后更为显著(24h内)。3.缺氧+谷氨酸组P450 2c11 3h开始显著增高，以后更为显著(24h内)。4.缺氧+谷氨酸组增高的幅度显著高于谷氨酸组。结论：谷氨酸可促使体外培养的星形胶质细胞P450 2c11 mRNA表达增多。单纯缺氧对体外培养的星形胶质细胞P450 2c11 mRNA表达无显著影响，但可使谷氨酸对星形胶质细胞P450 2c11 mRNA表达的上调作用增强。这一结果提示，缺氧和谷氨酸协同作用，使P450 2c11 mRNA表达增强，后者催化化生四烯酸生成环氧二十三烯酸，这可能是缺氧性脑血管扩张的重要机制之一。, 百拇医药